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CD147在尖銳濕疣組織中的表達(dá)及其介導(dǎo)的發(fā)病機(jī)制

發(fā)布時(shí)間:2019-01-24 22:03
【摘要】:目的探討CD147在尖銳濕疣組織中的表達(dá)及其在尖銳濕疣發(fā)病機(jī)制中的作用。方法收集30例尖銳濕疣(condyloma acuminata,CA)皮損組織作為CA組,另取30例男性包皮組織作為對(duì)照組,采用免疫組化染色檢測(cè)組織CD147、PCNA、CD31表達(dá),以CD31染色情況計(jì)算微血管密度(microvascular density,MVD),分析CA皮損組織CD147表達(dá)和PCNA、MVD的相關(guān)性。采用小干擾RNA(siRNA)技術(shù)抑制角質(zhì)形成細(xì)胞HaCaT細(xì)胞中CD147的表達(dá),按照處理方式分為空白對(duì)照組、CD147-siRNA組和CD147-NC組,MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖能力,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡率和周期分布,Real-time PCR檢測(cè)CD147、VEGF、PCNA mRNA表達(dá),Western blot檢測(cè)VEGF、增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)蛋白表達(dá)。結(jié)果 CA組皮損組織CD147表達(dá)陽性率為83.3%,PCNA表達(dá)陽性率為70.0%,對(duì)照組包皮組織分別為36.7%和40.0%,CA組CD147、PCNA表達(dá)陽性率明顯高于對(duì)照組(均P0.05);CA組MVD值為(35.81±6.54)條/mm2,對(duì)照組為(12.74±4.75)條/mm2,CA組MVD值明顯高于對(duì)照組(P0.01);相關(guān)性分析顯示:CA組皮損組織CD147與PCNA表達(dá)呈正相關(guān)關(guān)系(r=0.753,P0.05),CD147表達(dá)與MVD值亦呈正相關(guān)關(guān)系(r=0.872,P0.05)。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中,與CD147-NC組比較,CD147-siRNA組處理48、72、96h后HaCaT細(xì)胞的增殖能力明顯降低(均P0.05);CD147-siRNA組細(xì)胞凋亡率明顯高于CD147-NC組(P0.01),CD147-siRNA組G2/M期所占比例明顯低于CD147-NC組,S期所占比例明顯高于CD147-NC組(均P0.01);CD147-siRNA組PCNA、VEGF的mRNA和蛋白表達(dá)明顯低于CD147-NC組(均P0.01)。結(jié)論 CA皮損組織中CD147呈多數(shù)陽性表達(dá),且CD147的表達(dá)與PCNA表達(dá)及MVD均呈正相關(guān);下調(diào)CD147表達(dá)可以抑制角質(zhì)形成細(xì)胞HaCaT的增殖,其作用機(jī)制可能與降低細(xì)胞周期蛋白和調(diào)控血管新生有關(guān)。
[Abstract]:Objective to investigate the expression of CD147 in condyloma acuminatum and its role in the pathogenesis of condyloma acuminatum. Methods 30 cases of condyloma acuminatum (condyloma acuminata,CA) lesions were collected as CA group and 30 cases of male prepuce tissues as control group. Immunohistochemical staining was used to detect the expression of CD147,PCNA,CD31. Microvessel density (microvascular density,MVD) was calculated by CD31 staining and the correlation between CD147 expression and PCNA,MVD in CA lesions was analyzed. Small interfering RNA (siRNA) technique was used to inhibit the expression of CD147 in HaCaT cells of keratinocytes. The cells were divided into three groups: blank control group, CD147-siRNA group and CD147-NC group. The proliferative ability of the cells was measured by MTT assay. Apoptosis rate and cell cycle distribution were detected by flow cytometry, CD147,VEGF,PCNA mRNA expression by Real-time PCR and (PCNA) protein expression by VEGF, proliferating cell nuclear antigen (VEGF,) by, Western blot. Results the positive rate of CD147 expression in lesions of CA group was 83.3%. The positive rate of CD147,PCNA expression in prepuce tissue of control group was 36.7% and 40.0%, respectively. The positive rate of CD147,PCNA expression in CA group was significantly higher than that in control group (P0.05). The MVD value of CA group (35.81 鹵6.54) / mm2, control group (12.74 鹵4.75) / mm2,CA group was significantly higher than that of control group (P0.01). Correlation analysis showed that there was a positive correlation between CD147 and PCNA expression in CA group (P 0.05), and a positive correlation between CD147 expression and MVD value (P 0.05). In cell experiment, compared with CD147-NC group, the proliferation ability of HaCaT cells in CD147-siRNA group decreased significantly (P0.05) after treatment for 48 ~ 72h for 96 h. The rate of apoptosis in CD147-siRNA group was significantly higher than that in CD147-NC group (P0.01). The percentage of G _ 2 / M phase in CD147-siRNA group was significantly lower than that in CD147-NC group, and the proportion of S phase was significantly higher than that in CD147-NC group (P0.01). The expression of mRNA and protein in PCNA,VEGF in CD147-siRNA group was significantly lower than that in CD147-NC group (P 0.01). Conclusion the expression of CD147 was mostly positive in the lesions of CA, and the expression of CD147 was positively correlated with the expression of PCNA and MVD. Down-regulation of CD147 expression can inhibit the proliferation of HaCaT in keratinocytes, and its mechanism may be related to the reduction of cyclin and the regulation of angiogenesis.
【作者單位】: 廣東省人民醫(yī)院廣東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院皮膚科;
【基金】:廣東省醫(yī)學(xué)科學(xué)技術(shù)研究基金資助項(xiàng)目(No.A2015148)
【分類號(hào)】:R752.53

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本文編號(hào):2414905

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