【摘要】：目的：Toll樣受體(Toll-like receptors, TLRs)作為一類跨膜信號傳遞受體,在機(jī)體的天然免疫和獲得性免疫應(yīng)答中發(fā)揮重要作用,特別是在抗感染、抗腫瘤方面。TLRs與疾病的關(guān)聯(lián)主要取決于其豐富的基因多態(tài)性。本研究通過檢測Toll樣受體3(TLR3)基因rs1879026、rs3775290和Toll樣受體9(TLR9)基因rs187084、rs5743836、rs5743845共五個位點(diǎn)的基因多態(tài)性,探討廣西地區(qū)人群中TLR3和TLR9基因多態(tài)性與HBV相關(guān)性肝炎、肝硬化、肝癌遺傳易感性的關(guān)系。 方法：選取廣西地區(qū)的健康體檢者186例作為對照組,首次入院的HBV相關(guān)性肝臟疾病患者437例為病例組,其中包括慢性乙型肝炎患者(CHB組)172例,乙型肝炎肝硬化患者(LC組)91例,HBV相關(guān)性肝癌患者(HCC組)174例。采用聚合酶鏈反應(yīng)-限制性片段長度多態(tài)性(PCR-RFLP)技術(shù)分別檢測TLR3基因rs1879026、rs3775290和TLR9基因rs187084、rs5743836、rs5743845共五個位點(diǎn)的基因多態(tài)性,并利用DNA直接測序法進(jìn)行測序驗證,計算其基因型及等位基因頻率。應(yīng)用擬和優(yōu)度x2檢驗對各SNP位點(diǎn)進(jìn)行哈-溫平衡檢測,采用logistic回歸分析校正性別、年齡等混雜因素后計算OR和95%CI,從而對各SNP多態(tài)性和HBV相關(guān)性肝炎、肝硬化、肝癌遺傳易感性進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析。應(yīng)用SHEsis軟件分別對TLR3基因兩個SNP位點(diǎn)和TLR9基因三個SNP位點(diǎn)進(jìn)行單倍型分析。結(jié)果： 1.對照組與CHB組、LC組、HCC組在性別和年齡組成上的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P值均大于0.05),說明各組研究對象均具有可比性。各病例組和對照組中TLR3基因rs1879026、rs3775290和TLR9基因rs187084、 rs5743836、rs5743845位點(diǎn)的基因型分布頻率均符合哈-溫平衡定律(P值均大于0.05),說明研究人群具有群體代表性。 2. TLR3rs1879026位點(diǎn)有CC、AC、AA三種基因型。各病例組與對照組相比,以CC基因型作為參照,AC、AA基因型在CHB、LC和HCC中分布頻率的差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P值均大于0.05),以野生型C等位基因為參照,A等位基因在CHB、LC和HCC中分布頻率的差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P值均大于0.05),提示rs1879026基因多態(tài)性可能與CHB、LC和HCC的患病風(fēng)險無相關(guān)性。 3. TLR3rs3775290位點(diǎn)有GG、AG、AA三種基因型。各病例組與對照組相比,以GG基因型作為參照,經(jīng)統(tǒng)計分析發(fā)現(xiàn)AG基因型和LC的患病風(fēng)險有關(guān)(P=0.047),可能是肝硬化的一個保護(hù)因素；AA基因型和CHB、LC和HCC的患病風(fēng)險均有相關(guān)性(P=0.048,P=0.010,P=0.027),可能是乙肝病毒相關(guān)性肝臟疾病的保護(hù)因素；將顯性模型AG+AA與GG分析,我們可看到與對照組相比,AG+AA在LC組和HCC中的分布頻率差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.009,P=0.026)。以野生型G等位基因為參照,統(tǒng)計結(jié)果顯示A等位基因在CHB組、LC組和HCC組中分布頻率的差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.004,P=0.001,P=0.001)。 4.TLR9rs187084位點(diǎn)有TT、TC、CC三種基因型。各病例組與健康對照組相比,以TT基因型作為參照,顯示TC、CC基因型與CHB、LC、HCC的患病風(fēng)險均無相關(guān)性(P值均大于0.05)。以野生型T等位基因為參照,發(fā)現(xiàn)C等位基因在LC組和對照組中分布頻率的差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.045),而CHB組、HCC組與對照組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P值均大于0.05),提示C等位基因可能是肝硬化的一個保護(hù)因素。 