【摘要】：目的： 血吸蟲病是由血吸蟲感染引起的人獸共患病,是一種分布廣泛、嚴(yán)重危害人類健康的寄生蟲病。本研究以天然抗血吸蟲病的東方田鼠為動物模型進(jìn)行研究。對感染血吸蟲后第6、10、15、20、30天東方田鼠肝和肺組織進(jìn)行病理學(xué)觀察,并對東方田鼠肝臟轉(zhuǎn)錄組基因進(jìn)行測序,結(jié)合文獻(xiàn)從中篩選出與東方田鼠天然抗日本血吸蟲感染相關(guān)免疫分子基因和生長發(fā)育相關(guān)分子基因,并對這些基因在東方田鼠感染血吸蟲前及感染后不同時間點(diǎn)表達(dá)水平進(jìn)行檢測,意圖進(jìn)一步闡明東方田鼠對日本血吸蟲的天然抗性機(jī)理。 方法： 取10周齡東方田鼠30只,隨機(jī)分為6組,每組5只。第一組為空白對照組,[第2-6組分別感染日本血吸蟲尾蚴,感染劑量為2000條／只。分別取空白對照組東方田鼠和感染血吸蟲后第6、10、15、20、30天東方田鼠肺、肝、脾組織樣品,HE染色后做病理學(xué)觀察。 取四只10周齡正常東方田鼠,取新鮮肝臟組織,提取總RNA用SMART對東方田鼠肝臟cDNA進(jìn)行測序,并統(tǒng)計其生物學(xué)水平,細(xì)胞學(xué)水平,分子學(xué)水平基因分布。 通過測序結(jié)果結(jié)合文獻(xiàn),篩選出與東方田鼠天然抗日本血吸蟲病相關(guān)基因,溶菌酶基因(Lyz)、MHCⅡ類分子基因(RT1-Db1)、CD74基因(Cd74)、補(bǔ)體1q基因(Clqa)、甲狀腺素受體a基因(Thra)、胰島素樣生長因子1基因(Igfl),并對這6個基因在東方田鼠感染血吸蟲前及感染后第6、10、15、20、30天表達(dá)水平變化進(jìn)行檢測。 結(jié)果： 東方田鼠感染血吸蟲后第6-10天肉眼可見肺組織出現(xiàn)大量出血點(diǎn),肺體輕度增大,第15天開始出血點(diǎn)消失；第10-20天肝組織表面出現(xiàn)散在白點(diǎn),肝體輕度增大,顏色呈暗紅色,第30天恢復(fù)正常。光鏡切片觀察顯示第6-10天肺組織出現(xiàn)嚴(yán)重病理損傷,局部有出血點(diǎn),毛細(xì)血管擴(kuò)張、管壁增厚,支氣管和血管周圍及管腔內(nèi)有大量炎性細(xì)胞,其中以嗜酸性粒細(xì)胞為主,第20天后開始恢復(fù)；第6-20天肝細(xì)胞空泡變性,肝竇高度擴(kuò)張,肝間質(zhì)、血管周圍及蟲體周圍均有大量嗜酸性粒細(xì)胞及少量中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等炎性細(xì)胞浸潤,局部出現(xiàn)灶性肝細(xì)胞壞死,第30天后恢復(fù)。 東方田鼠肝臟cDNA測序結(jié)果揭示了東方田鼠cDNA序列,并對這些序列進(jìn)行生物學(xué)水平,細(xì)胞學(xué)水平,分子學(xué)水平功能分類,并從中確定了與東方田鼠天然抗日本血吸蟲相關(guān)基因Lyz、RT1-Db1、Cd74、Clqa、Thra、Igf1基因序列。 東方田鼠肺內(nèi)感染血吸蟲后,Lyz、RT1-Db1、Cd74基因在肺內(nèi)第6-10天顯著上調(diào)(P0.01),第15天起逐漸恢復(fù)至正常表達(dá)水平；Lyz、RT1-Db1、Cd74基因在肝內(nèi)第10-15天表達(dá)顯著上調(diào)(P0.01),第20天起逐漸恢復(fù)至正常表達(dá)水平。Clqa基因在肺內(nèi)第6-10天表達(dá)顯著上調(diào)(P0.01),第15天起逐漸恢復(fù)至正常表達(dá)水平,肝內(nèi)表達(dá)無變化。Thra基因在肺內(nèi)第10-15天表達(dá)顯著下調(diào)(P0.01),第20天起逐漸恢復(fù)至正常水平；肝內(nèi)表達(dá)水平無變化；Igf1基因在肺內(nèi)表達(dá)水平無變化；肝內(nèi)第10-15天表達(dá)顯著下調(diào)(P0.01),第20天起逐漸恢復(fù)至正常水平。
[Abstract]:Purpose: Schistosomiasis is a common disease of the human animal caused by the infection of the schistosome, which is a parasite that is widely distributed and is seriously harmful to human health The study is based on the study of the animal model of the animal model with the natural anti-schistosomiasis. The liver and lung tissues of Microtus fortis were observed in the 6th, 10th, 15th, 20th and 30th day after the infection of Schistosoma japonicum, and the liver transcriptome gene of the Microtus fortis was sequenced. The expression of these genes at different time points before and after the infection of Schistosoma japonicum was detected with the intention of further elucidating the natural resistance of the Microtus fortis to the Schistosoma japonicum. Daniel. Methods: 30-week-old Microtus voles were randomly divided into 6 groups. 5 rats in each group. The first group was the blank control group.[Group 2-6] was infected with the tail of Schistosoma japonicum, and the infection dose was 20. (6), 10, 15, 20 and 30 days after infection with the control group, the lung, the liver, the spleen tissue samples and the HE staining of the oriental voles in the blank control group, respectively. Pathological observation. Four 10-week-old Microtus fortis were taken, fresh liver tissue was taken, and the total RNA was extracted with SMART to sequence the cDNA of the liver of the Microtus fortis, and the biological level, the level of the cytology, the molecule, The gene, lysozyme gene (Lyz), MHC class 鈪，

本文編號：2404981