【摘要】：目的發(fā)現(xiàn)結(jié)核分枝桿菌Fts Z的特異性抑制劑,為開(kāi)發(fā)針對(duì)該靶點(diǎn)的新型抗結(jié)核化合物奠定基礎(chǔ)。方法克隆和表達(dá)結(jié)核分枝桿菌Fts Z蛋白并優(yōu)化其酶活測(cè)活方法,構(gòu)建Fts Z抑制劑的高通量篩選模型;對(duì)化合物庫(kù)中2萬(wàn)個(gè)化合物進(jìn)行篩選,將篩選得到的抑制劑212H進(jìn)行IC50以及分子水平活性測(cè)定;用菌液稀釋法評(píng)價(jià)212H對(duì)結(jié)核標(biāo)準(zhǔn)株、臨床分離株以及耐藥株的抗結(jié)核活性。結(jié)果得到了較純的結(jié)核分枝桿菌Fts Z蛋白,建立并優(yōu)化了Fts Z酶活測(cè)定體系以及其抑制劑的高通量篩選模型,篩選得到1個(gè)具有較高抑制率的抑制劑212H,該抑制劑具有顯著的體外抗結(jié)核活性。結(jié)論建立了穩(wěn)定的結(jié)核分枝桿菌Fts Z抑制劑的高通量篩選模型,應(yīng)用該模型篩選得到的抑制劑具有抗結(jié)核活性。
[Abstract]:Aim to identify specific inhibitors of Mycobacterium tuberculosis Fts Z, and to lay a foundation for the development of new antituberculosis compounds targeting the target. Methods the Fts Z protein of Mycobacterium tuberculosis was cloned and expressed, and the enzyme activity assay was optimized. The high throughput screening model of Fts Z inhibitor was constructed. A total of 20 000 compounds in the compound library were screened. The IC50 and molecular level activity of the selected inhibitor 212H were determined, and the antituberculous activity of 212H against tuberculosis standard strains, clinical isolates and drug-resistant strains was evaluated by bacterial dilution method. Results the purified Fts Z protein of Mycobacterium tuberculosis was obtained. The enzyme activity assay system of Fts Z and the high throughput screening model of its inhibitors were established and optimized, and a inhibitor with high inhibition rate of 212H was obtained. The inhibitor has significant anti-tuberculosis activity in vitro. Conclusion A high throughput screening model for stable Fts Z inhibitors of Mycobacterium tuberculosis was established, and the inhibitors obtained by this model had antituberculous activity. [WT5 "HZ] conclusion [WT5" BZ]
【作者單位】： 中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所天然藥物活性物質(zhì)與功能國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)藥生物技術(shù)研究所國(guó)家新藥(微生物)篩選實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(81302816,81321004)
【分類號(hào)】：R52

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前5條

1 譚初兵;時(shí)麗麗;王士偉;徐為人;鄒美香;湯立達(dá);;2012年美國(guó)FDA批準(zhǔn)新藥介紹和分析[J];現(xiàn)代藥物與臨床;2013年03期

2 鄒文進(jìn);劉祖國(guó);蔣愛(ài)華;李朝陽(yáng);;多西環(huán)素誘導(dǎo)單核細(xì)胞系THP-1凋亡的實(shí)驗(yàn)研究[J];中國(guó)病理生理雜志;2007年06期

3 崔玉彬;曹勝華;蔣曉磊;;抗結(jié)核藥物的研究新進(jìn)展[J];中國(guó)抗生素雜志;2010年05期

4 鄭梅琴;陸宇;王彬;付雷;;Alamar blue法檢測(cè)藥物細(xì)胞內(nèi)抗結(jié)核活性的研究[J];中國(guó)抗生素雜志;2011年06期

5 汪靜;張惠斌;周金培;李清;;抗結(jié)核新靶點(diǎn)及相關(guān)藥物的研究進(jìn)展[J];中國(guó)藥科大學(xué)學(xué)報(bào);2012年01期

