耐甲氧西林金黃色葡萄球菌裂解性噬菌體PhMASA-WJ的生物學(xué)特性及其對(duì)小鼠敗血癥的療效
發(fā)布時(shí)間:2021-11-06 07:16
目的探討耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)噬菌體PhMASA-WJ的生物學(xué)特性及其對(duì)小鼠敗血癥的療效,為開(kāi)發(fā)高效低毒的抗菌藥物奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。方法以MRSA(USA300)為宿主菌,從地下污水中分離篩選出1株噬菌體PhMASA-WJ,雙層瓊脂平板培養(yǎng)法測(cè)定噬菌體效價(jià),點(diǎn)滴法測(cè)定噬菌體裂解譜,確定最佳感染復(fù)數(shù)(multiplicity of infection,MOI),提取噬菌體全基因組并進(jìn)行酶切鑒定,電鏡觀察噬菌體形態(tài),并檢測(cè)噬菌體的體外裂解效果、安全性及其對(duì)小鼠敗血癥的療效。結(jié)果 PhMASA-WJ在USA300菌苔上形成直徑1~2 mm的圓形、透明且邊界清晰的噬菌斑,PhMASA-WJ效價(jià)為7. 1×108 PFU/m L,其為專(zhuān)一裂解金黃色葡萄球菌的噬菌體,最佳MOI為0. 001,屬于RNA病毒,基因組大小約23 000 bp。電鏡觀察顯示,PhMASA-WJ屬于有尾噬菌體目肌尾噬菌體科。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí),PhMASA-WJ對(duì)小鼠無(wú)毒副作用,敗血癥小鼠經(jīng)PhMASA-WJ...
【文章來(lái)源】:中國(guó)生物制品學(xué)雜志. 2020,33(05)CSCD
【文章頁(yè)數(shù)】:6 頁(yè)
【部分圖文】:
點(diǎn)滴法檢測(cè)噬菌體
噬菌體PhMASA-WJ噬菌斑形態(tài)
1%瓊脂糖凝膠電泳分析顯示,提取的噬菌體PhMASA-WJ基因組濃度及純度均較好,大小約23 000 bp;酶切分析表明,PhMASA-WJ基因組對(duì)DNA酶不敏感,對(duì)RNA酶敏感,無(wú)HindⅢ和BamHⅠ酶切位點(diǎn),表明PhMASA-WJ為RNA噬菌體。見(jiàn)圖3。2.4 噬菌體的電鏡觀察
本文編號(hào):3479421
【文章來(lái)源】:中國(guó)生物制品學(xué)雜志. 2020,33(05)CSCD
【文章頁(yè)數(shù)】:6 頁(yè)
【部分圖文】:
點(diǎn)滴法檢測(cè)噬菌體
噬菌體PhMASA-WJ噬菌斑形態(tài)
1%瓊脂糖凝膠電泳分析顯示,提取的噬菌體PhMASA-WJ基因組濃度及純度均較好,大小約23 000 bp;酶切分析表明,PhMASA-WJ基因組對(duì)DNA酶不敏感,對(duì)RNA酶敏感,無(wú)HindⅢ和BamHⅠ酶切位點(diǎn),表明PhMASA-WJ為RNA噬菌體。見(jiàn)圖3。2.4 噬菌體的電鏡觀察
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