發(fā)布時(shí)間：2020-02-03 20:50

【摘要】：目的評價(jià)和比較血清半乳甘露聚糖(GM)濃度測定和PCR結(jié)合反向斑點(diǎn)雜交實(shí)驗(yàn)在侵襲性肺曲霉病(IPA)早期診斷中的臨床價(jià)值。方法用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測血清中GM的濃度;PCR結(jié)合反向斑點(diǎn)雜交法檢測各組小鼠血清、肺泡灌洗液、肺組織中的曲霉菌DNA。結(jié)果 ELISA法測定GM濃度中,實(shí)驗(yàn)組血清、BALF的GM實(shí)驗(yàn)敏感性、特異性與對照組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);反向斑點(diǎn)雜交檢測血清、肺泡灌洗液、肺組織中曲霉菌DNA含量,實(shí)驗(yàn)組陽性率明顯高于對照組(P0.05)。用血清標(biāo)本的反向斑點(diǎn)雜交實(shí)驗(yàn)與GM實(shí)驗(yàn)、組織病理陽性率進(jìn)行比較,組織病理的陽性率最高,其次是反向斑點(diǎn)雜交。三種方法的差別均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論 GM-ELI-SA檢測是一項(xiàng)較靈敏、快速的診斷方法,反向斑點(diǎn)雜交實(shí)驗(yàn)在IPA早期診斷上的作用優(yōu)于GM實(shí)驗(yàn)。
【圖文】：

January2016，Vol.16，No.01究的界值。2.2GM測定結(jié)果實(shí)驗(yàn)組血清和BALF標(biāo)本各56份，在感染曲霉菌第1d陽性者為22例,第3d陽性者28份，第5d陽性者為28份，其中BALF的陽性率高于血清。陰性對照組血清與BALF的GM值均為陰性，實(shí)驗(yàn)組與對照組間陽性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。實(shí)驗(yàn)組感染后ld、3d、5d肺泡灌洗液GM均值呈升高趨勢。實(shí)驗(yàn)組相同感染天數(shù)大鼠肺泡灌洗液GM值明顯高于血清GM值（P<0.05）。2.3標(biāo)本反向斑點(diǎn)雜交結(jié)果煙曲霉菌標(biāo)本染色后顯色明顯，為陽性；黑曲霉、黃曲霉及土曲霉標(biāo)本染色后未顯色，為陰性,見圖1。陽性對照組Positivecontrolgroup煙曲霉菌Aspergillus黑曲霉Aspergillusniger黃曲霉Aflatoxin土曲霉Aspergillusterreus圖14種曲霉菌標(biāo)本反向斑點(diǎn)雜交結(jié)果Fig.1Resultsofreversedotblothybridizationin4kindsofAspergillusspecimens2.4不同標(biāo)本反向斑點(diǎn)雜交陽性率的比較將收集的血清、BALF、肺組織標(biāo)本提取DNA并擴(kuò)增后進(jìn)行反向斑點(diǎn)雜交實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)組陽性率明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。隨著感染時(shí)間的延長，標(biāo)本陽性率逐漸上升，肺組織的陽性率高于BALF高于血清，用血清標(biāo)本的反向斑點(diǎn)雜交實(shí)驗(yàn)與GM實(shí)驗(yàn)、組織病理陽性率進(jìn)行比較，組織病理的陽性率最高，其次是反向斑點(diǎn)雜交，三種方法的差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）,見表2，表3，表4。組別Group實(shí)驗(yàn)組Experimentalgroup第1d第3d第5d對照組Controlgroup總標(biāo)本數(shù)Total20191715反向斑點(diǎn)雜交PCR△12（60.86%）15（78.94%）16（94.12%）0GM實(shí)驗(yàn)GM-ELISA※8（20.00%）10（52.63%）12（70.59%）0組織病理Tissuepathology＃20（100%）19（100%）17（100%）1（6.7%）表2

January2016，Vol.16，No.01究的界值。2.2GM測定結(jié)果實(shí)驗(yàn)組血清和BALF標(biāo)本各56份，在感染曲霉菌第1d陽性者為22例,第3d陽性者28份，第5d陽性者為28份，其中BALF的陽性率高于血清。陰性對照組血清與BALF的GM值均為陰性，實(shí)驗(yàn)組與對照組間陽性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。實(shí)驗(yàn)組感染后ld、3d、5d肺泡灌洗液GM均值呈升高趨勢。實(shí)驗(yàn)組相同感染天數(shù)大鼠肺泡灌洗液GM值明顯高于血清GM值（P<0.05）。2.3標(biāo)本反向斑點(diǎn)雜交結(jié)果煙曲霉菌標(biāo)本染色后顯色明顯，為陽性；黑曲霉、黃曲霉及土曲霉標(biāo)本染色后未顯色，為陰性,見圖1。陽性對照組Positivecontrolgroup煙曲霉菌Aspergillus黑曲霉Aspergillusniger黃曲霉Aflatoxin土曲霉Aspergillusterreus圖14種曲霉菌標(biāo)本反向斑點(diǎn)雜交結(jié)果Fig.1Resultsofreversedotblothybridizationin4kindsofAspergillusspecimens2.4不同標(biāo)本反向斑點(diǎn)雜交陽性率的比較將收集的血清、BALF、肺組織標(biāo)本提取DNA并擴(kuò)增后進(jìn)行反向斑點(diǎn)雜交實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)組陽性率明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。隨著感染時(shí)間的延長，標(biāo)本陽性率逐漸上升，肺組織的陽性率高于BALF高于血清，用血清標(biāo)本的反向斑點(diǎn)雜交實(shí)驗(yàn)與GM實(shí)驗(yàn)、組織病理陽性率進(jìn)行比較，組織病理的陽性率最高，，其次是反向斑點(diǎn)雜交，三種方法的差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）,見表2，表3，表4。組別Group實(shí)驗(yàn)組Experimentalgroup第1d第3d第5d對照組Controlgroup總標(biāo)本數(shù)Total20191715反向斑點(diǎn)雜交PCR△12（60.86%）15（78.94%）16（94.12%）0GM實(shí)驗(yàn)GM-ELISA※8（20.00%）10（52.63%）12（70.59%）0組織病理Tissuepathology＃20（100%）19（100%）17（100%）1（6.7%）表2

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本文編號：2576119