【摘要】：目的:流感作為一種易傳播易感染且經(jīng)常引起流行的感染性疾病,由于流感病毒本身的易變異性,使現(xiàn)有的疫苗常常對新流行株無效,且一些抗病毒藥物也出現(xiàn)耐藥傾向,探索新的有效的治療方式勢在必行。有研究顯示IGF1基因在流感感染過程中可能發(fā)揮重要作用,本研究中篩選并驗證了與IGF1具有靶向關(guān)系的micro RNA,并研究其在流感感染中的作用,為研究流感的病理機制、研制流感治療方式提供新思路。方法:1.利用micro RNA靶基因預(yù)測數(shù)據(jù)庫查找可能與IGF1基因具有靶向關(guān)系的micro RNA;2.利用雞胚擴增PR8流感病毒,構(gòu)建PR8流感病毒感染A549細(xì)胞的細(xì)胞模型;3.用熒光定量PCR的方法檢驗所選microRNA在PR8流感感染的A549細(xì)胞中表達(dá)量的變化;4.通過雙熒光素酶報告基因系統(tǒng)確認(rèn)所選的幾個在流感感染中表達(dá)量明顯下調(diào)的micro RNA與IGF1基因的靶向關(guān)系;5.觀察這些靶向作用于IGF1基因的micro RNA上調(diào)或下調(diào)時對流感感染的影響。結(jié)果:1.將各個數(shù)據(jù)庫的篩選結(jié)果重疊,選定miR-1-3p,miR-29a-3p,miR-29b-3p,miR-29c-3p,miR-206-3p,miR-129-5p,miR-19a-3p,miR-19b-3p,miR-199a-3p,miR-362-3p,miR-30d-5p為研究目標(biāo);2.在流感感染后的A549細(xì)胞中表達(dá)量下降的miRNA有:miR-1-3p,miR-29a-3p,miR-29b-3p,miR-29c-3p,miR-19a-3p,miR-19b-3p,miR-362-3p;3.與IGF1基因具有靶向關(guān)系的miRNA有:miR-19a-3p,miR-29a-3p和miR-29c-3p;4.在流感感染中靶向作用于IGF1基因的miRNA超表達(dá)時原本表達(dá)增多的炎性因子IL-8和流感病毒的M1基因的表達(dá)回降,miRNA抑制表達(dá)時其表達(dá)增多。結(jié)論:1.miR-19a-3p,miR-29a-3p和miR-29c-3p可能與IGF1基因具有靶向關(guān)系;2.靶向作用于IGF1基因的micro RNA可以在細(xì)胞水平調(diào)節(jié)流感病毒感染過程。
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R511.7

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2620011