本文關(guān)鍵詞：結(jié)核病患兒T細(xì)胞亞群特征研究和基于流式細(xì)胞技術(shù)兒童結(jié)核病診斷方法的建立，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：兒童結(jié)核病長期處于被忽視的狀態(tài),近年來引起越來越多的關(guān)注,但關(guān)于結(jié)核病患兒的免疫狀態(tài)的報(bào)道仍非常有限。本文基于多色復(fù)雜流式技術(shù),首先系統(tǒng)研究了結(jié)核病患兒的T細(xì)胞亞群特征。本文結(jié)果顯示在大于等于5歲組,結(jié)核病患兒與健康兒童相比,T細(xì)胞總數(shù)、α β T、vδ2+T γδT、粘膜相關(guān)恒定T細(xì)胞(MAIT)、CD4+輔助T細(xì)胞(Th)、CD8+T、CD4/CD8雙陰性α β T細(xì)胞(DNT)、CD4/CD8雙陽性α βT細(xì)胞(DPT)數(shù)量顯著降低；CD4+ Th、CD8+T和調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg)的中心記憶T細(xì)胞(TCM)的百分率顯著降低,Th和Treg中的效應(yīng)記憶T細(xì)胞(TEM)百分率顯著升高。在小于5歲組,結(jié)核病患兒只有v δ2+γ δ T和DNT的細(xì)胞數(shù)量和Treg的TCM百分率,顯著低于健康兒童；Treg中的TEM百分率顯著高于健康兒童,其它差異均不顯著。以上結(jié)果揭示了結(jié)核病患兒,特別是大于等于5歲組結(jié)核病患兒T細(xì)胞亞群發(fā)生了廣泛的變化,這為今后兒童結(jié)核病T細(xì)胞的進(jìn)一步研究提供了重要基礎(chǔ)。本文建立了基于流式細(xì)胞技術(shù)的兒童結(jié)核病流式細(xì)胞診斷方法(FC法)。結(jié)核特異性抗原ESAT-6或CFP10刺激后,如果IFN-γ、TNF-α雙陽性或IFN-γ、IL-2雙陽性結(jié)核抗原特異性T細(xì)胞比例高于0.005%,則診斷為結(jié)核病。與T-SPOT. TB方法相比,FC法的敏感性為78.6%,高于T-SPOT. TB的敏感性(71.4%)；FC法和T-SPOT. TB的特異性皆為100%。T-SPOT. TB在小于5歲組的敏感性高于大于等于5歲組,而FC法不受年齡的影響。特別值得關(guān)注的是,FC法在肺結(jié)核(PTB)和肺結(jié)核合并肺外結(jié)核(PTB+EPTB)患兒中的敏感性為100%,而TSPOT在PTB和PTB+EPTB的敏感性分別為81.8%和88.9%,這說明FC法是一個很有前途的兒童結(jié)核病——特別是兒童肺結(jié)核的診斷方法。
【關(guān)鍵詞】：兒童結(jié)核病 T細(xì)胞亞群 流式細(xì)胞術(shù) T細(xì)胞應(yīng)答 細(xì)胞因子 生物標(biāo)志物
【學(xué)位授予單位】：華東師范大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R529.9
【目錄】：

• 摘要6-7
• Abstract7-9
• 縮寫表9-17
• 第一章 研究綜述17-29
• 第一節(jié) 結(jié)核病概述17-21
• 1.1.1 結(jié)核病的特點(diǎn)17-18
• 1.1.2 結(jié)核病的發(fā)展和現(xiàn)狀18
• 1.1.3 T細(xì)胞免疫應(yīng)答在結(jié)核病免疫中所起的作用18-21
• 第二節(jié) 兒童結(jié)核病21-25
• 1.2.1 兒童結(jié)核病的特點(diǎn)及研究現(xiàn)狀21-22
• 1.2.2 兒童結(jié)核病中T細(xì)胞作用的研究現(xiàn)狀22-24
• 1.2.3 兒童結(jié)核病T細(xì)胞免疫特征在結(jié)核病診斷中的應(yīng)用24-25
• 第三節(jié) 本論文的研究目的與研究方法25-29
• 1.3.1 本論文的研究目的25-26
• 1.3.2 本文的主要研究流程26-27
• 1.3.3 本論文的研究方法27-29
• 第二章 兒童結(jié)核病的T細(xì)胞免疫特征研究29-42
• 第一節(jié) 材料與方法29-32
• 2.1.1 研究對象29
• 2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑和耗材29-30
• 2.1.3 溶液配置30-31
• 2.1.4 主要儀器31
• 2.1.5 方法31-32
• 2.1.6. 數(shù)據(jù)的獲取和分析32
• 2.1.7 數(shù)據(jù)分析32
• 第二節(jié) 結(jié)果32-38
• 2.2.1 實(shí)驗(yàn)對象分析32
• 2.2.2 T細(xì)胞表型流式細(xì)胞分析方法的建立32-33
• 2.2.3 各類T細(xì)胞數(shù)量在結(jié)核病組和健康對照組之間的差異33-38
• 2.2.4 αβT細(xì)胞各亞群在結(jié)核病組和健康對照組之間的差異38
• 2.2.5 αβT細(xì)胞各分化亞群的組間比較38
• 第三節(jié) 討論與結(jié)論38-42
• 第三章 基于結(jié)核特異性T細(xì)胞應(yīng)答的流式細(xì)胞技術(shù)在兒童結(jié)核病診斷中的應(yīng)用42-53
• 第一節(jié) 研究綜述42
• 第二節(jié) 材料與方法42-46
• 3.2.1 材料42-43
• 3.2.2 方法43-45
• 3.2.3 T-SPOT.TB檢測方法45-46
• 3.2.4 數(shù)據(jù)分析46
• 第三節(jié) 結(jié)果46-53
• 3.3.1 實(shí)驗(yàn)對象分析46-47
• 3.3.2 抗原特異性T細(xì)胞用于兒童結(jié)核病診斷方法的建立47-49
• 3.3.3 FC法和Tspot法的一致性分析49-50
• 3.3.4 FC法和Tspot用于結(jié)核病診斷的具體分析50-51
• 第四節(jié) 討論與結(jié)論51-53
• 第四章 結(jié)果與展望53-55
• 第一節(jié) 結(jié)果53
• 4.1.1 兒童結(jié)核的T細(xì)胞免疫特征研究53
• 4.1.2 基于結(jié)核特異性T細(xì)胞應(yīng)答的流式細(xì)胞技術(shù)在兒童結(jié)核病診斷中的應(yīng)用53
• 第二節(jié) 不足與展望53-55
• 參考文獻(xiàn)55-63
• 致謝63-64

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