【摘要】：目的探究HBV感染對(duì)鐵調(diào)素表達(dá)的影響及鐵調(diào)素抗HBV活性的初步研究。方法收集71例慢性乙型病毒性肝炎(Chronic Hepatitis B,CHB)患者(CHB組)、24例健康體檢者(對(duì)照組)血清標(biāo)本,采用ELISA法檢測血清鐵調(diào)素(Hepc)水平,使用全自動(dòng)蛋白分析儀檢測血清鐵(SI)、鐵蛋白(SF)和轉(zhuǎn)鐵蛋白(TRf)水平。使用電化學(xué)發(fā)光全自動(dòng)免疫分析儀檢測血清IL-6水平。根據(jù)患者近期肝穿病理炎癥活動(dòng)度分級(jí)(G)結(jié)果將CHB組分為炎癥輕度組(G_1-G_2)、中度組(G_3)、重度組(G_4)比較Hepc、SI、SF、TRf水平。測定CHB組HBV-DNA、HBsAg、HBeAg水平,分析鐵調(diào)素水平與病毒學(xué)指標(biāo)、肝功生化指標(biāo)間的相關(guān)性。構(gòu)建HBV感染Huh7細(xì)胞模型,分別采用RT-qPCR,Western blot技術(shù)檢測肝細(xì)胞鐵調(diào)素的表達(dá)情況。使用鐵調(diào)素處理pcDNA1.3轉(zhuǎn)染的HepG2細(xì)胞及pSM2轉(zhuǎn)染的Huh7細(xì)胞,檢測并分析不同時(shí)間點(diǎn)鐵調(diào)素處理組與未處理組之間培養(yǎng)上清液中HBV-DNA、HBeAg水平的差異。結(jié)果與對(duì)照組相比CHB組SI、SF、IL-6、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、血清天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、血清總膽紅素(TBIL)均顯著升高,Hepcidin、TRf和可溶性轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(sTfR)、白蛋白(ALB)顯著降低(P0.05)。CHB患者血清鐵調(diào)素水平與HBV-DNA(r=-0.467,P0.05)、HBsAg(log_(10))(r=-0.567,P0.05)、HBeAg(r=-0.434,P0.05)呈顯著負(fù)相關(guān),與血清ALB、TBIL水平呈顯著正相關(guān)(P0.05),與ALT、AST水平未見明顯相關(guān)性(P0.05)。轉(zhuǎn)染細(xì)胞24 h,Hepc mRNA相對(duì)水平為(5.21±0.43),空白對(duì)照細(xì)胞的(0.73±0.14)顯著升高(P0.05),在轉(zhuǎn)染48 h,細(xì)胞Hepc mRNA水平為(8.45±0.61),較空白對(duì)照的(1.16±0.17)顯著升高(P0.05);在質(zhì)粒轉(zhuǎn)染48 h后,細(xì)胞Hepc蛋白相對(duì)表達(dá)量為(0.78±0.08),較空白對(duì)照的(0.41±0.02)顯著升高(P0.05)。與未處理組比較,pcDNA1.3轉(zhuǎn)染HepG2細(xì)胞鐵調(diào)素處理組在12h時(shí)即出現(xiàn)HBV DNA水平下降,在48h時(shí)HBV DNA水平顯著降低(P0.05),pSM2轉(zhuǎn)染Huh7細(xì)胞鐵調(diào)素處理組在24h即出現(xiàn)HBV DNA水平下降,在48h時(shí)HBV DNA水平顯著降低(P0.05)。與未處理組比較,pcDNA1.3轉(zhuǎn)染HepG2細(xì)胞鐵調(diào)素處理組在24h時(shí)即出現(xiàn)HBeAg表達(dá)下降,在48h時(shí)HBeAg表達(dá)顯著降低(P0.05),pSM2轉(zhuǎn)染Huh7細(xì)胞鐵調(diào)素處理組在24h時(shí)即出現(xiàn)HBeAg表達(dá)下降,在48h時(shí)HBeAg表達(dá)顯著降低(P0.05)。結(jié)論檢測鐵調(diào)素及其鐵代謝相關(guān)指標(biāo)有助于評(píng)估慢性乙型肝炎病情進(jìn)展,適當(dāng)予以鐵調(diào)素或者其相應(yīng)內(nèi)源性激活劑針對(duì)性地治療鐵超載CHB患者,是否可應(yīng)用于臨床,值得期待。并初步證明了鐵調(diào)素具有一定的抑制HBV復(fù)制的活性。
【圖文】：

安徽醫(yī)科大學(xué)碩士畢業(yè)論文P<0.05）、TBIL(圖 1E)水平呈顯著正相關(guān)性（r=0.467，P<0.05）�？梢� HBV 感染者血清鐵調(diào)素水平隨血清 ALB、TBIL 水平的升高而升高。3.3.4 乙型肝炎病毒感染者血清鐵調(diào)素水平與血清 ALT、AST 的相關(guān)性分析相關(guān)性分析結(jié)果顯示：HBV 感染者血清鐵調(diào)素與 ALT(圖 1F)（r=0.096，P=0.428）、AST(圖 1G)（r=0.044，P=0.716）水平未見明顯相關(guān)性（P>0.05）。

安徽醫(yī)科大學(xué)碩士畢業(yè)論文后，24h Hepcidin mRNA 相對(duì)表達(dá)量實(shí)驗(yàn)組(5.21±0.43)較對(duì)照組(0.73±0高，，48h 實(shí)驗(yàn)組(8.45±0.61)較對(duì)照組(1.16±0.17)顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)<0.05）(圖 2)。轉(zhuǎn)染 pCDNA1.3 質(zhì)粒與等量空載質(zhì)粒（pBlue-ks）48h 后實(shí)cidin 蛋 白相 對(duì) 表 達(dá)量 實(shí) 驗(yàn) 組 (0.78±0.08) 較 對(duì)照 組 (0.41±0.02) 顯 著<0.05），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)(圖 3)。
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R512.62

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本文編號(hào)：2709603