【摘要】：抗生素廣泛使用導致的多重耐藥問題日益嚴重。耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)和耐碳青霉烯類鮑曼不動桿菌(carbapenem-resistant Acinetobacter baumannii,CRAB)是兩種代表性的多重耐藥菌。這兩種多重耐藥菌,臨床上的分離率較高,治療困難,會導致各種院內及社區(qū)感染,比如皮膚感染、肺部感染、菌血癥或敗血癥。為了解決這個困境,需要尋找新的治療方案。噬菌體是一種能夠感染并殺死細菌的病毒,具有專一性強的特點。具有替代抗生素治療感染的潛力。本課題從污水中分離得到兩株新報道的噬菌體,分別是金黃色葡萄球菌噬菌體SH-St 15644和鮑曼不動桿菌噬菌體SH-Ab 15599,并深入研究了這兩株噬菌體的生物學特性和基因組。電鏡結果顯示SH-St 15644為長尾噬菌體,SH-Ab 15599則為肌尾噬菌體。SH-St 15644能夠裂解37株MRSA臨床分離株中的12株(32%),SH-Ab 15599則能夠裂解51株CRAB臨床分離株中的15株(29.4%)。SH-St 15644和SH-Ab 15599對熱和酸堿的耐受性都比較好;SH-St 15644與宿主菌共培養(yǎng)4 min后,吸附率約80%;其潛伏期約12 min,裂解期約9 min,增殖量約13 PFU/infected cell。SH-Ab 15599與宿主菌共培養(yǎng)5 min后,吸附率約90%;其潛伏期約10min,裂解期約20 min,增殖量約43 PFU/infected cell。在體外殺菌實驗中,兩株噬菌體都有很好的殺菌效果�；蚪M分析結果顯示,SH-St 15644的基因組為雙鏈線性DNA,長45111 bp,GC含量為33.35%。SH-Ab15599的基因組也是雙鏈線性DNA,含143204個堿基對,GC含量為38.45%。兩個噬菌體的基因組都不含有已知的耐藥基因及毒力基因。之后,為了進一步研究噬菌體療法,建立了裸鼠皮膚膿腫模型并運用噬菌體SH-St 15644治療MRSA引起的皮膚感染。實驗結果顯示,噬菌體治療組裸鼠的皮膚膿腫面積、菌落計數(shù)都小于MRSA感染組。病理結果顯示,噬菌體治療組皮膚組織結構的破壞程度較MRSA感染組輕。實驗證明,噬菌體SH-St 15644能夠有效抑制MRSA引起的皮膚感染。綜上所述,本課題對新分離噬菌體SH-St 15644和SH-Ab 15599的生物學特性、基因組學以及通過皮膚膿腫模型,對SH-St 15644抗MRSA皮膚感染效果進行研究分析。證明了噬菌體療法的潛力,為以后這兩株噬菌體的臨床應用建立了基礎,提供了保障。
【圖文】：

噬菌體SH-St15644的噬菌斑Fig.2-1PlaquemorphologyofSH-St15644

19圖 2-2 噬菌體 SH-St 15644 的透射電鏡圖Fig.2-2 Transmission electron micrograph of SH-St 15644菌體 SH-St 15644 的宿主譜過點滴法，共檢測了 37 株臨床 MRSA 分離株，其中 12 株（32%）能夠被裂解（表 2-1）。表明了 SH-St 15644 在治療 MRSA 感染上的潛力，對臨床SA 分離株有較廣的裂解譜。
【學位授予單位】：上海交通大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R515

【參考文獻】

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1 青寧生;;我國第一位細菌學博士——余[J];微生物學報;2007年06期

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本文編號：2595110