交叉引物恒溫?cái)U(kuò)增法檢測甲型H1N1流感病毒及臨床應(yīng)用
發(fā)布時(shí)間:2021-04-10 11:06
目的建立交叉引物恒溫?cái)U(kuò)增(Cross Priming Amplification,CPA)技術(shù)對甲型H1N1流感病毒進(jìn)行檢測的方法,并對該方法通過臨床標(biāo)本進(jìn)行評價(jià)。方法根據(jù)甲型H1N1流感病毒的保守序列設(shè)計(jì)特異性引物,并在同一溫度下實(shí)現(xiàn)RNA的逆轉(zhuǎn)錄和DNA擴(kuò)增,該擴(kuò)增產(chǎn)物可通過全封閉式核酸檢測裝置進(jìn)行檢測。14份健康人咽拭子標(biāo)本、7個其他呼吸道病毒和6個蟲媒病毒株被用來檢測CPA反應(yīng)的特異性;已知病毒滴度的甲型H1N1毒株進(jìn)行對照梯度稀釋,以測試CPA的敏感性;102份甲型H1N1臨床咽拭子標(biāo)本為檢測對象,評估其臨床的檢測的可行性。結(jié)果 CPA反應(yīng)未出現(xiàn)對健康樣本以及其他病毒產(chǎn)生交叉反應(yīng);對已知滴度的病毒進(jìn)行梯度稀釋檢測,證明CPA的敏感性為10拷貝/μL。對甲型H1N1流感臨床病例發(fā)病13d臨床標(biāo)本新建檢測方法的檢出率為100%,46d臨床標(biāo)本檢出率為79.31%,≥7d臨床標(biāo)本檢出率為9.09%。討論CPA具有較高的敏感性、特異性,對設(shè)備要求低,適合基層醫(yī)療單位對甲型H1N1流感發(fā)病早期診斷使用。
【文章來源】:中國人獸共患病學(xué)報(bào). 2015,31(03)北大核心CSCD
【文章頁數(shù)】:5 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
2 結(jié) 果
3 討 論
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]膠體金免疫層析試劑盒對甲型H1N1流感病毒(2009)抗原快速檢測的敏感性分析[J]. 田棣,何靜,劉祎,張萬菊,徐磊,陳功祥,周志統(tǒng),胡蕓文. 檢驗(yàn)醫(yī)學(xué). 2013(02)
[2]甲型H1N1流感病毒實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測方法的建立[J]. 尹航,楊煥良,陳艷,孟沙沙,劉麗萍,辛?xí)怨?陳化蘭,喬傳玲. 中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2013(01)
本文編號:3129525
【文章來源】:中國人獸共患病學(xué)報(bào). 2015,31(03)北大核心CSCD
【文章頁數(shù)】:5 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
2 結(jié) 果
3 討 論
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]膠體金免疫層析試劑盒對甲型H1N1流感病毒(2009)抗原快速檢測的敏感性分析[J]. 田棣,何靜,劉祎,張萬菊,徐磊,陳功祥,周志統(tǒng),胡蕓文. 檢驗(yàn)醫(yī)學(xué). 2013(02)
[2]甲型H1N1流感病毒實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測方法的建立[J]. 尹航,楊煥良,陳艷,孟沙沙,劉麗萍,辛?xí)怨?陳化蘭,喬傳玲. 中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2013(01)
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