含內(nèi)參的登革病毒與基孔肯雅病毒3重?zé)晒舛縋CR檢測方法的建立與評估
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【摘要】:目的建立一種含內(nèi)參的,針對登革病毒和基孔肯雅病毒核酸檢測的3重?zé)晒舛縋CR方法。方法針對登革病毒3'端非結(jié)構(gòu)蛋白編碼區(qū)和基孔肯雅病毒5'端非結(jié)構(gòu)蛋白編碼區(qū)設(shè)計引物與探針,建立一套含有內(nèi)參的并且能同時檢測登革病毒和基孔肯雅病毒的3重實時熒光定量RT-PCR方法。對其最低檢測限和特異度進行驗證,通過檢測血清標(biāo)本對該方法進行臨床應(yīng)用評估。結(jié)果建立的3重?zé)晒舛縋CR登革病毒與基孔肯雅病毒絕對定量標(biāo)準(zhǔn)曲線顯示,病毒拷貝數(shù)的對數(shù)值與CT值之間具有良好的線性關(guān)系,梯度稀釋后的標(biāo)準(zhǔn)品核酸檢測均呈現(xiàn)典型的S型曲線。檢測日本腦炎病毒、西尼羅病毒、黃熱病毒、辛德畢斯病毒各1株,結(jié)果均為陰性,特異度為100%。用該方法檢測294份登革熱患者血清,靈敏度為100%,特異度為89.3%,陽性預(yù)測值為92.1%,陰性預(yù)測值為100%;測定33份基孔肯雅熱病患者血清的靈敏度、特異度及陰、陽性預(yù)測值均為100%。結(jié)論建立的含有內(nèi)參的能同時檢測登革病毒與基孔肯雅病毒的3重?zé)晒舛縋CR方法具有較高的靈敏度和特異度,可用于登革病毒與基孔肯雅病毒感染檢測,為早期篩查和鑒別登革病毒和基孔肯雅病毒感染提供依據(jù)。
【作者單位】: 南方醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生與熱帶醫(yī)學(xué)學(xué)院;廣東省疾病預(yù)防控制中心;佛山市疾病預(yù)防控制中心;上海之江生物科技股份有限公司;
【關(guān)鍵詞】: 重?zé)晒舛縍T-PCR 登革病毒 基孔肯雅病毒
【基金】:實驗室感染性材料溯源和生物風(fēng)險溯源關(guān)鍵技術(shù)和產(chǎn)品研究項目(No.2014AA021404)
【分類號】:R373.33
【正文快照】: ***登革病毒(dengue virus,DENV)屬于黃病毒科,黃病毒屬,基因組為單股正鏈RNA,可分為DENVⅠ、DENVⅡ、DENVⅢ、DENVⅣ4種血清型,各型之間存在一定的交叉反應(yīng)[1]。登革病毒感染引起登革熱(DF)、登革出血熱(DHF)及登革休克綜合征(DSS);卓涎挪《(Chikungunya virus,CHIKV)屬
【相似文獻】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條
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本文編號:344108
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