【共引文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 李霞;俞波;華慶松;;具有新型作用機(jī)制的抗結(jié)核藥物[J];廣東化工;2013年09期

2 呼旭東;高海亮;;蒙脫石散聯(lián)合雙歧桿菌四聯(lián)活菌片治療小兒腹瀉的療效觀察和相關(guān)因子檢測(cè)[J];現(xiàn)代藥物與臨床;2014年06期

3 金路;;蒙脫石散聯(lián)合雙歧桿菌四聯(lián)活菌片治療小兒腹瀉療效探討[J];中外醫(yī)療;2014年34期

4 李賽;湯遜;;耐多藥脊柱結(jié)核研究進(jìn)展[J];實(shí)用骨科雜志;2012年09期

5 梁鎮(zhèn)興;張可;譚耀駒;譚守勇;張?zhí)煊?;利用自主發(fā)光結(jié)核分枝桿菌快速連續(xù)檢測(cè)抗結(jié)核藥物的細(xì)胞內(nèi)活性[J];實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志;2013年23期

6 殷春陽(yáng);冷東雷;何仲貴;;抗結(jié)核藥物的研究進(jìn)展[J];沈陽(yáng)藥科大學(xué)學(xué)報(bào);2015年01期

7 邵天舒;魏玉珍;李秋萍;趙莉莉;岑山;余利巖;;以蛋白激酶G為靶點(diǎn)的抗結(jié)核藥物篩選模型的建立和初步應(yīng)用[J];微生物學(xué)通報(bào);2010年02期

8 楊曉春;馬迅;;脊柱結(jié)核治療新進(jìn)展[J];中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)生;2012年06期

9 高振秋;王東方;任成山;;耐多藥結(jié)核病臨床研究的回顧與展望[J];中華肺部疾病雜志(電子版);2010年05期

10 王帥;汪靜;李清;張惠斌;周金培;;抗結(jié)核藥物研究進(jìn)展[J];中國(guó)新藥雜志;2012年19期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前1條

1 高艷清;β-蒎烯衍生物的合成及抑菌、抗腫瘤活性研究[D];中國(guó)林業(yè)科學(xué)研究院;2013年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前7條

1 李成俊;利福布丁不同給藥方法治療耐多藥結(jié)核病療效對(duì)比研究[D];吉林大學(xué);2011年

2 吳永英;帕格甾醇類似物的設(shè)計(jì)合成[D];重慶大學(xué);2011年

3 楊曉春;不同手術(shù)入路治療腰椎結(jié)核的療效及適應(yīng)癥探討[D];山西醫(yī)科大學(xué);2012年

4 付馨余;多西環(huán)素對(duì)堿燒傷大鼠角膜組織中NF-κB和Bcl-2、Bax表達(dá)的影響[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2013年

5 張瑾;住院兒童下呼吸道感染病原監(jiān)測(cè)及耐藥譜分析[D];河北醫(yī)科大學(xué);2014年

6 康宏;半乳呋喃糖基轉(zhuǎn)移酶2抑制劑的設(shè)計(jì)和合成[D];天津大學(xué);2013年

7 王力彬;PA-824的合成工藝改進(jìn)及與莫西沙星、吡嗪酰胺藥代動(dòng)力學(xué)相互作用研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2014年

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 譚初兵;湯立達(dá);徐為人;;2010年美國(guó)FDA批準(zhǔn)新藥簡(jiǎn)析[J];現(xiàn)代藥物與臨床;2011年02期

2 譚初兵;時(shí)麗麗;王士偉;徐為人;湯立達(dá);;2011年美國(guó)FDA批準(zhǔn)新藥簡(jiǎn)析[J];現(xiàn)代藥物與臨床;2012年02期