5. TLR9rs5743836位點(diǎn)在所有研究對象中只發(fā)現(xiàn)有TT和TC兩種基因型。TC基因型和C等位基因在CHB組、LC組和HCC組中分布頻率的差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P值均大于0.05)；TLR9rs5743845位點(diǎn)只出現(xiàn)GG和AG兩種基因型,AG基因型和A等位基因在CHB組、LC組和HCC組中分布頻率的差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P值均大于0.05), rs5743836、rs5743845兩個位點(diǎn)的多態(tài)性可能與廣西地區(qū)人群HBV相關(guān)性肝炎、肝硬化、肝癌患者的患病風(fēng)險無關(guān)。 6.我們在性別分層分析中發(fā)現(xiàn)TLR3rs3775290位點(diǎn)在肝癌組中的男女基因型分布存在性別差異,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.001)。TLR3rs3775290位點(diǎn)的AA基因型和A等位基因與男性人群肝硬化和肝癌的患病風(fēng)險有關(guān)(P值均小于0.05),可能是男性肝硬化和肝癌的保護(hù)因素,而與女性人群的HBV相關(guān)性肝臟疾病的患病風(fēng)險無關(guān)�！疶LR3rs1879026和TLR9rs187084位點(diǎn)的多態(tài)性無論是在男性人群還是在女性人群均與廣西HBV相關(guān)性肝炎、肝硬化和肝癌無相關(guān)性(P值均大于0.05)。 7.TLR3基因rs1879026和rs3775290構(gòu)成的CA單倍型攜帶者患HBV相關(guān)性肝炎、肝硬化和肝癌的風(fēng)險降低(P=0.017,P=0.001,P=0.008),可能是HBV相關(guān)性肝臟疾病的保護(hù)因素。而CG單倍型患肝硬化的風(fēng)險增加至1.82倍(P=0.002),提示CG單倍型可能是肝硬化的易感因素。 8.TLR9基因rs187084、rs5743836和rs5743845三個位點(diǎn)構(gòu)建的CTG單倍型降低肝硬化的患病風(fēng)險(P=0.047,OR=0.74),提示CTG單倍型有可能是肝硬化的一個保護(hù)因素。而TTG單倍型與HBV相關(guān)性肝臟疾病的患病風(fēng)險無關(guān)(P值均大于0.05)。 結(jié)論： 1.TLR3基因rs1879026位點(diǎn)多態(tài)性可能與廣西地區(qū)人群HBV相關(guān)性肝炎、肝硬化、肝癌的患病風(fēng)險無關(guān)。而rs3775290位點(diǎn)AA基因型和A等位基因均與HBV相關(guān)性肝炎、肝硬化和肝癌的患病風(fēng)險有關(guān),可能是HBV相關(guān)性肝臟疾病的保護(hù)因素；AG基因型與肝硬化患病風(fēng)險有關(guān),也可能是肝硬化的一個保護(hù)因素。 2.TLR9基因rs187084位點(diǎn)C等位基因與肝硬化遺傳易感性相關(guān),可能是肝硬化的一個保護(hù)因素。而rs5743836、rs5743845兩個位點(diǎn)的多態(tài)性可能與廣西地區(qū)人群HBV相關(guān)性肝炎、肝硬化、肝癌的患病風(fēng)險無關(guān)。 3.性別分層分析中發(fā)現(xiàn)TLR3rs3775290位點(diǎn)在肝癌組中的男女基因型分布存在性別差異,且TLR3rs3775290位點(diǎn)的AA基因型和A等位基因與男性人群肝硬化和肝癌的患病風(fēng)險有關(guān),可能是男性肝硬化和肝癌的保護(hù)因素,而與女性人群的HBV相關(guān)性肝臟疾病的患病風(fēng)險無關(guān)。 4.TLR3基因rs1879026和rs3775290構(gòu)成的CA單倍型攜帶者患HBV相關(guān)性肝炎、肝硬化和肝癌的風(fēng)險降低,可能是HBV相關(guān)性肝臟疾病的保護(hù)因素。而CG單倍型患肝硬化的風(fēng)險增加,提示CG單倍型可能是肝硬化的易感因素。 5.TLR9基因rs187084、rs5743836、rs5743845三個位點(diǎn)構(gòu)建的CTG單倍型降低肝硬化的患病風(fēng)險,提示CTG單倍型可能是肝硬化的一個保護(hù)因素。
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R512.62

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2534371