目的:馬拉色菌是寄生于皮膚表面的常見(jiàn)真菌之一,與一些常見(jiàn)的炎癥性皮膚病的發(fā)病有著密切的關(guān)系,如脂溢性皮炎、馬拉色菌毛囊炎和特應(yīng)性皮炎等。真菌細(xì)胞外囊泡已在多種真菌中被發(fā)現(xiàn),其可參與細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)攝取、免疫調(diào)節(jié)和細(xì)胞-細(xì)胞通信等病理生理過(guò)程。研究表明合軸馬拉色菌可產(chǎn)生細(xì)胞外囊泡,其可誘導(dǎo)外周血單核細(xì)胞產(chǎn)生IL-4和TNF-?。然而,細(xì)胞外囊泡是否存在于其他馬拉色菌亞種中,及其對(duì)角質(zhì)形成細(xì)胞的作用,目前均未有報(bào)道。在前期工作中我們發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)于富含脂質(zhì)條件下的糠秕馬拉色菌ABC轉(zhuǎn)運(yùn)通道的表達(dá)上調(diào),文獻(xiàn)表明該通道的高表達(dá)與細(xì)胞外囊泡的合成相關(guān)。據(jù)此,本研究旨在探究糠秕馬拉色菌是否可產(chǎn)生細(xì)胞外囊泡,其對(duì)角質(zhì)形成細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)作用以及相關(guān)的分子機(jī)制,為馬拉色菌相關(guān)皮膚疾病的發(fā)病機(jī)制和治療提供重要的科學(xué)數(shù)據(jù)。研究方法:1、本研究首先利用蛋白組學(xué)的方法對(duì)培養(yǎng)于富含脂質(zhì)和缺乏脂質(zhì)條件下的糠秕馬拉色菌菌體蛋白的表達(dá)進(jìn)行鑒定,然后利用生物信息分析的方法對(duì)差異表達(dá)蛋白進(jìn)行了分析,對(duì)差異表達(dá)蛋白在GO與KEGG通路中的富集情況做了進(jìn)一步分析,后用PRM技術(shù)對(duì)蛋白組學(xué)結(jié)果進(jìn)行驗(yàn)證。2、通過(guò)FUN1染色法對(duì)待提取細(xì)胞外囊泡... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁(yè)數(shù)】：105 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

質(zhì)譜質(zhì)控檢測(cè)結(jié)果

中國(guó)醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文含量分別為 100%，75%，50%，25%和 0%。將數(shù)量為 1菌分別接種于各個(gè)培養(yǎng)基中，經(jīng)過(guò) 48 h 培養(yǎng)后，離心取沉菌落計(jì)數(shù)的方法，我們將不同脂質(zhì)濃度培養(yǎng)后的糠秕馬拉釋后涂布于標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)平板上，72 h 后記錄各個(gè)平皿中的菌養(yǎng)前相比，A 組（脂質(zhì)充足）的菌落數(shù)較培養(yǎng)前有明顯的）的菌落數(shù)較前無(wú)明顯差異，該結(jié)果說(shuō)明經(jīng)過(guò)無(wú)脂質(zhì)培養(yǎng)菌雖不增殖，但仍具有生物學(xué)活性（圖 2）。

圖 3. 所有樣本兩兩之間皮爾森相關(guān)系數(shù)。皮爾森系數(shù)越接近-1，表示兩者之間的負(fù)相關(guān)性越強(qiáng)（用綠色表示），反之皮爾森系數(shù)越接近 1，表示兩者之間正相關(guān)性越強(qiáng)（用紅色表示），皮爾森系數(shù)接近 0，表示相關(guān)性越弱（用白色表示）。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示所有樣本之間均具有較強(qiáng)的正相關(guān)性。注：A 代表實(shí)驗(yàn)組，E 代表對(duì)照組，數(shù)字代表樣本代號(hào)。3.3 差異蛋白 GO 富集分析對(duì)上述鑒定到的蛋白進(jìn)行注釋和差異表達(dá)篩選后，為檢測(cè)差異表達(dá)蛋白是否在某類功能中有顯著的富集趨勢(shì)，我們對(duì)上調(diào)及下調(diào)差異表達(dá)蛋白分別進(jìn)行了GO 富集分析，包括生物進(jìn)程、細(xì)胞組成和分子功能及其各自下屬的二級(jí)功能分類。結(jié)果顯示，上調(diào)的差異蛋白在“細(xì)胞組成”中主要富集于膜（membrane）系統(tǒng)；在“分子功能”中主要富集于絲氨酸型肽酶活性（serine-type peptidaseactivity）、絲氨酸水解酶活性（serine hydrolase activity）和水解酶活性（hydrolaseactivity）等功能中；在“生物學(xué)進(jìn)程”中主要富集于脂質(zhì)代謝進(jìn)程（lipid metabolic

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]馬拉色菌蛋白酶活性測(cè)定方法的建立及其應(yīng)用[J]. 曾蔚,賈文祥,冉玉平,鄺玉,趙紅梅,郭曉莉.  微生物學(xué)免疫學(xué)進(jìn)展. 2004(01)



本文編號(hào)：3094969