3 高凌玉;周建琴;孫承航;;抗結(jié)核候選新藥PA-824的研究進(jìn)展[J];國(guó)外醫(yī)藥(抗生素分冊(cè));2006年06期

4 王欣瑜;張靜霞;曹勝華;;利福霉素類衍生物的研究進(jìn)展[J];國(guó)外醫(yī)藥(抗生素分冊(cè));2008年06期

5 譚初兵;徐為人;鄒美香;湯立達(dá);;打造良好生態(tài)系統(tǒng),提高藥物創(chuàng)新效率[J];現(xiàn)代藥物與臨床;2012年06期

6 馬培奇;;抗結(jié)核病新藥研發(fā)進(jìn)展[J];上海醫(yī)藥;2008年11期

7 陳國(guó)良,譚國(guó)良,孫平華;抗結(jié)核藥物的研究與開(kāi)發(fā)[J];藥學(xué)進(jìn)展;2004年12期

8 唐神結(jié);;抗結(jié)核藥物研究最新進(jìn)展[J];中國(guó)防癆雜志;2006年S1期

9 朱友生;;抗結(jié)核藥物研究新進(jìn)展[J];中國(guó)防癆雜志;2007年04期

10 陸宇;王彬;鄭梅琴;趙偉杰;李們;;應(yīng)用Alamar Blue和MTT測(cè)定抗結(jié)核藥物最低抑菌濃度的研究[J];中國(guó)防癆雜志;2007年06期

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 王斯文;陳向東;汪輝;石功名;郭欣;張序磊;;β-內(nèi)酰胺酶抑制劑高通量篩選模型的建立[J];中國(guó)抗生素雜志;2013年02期

2 羅弟祥,何耀,高小平,張義正;蛋白酪氨酸磷酸酶1B抑制劑高通量篩選模型建立和應(yīng)用[J];天然產(chǎn)物研究與開(kāi)發(fā);2005年05期

3 朱深銀;周遠(yuǎn)大;劉慶山;杜冠華;;黃嘌呤氧化酶抑制劑高通量篩選模型的建立及應(yīng)用[J];中國(guó)藥學(xué)雜志;2007年03期

4 李林;李國(guó);陳莉莉;羅海斌;陳靜;沈旭;梅長(zhǎng)林;;表皮生長(zhǎng)因子受體酪氨酸激酶抑制劑高通量篩選模型的建立[J];第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2009年12期

5 孟鵬;齊西珍;鄭芳;任麗梅;白芳;白鋼;;α-葡萄糖苷酶抑制劑高通量篩選模型的建立及其應(yīng)用[J];微生物學(xué)報(bào);2010年08期

6 熊小椒;周爽;楊延輝;關(guān)艷;肖春玲;;以次黃嘌呤單核苷酸脫氫酶為靶點(diǎn)的新型抗結(jié)核藥物高通量篩選模型的建立及應(yīng)用[J];中國(guó)醫(yī)藥生物技術(shù);2011年06期

7 柳軍;牛蕤;張陸勇;;糖原磷酸化酶抑制劑高通量篩選模型的建立[J];中國(guó)新藥雜志;2007年06期

8 李健蕊;武燕彬;司書(shū)毅;陳鴻珊;蔣建東;彭宗根;;丙型肝炎病毒蛋白酶抑制劑高通量篩選模型的建立及應(yīng)用[J];中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報(bào);2011年01期

9 劉媛;董志;肖曉秋;唐紅;王樂(lè)樂(lè);程玉潔;;人二型大麻受體激動(dòng)劑高通量篩選模型的建立[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2012年02期

10 唐先兵,司書(shū)毅,張?jiān)虑?以大腸埃希氏菌肽脫甲酰基酶為靶點(diǎn)的高通量篩選模型的建立(英文)[J];中國(guó)抗生素雜志;2003年10期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 郭晶;王夙博;袁天翊;方蓮花;杜冠華;;蛋白酪氨酸激酶抑制劑高通量篩選模型的建立和應(yīng)用[A];第十三屆中國(guó)科協(xié)年會(huì)生物醫(yī)藥博士論壇論文集[C];2011年

