【摘要】：目的探究HBV感染對鐵調素表達的影響及鐵調素抗HBV活性的初步研究。方法收集71例慢性乙型病毒性肝炎(Chronic Hepatitis B,CHB)患者(CHB組)、24例健康體檢者(對照組)血清標本,采用ELISA法檢測血清鐵調素(Hepc)水平,使用全自動蛋白分析儀檢測血清鐵(SI)、鐵蛋白(SF)和轉鐵蛋白(TRf)水平。使用電化學發(fā)光全自動免疫分析儀檢測血清IL-6水平。根據患者近期肝穿病理炎癥活動度分級(G)結果將CHB組分為炎癥輕度組(G_1-G_2)、中度組(G_3)、重度組(G_4)比較Hepc、SI、SF、TRf水平。測定CHB組HBV-DNA、HBsAg、HBeAg水平,分析鐵調素水平與病毒學指標、肝功生化指標間的相關性。構建HBV感染Huh7細胞模型,分別采用RT-qPCR,Western blot技術檢測肝細胞鐵調素的表達情況。使用鐵調素處理pcDNA1.3轉染的HepG2細胞及pSM2轉染的Huh7細胞,檢測并分析不同時間點鐵調素處理組與未處理組之間培養(yǎng)上清液中HBV-DNA、HBeAg水平的差異。結果與對照組相比CHB組SI、SF、IL-6、丙氨酸氨基轉移酶(ALT)、血清天門冬氨酸氨基轉移酶(AST)、血清總膽紅素(TBIL)均顯著升高,Hepcidin、TRf和可溶性轉鐵蛋白受體(sTfR)、白蛋白(ALB)顯著降低(P0.05)。CHB患者血清鐵調素水平與HBV-DNA(r=-0.467,P0.05)、HBsAg(log_(10))(r=-0.567,P0.05)、HBeAg(r=-0.434,P0.05)呈顯著負相關,與血清ALB、TBIL水平呈顯著正相關(P0.05),與ALT、AST水平未見明顯相關性(P0.05)。轉染細胞24 h,Hepc mRNA相對水平為(5.21±0.43),空白對照細胞的(0.73±0.14)顯著升高(P0.05),在轉染48 h,細胞Hepc mRNA水平為(8.45±0.61),較空白對照的(1.16±0.17)顯著升高(P0.05);在質粒轉染48 h后,細胞Hepc蛋白相對表達量為(0.78±0.08),較空白對照的(0.41±0.02)顯著升高(P0.05)。與未處理組比較,pcDNA1.3轉染HepG2細胞鐵調素處理組在12h時即出現HBV DNA水平下降,在48h時HBV DNA水平顯著降低(P0.05),pSM2轉染Huh7細胞鐵調素處理組在24h即出現HBV DNA水平下降,在48h時HBV DNA水平顯著降低(P0.05)。與未處理組比較,pcDNA1.3轉染HepG2細胞鐵調素處理組在24h時即出現HBeAg表達下降,在48h時HBeAg表達顯著降低(P0.05),pSM2轉染Huh7細胞鐵調素處理組在24h時即出現HBeAg表達下降,在48h時HBeAg表達顯著降低(P0.05)。結論檢測鐵調素及其鐵代謝相關指標有助于評估慢性乙型肝炎病情進展,適當予以鐵調素或者其相應內源性激活劑針對性地治療鐵超載CHB患者,是否可應用于臨床,值得期待。并初步證明了鐵調素具有一定的抑制HBV復制的活性。
【圖文】：

安徽醫(yī)科大學碩士畢業(yè)論文P<0.05）、TBIL(圖 1E)水平呈顯著正相關性（r=0.467，P<0.05）�？梢� HBV 感染者血清鐵調素水平隨血清 ALB、TBIL 水平的升高而升高。3.3.4 乙型肝炎病毒感染者血清鐵調素水平與血清 ALT、AST 的相關性分析相關性分析結果顯示：HBV 感染者血清鐵調素與 ALT(圖 1F)（r=0.096，P=0.428）、AST(圖 1G)（r=0.044，P=0.716）水平未見明顯相關性（P>0.05）。

安徽醫(yī)科大學碩士畢業(yè)論文后，24h Hepcidin mRNA 相對表達量實驗組(5.21±0.43)較對照組(0.73±0高，，48h 實驗組(8.45±0.61)較對照組(1.16±0.17)顯著升高，差異有統(tǒng)計學<0.05）(圖 2)。轉染 pCDNA1.3 質粒與等量空載質粒（pBlue-ks）48h 后實cidin 蛋 白相 對 表 達量 實 驗 組 (0.78±0.08) 較 對照 組 (0.41±0.02) 顯 著<0.05），差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)(圖 3)。
【學位授予單位】：安徽醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R512.62

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本文編號：2709603