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利用多重聚合酶鏈反應(yīng)和多色毛細(xì)管電泳分析布氏菌多位點(diǎn)可變數(shù)目串聯(lián)重復(fù)序列

發(fā)布時間:2019-06-20 02:10
【摘要】:目的傳統(tǒng)的布魯氏菌多點(diǎn)可變數(shù)目串聯(lián)重復(fù)序列分析方法涉及16個位點(diǎn)(MLVA-16),包括單重聚合酶鏈反應(yīng)和瓊脂糖凝膠電泳,一直以來都作為標(biāo)準(zhǔn)的基因分型方法,用于布病的病原監(jiān)測和流行病學(xué)調(diào)查。然而,目前這種傳統(tǒng)方法工作量較大,實驗室間結(jié)果不宜比較;尤其是對大規(guī)模菌株進(jìn)行基因分型或面臨突發(fā)疫情時,急需一種高通量且快速的方法。方法用多重PCR和多色毛細(xì)管電泳方法建立一種可靠的,高通量的且自動化程度較高的MLVA-16改良分型系統(tǒng),用82株菌進(jìn)行測試。結(jié)果這種改良的MLVA-16分型系統(tǒng)具有很高的準(zhǔn)確性,且具有快速和高通量的特點(diǎn)。結(jié)論改良的MLVA-16分型系統(tǒng)可用于基層布病實驗室,為布病的病原監(jiān)測提供高效的工具。
[Abstract]:Objective the traditional method of multiple variable number tandem repeat analysis of Brucella involves 16 loci (MLVA-16), including single polymerase chain reaction (PCR) and agarose gel electrophoresis (agarose gel electrophoresis). It has been used as a standard genotyping method for pathogen surveillance and epidemiological investigation of brucellosis. However, at present, the workload of this traditional method is large, so it is not suitable to compare the results between laboratories, especially in the case of genotyping of large-scale strains or in the face of sudden outbreaks, a high-throughput and rapid method is urgently needed. Methods A reliable, high throughput and automatic MLVA-16 improved typing system was established by multiplex PCR and multicolor capillary electrophoresis. 82 strains of bacteria were tested. Results the improved MLVA-16 typing system had high accuracy, fast and high throughput. Conclusion the improved MLVA-16 typing system can be used in the laboratory of brucellosis at the grass-roots level, and provides an efficient tool for the pathogen monitoring of brucellosis.
【作者單位】: 中國疾病預(yù)防控制中心傳染病預(yù)防控制所傳染病預(yù)防控制圍家重點(diǎn)實驗室感染性疾病協(xié)同診治協(xié)同創(chuàng)新中心;中國疾病預(yù)防控制中心;
【基金】:國家自然科學(xué)基金(No.81271900) 國家衛(wèi)生計生委公益性行業(yè)科研專項(No.201302006) 重大專項(No.2012ZX10004215)~~
【分類號】:R516.7

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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相關(guān)期刊論文 前10條

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相關(guān)會議論文 前3條

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本文編號:2502828

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