本文關(guān)鍵詞：不同分枝桿菌侵染對(duì)巨噬細(xì)胞免疫相關(guān)基因及microRNAs表達(dá)的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:結(jié)核病是結(jié)核分枝桿菌感染人體后引起的慢性感染性疾病。在結(jié)核病感染過程中,結(jié)核分枝桿菌會(huì)被巨噬細(xì)胞吞噬,并在其中存活、增殖,最終導(dǎo)致巨噬細(xì)胞的凋亡,進(jìn)而引發(fā)結(jié)核病�？梢�,若要更好地預(yù)防和治療結(jié)核病,就需要更深入的研究結(jié)核病的發(fā)病機(jī)制。本研究選取了與炎癥作用相關(guān)的免疫基因及與其調(diào)控相關(guān)的microRNAs,通過觀察巨噬細(xì)胞感染不同毒力的分枝桿菌后它們表達(dá)量的變化情況,探討分枝桿菌的感染機(jī)制及不同毒力的分枝桿菌與侵染的關(guān)系,為進(jìn)一步探究結(jié)核分枝桿菌與巨噬細(xì)胞的相互作用奠定基礎(chǔ)。方法:本研究選用誘導(dǎo)分化的THP-1巨噬細(xì)胞,構(gòu)建體外侵染模型,三種分枝桿菌H37Rv、H37Ra和BCG分別感染巨噬細(xì)胞12h、24h和36h后,收集細(xì)胞的總RNA并反轉(zhuǎn)錄成cDNA,采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR的方法檢測免疫相關(guān)基因IL-1、IL6R、RAB6B和TLR4的變化。根據(jù)預(yù)測miRNA靶基因的相關(guān)數(shù)據(jù)庫篩選出有調(diào)控關(guān)系的三種miRNAs,即microRNA-21、microRNA-155和microRNA-29a,將收集的總RNA中miRNAs部分采用一步加尾法進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄成為cDNA,同樣采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR的方法檢測它們表達(dá)量的變化情況。結(jié)果:1.H37Rv、H37Ra和BCG感染THP-1巨噬細(xì)胞12h,24h,36h后,通過Real-time PCR的方法檢測到:IL-1和THR4表達(dá)量全部上調(diào);RAB6B表達(dá)量全部下調(diào);H37Rv感染組在處理12h時(shí),IL6R表達(dá)量下調(diào)(P0.05),在感染后期表達(dá)量出現(xiàn)上調(diào);并且在BCG感染組在處理12h時(shí)IL6R表達(dá)量顯著上調(diào)(P0.05)。2.實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測到,三種分枝桿菌處理組在12h、24h和36h收集的樣品中,除12hBCG感染處理組microRNA-21下調(diào)以外,microRNA-21、microRNA-155和microRNA-29a表達(dá)量全部上調(diào)。BCG感染組在處理36h時(shí),miRNA-21表達(dá)量顯著上調(diào)(P0.05);H37Ra感染組處理24h時(shí),miRNA-21和miRNA-29a表達(dá)量顯著上調(diào)(P0.05)。結(jié)論:三種分枝桿菌H37Rv、H37Ra和BCG侵染巨噬細(xì)胞引起了免疫相關(guān)基因表達(dá)量發(fā)生變化;與目的基因相關(guān)的microRNA-21、microRNA-155和microRNA-29a的表達(dá)量均上調(diào),除12hBCG感染處理組microRNA-21下調(diào)以外。
【關(guān)鍵詞】：分枝桿菌 巨噬細(xì)胞 實(shí)時(shí)熒光定量 miRNA
【學(xué)位授予單位】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R52
【目錄】：

• 摘要3-4
• Abstract4-7
• 前言7-8
• 第一篇 文獻(xiàn)綜述8-16
• 1 結(jié)核病8
• 2 巨噬細(xì)胞吞噬功能8-9
• 3 非編碼RNA研究進(jìn)展9-16
• 3.1 MicroRNAs的生物學(xué)功能9-10
• 3.2 MicroRNAs在疾病中的作用10-11
• 3.3 MicroRNAs研究前景與展望11
• 3.4 LncRNA的生物學(xué)功能11-13
• 3.5 LncRNA在人類疾病發(fā)生發(fā)展中的作用13-14
• 3.6 LncRNA的研究前景與展望14-16
• 第二篇 研究內(nèi)容16-42
• 第一章 小鼠原代肺泡巨噬細(xì)胞的分離與THP-1 細(xì)胞的誘導(dǎo)分化16-23
• 1.1 材料與方法16-20
• 1.2 結(jié)果與分析20-21
• 1.3 討論21-22
• 1.4 小結(jié)22-23
• 第二章 THP-1 巨噬細(xì)胞感染H37Rv，H37Ra和BCG后免疫相關(guān)基因的表達(dá)23-34
• 2.1 材料和方法23-28
• 2.2 結(jié)果與分析28-33
• 2.3 討論33
• 2.4 小結(jié)33-34
• 第三章 THP-1 巨噬細(xì)胞感染H37Rv，H37Ra和BCG后microRNAs變化34-42
• 3.1 材料與方法34-36
• 3.2 結(jié)果與分析36-39
• 3.3 討論39-41
• 3.4 小結(jié)41-42
• 結(jié)論42-43
• 參考文獻(xiàn)43-48
• 附錄48-49
• 作者簡介49-50
• 致謝50

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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本文編號(hào)：314307