2 王臻;高茜;李曉宇;岑山;;以甲型流感病毒基因組轉(zhuǎn)錄復(fù)制為靶點(diǎn)的抗流感藥物高通量篩選模型的建立[A];第十二屆全國(guó)抗生素學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2013年

3 柏冰;謝建平;晏菊芳;王洪海;胡昌華;;異檸檬酸裂解酶抑制劑的高通量篩選模型的建立及其應(yīng)用[A];2006第六屆中國(guó)藥學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2006年

4 孫立;袁勝濤;施偉;張陸勇;;組織因子高通量篩選模型的建立[A];2007醫(yī)學(xué)前沿論壇暨第十屆全國(guó)腫瘤藥理與化療學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2007年

5 鄭旭光;陳曉光;;P53蛋白高通量篩選模型的建立及應(yīng)用[A];第八屆全國(guó)生化藥理學(xué)術(shù)討論會(huì)暨第七屆Servier獎(jiǎng)?lì)C獎(jiǎng)大會(huì)會(huì)議摘要集[C];2003年

6 王守寶;宋俊科;孫加琳;杜冠華;;CYP450表氧化酶激活劑高通量篩選模型的建立[A];合理用藥及新藥評(píng)價(jià)專題研討會(huì)日程安排與論文摘要[C];2010年

7 彭健豪;杜冠華;;ADAMTS1抑制劑高通量篩選模型的建立和應(yīng)用[A];藥學(xué)發(fā)展前沿論壇及藥理學(xué)博士論壇論文集[C];2008年

8 賈曉健;王麗;洪斌;;以人HDL受體SR-BI mRNA穩(wěn)定性為靶點(diǎn)的新型心血管藥物高通量篩選模型的建立和應(yīng)用[A];第四屆全國(guó)微生物資源學(xué)術(shù)暨國(guó)家微生物資源平臺(tái)運(yùn)行服務(wù)研討會(huì)論文集[C];2012年

9 殷瑜;李素秋;戈梅;陳代杰;錢(qián)秀萍;;反義RNA介導(dǎo)的MurA抑制劑高通量篩選模型的構(gòu)建及驗(yàn)證[A];第十二屆全國(guó)抗生素學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2013年

10 張洋;李元;;具胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)功能的表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)酪氨酸激酶的克隆表達(dá)及其抑制劑高通量篩選模型的構(gòu)建研究[A];創(chuàng)新藥物及新品種研究、開(kāi)發(fā)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2006年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前1條

1 吳凱;我新藥和高通量篩選技術(shù)成功應(yīng)用[N];經(jīng)濟(jì)日?qǐng)?bào);2003年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前1條

1 鄭旭煦;Neuromedin U2受體激動(dòng)劑高通量篩選模型與天然產(chǎn)物活性成分研究[D];重慶大學(xué);2003年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前6條

1 龐濤;人源—磷酸腺苷激活蛋白激酶（HsAMPK）調(diào)節(jié)劑分子水平高通量篩選模型的建立[D];華東師范大學(xué);2004年

2 毛偉峰;人源糖原合成酶激酶-3β（Human Glycogen Synthase Kinase-3β）的性質(zhì)研究及其抑制劑的高通量篩選模型建立[D];華東師范大學(xué);2004年

3 郎廷元;MDR逆轉(zhuǎn)劑高通量篩選模型的建立和應(yīng)用[D];西南大學(xué);2007年

4 趙遠(yuǎn)勝;人源DPPIV抑制劑高通量篩選模型的建立和新型抑制劑的發(fā)現(xiàn)[D];中國(guó)科學(xué)院研究生院（上海生命科學(xué)研究院）;2005年

5 朱京童;5-脂氧化酶抑制劑高通量篩選模型的建立及應(yīng)用[D];天津大學(xué);2010年

6 步洪強(qiáng);結(jié)核分枝桿菌DXS和DXR抑制劑高通量篩選模型的建立與應(yīng)用[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2014年

，

本文編號(hào)：2448665