發(fā)布時間：2018-04-24 22:36

  本文選題：脊柱結核 + 白介素家族　； 參考：《廣西醫(yī)科大學》2016年博士論文

【摘要】：1背景與目的結核病仍然是世界公共衛(wèi)生問題的難題。根據(jù)世界衛(wèi)生組織報告,世界總人口的三分之一曾經(jīng)或者現(xiàn)在感染過結核桿菌。在發(fā)展中國家脊柱結核是最常見的骨結核之一。在最近數(shù)十年有很多關于脊柱結核的研究發(fā)表,脊柱結核累及椎體和椎間盤,導致脊柱的穩(wěn)定性尚失,臨近椎體和軟組織損傷被破壞。雖然脊柱結核在臨床上比較常見,但是目前關于脊柱結核所涉及的免疫和炎癥反應的機制仍然不清,尤其是椎間盤的破壞過程中細胞和細胞因子在其中的作用。有很多已經(jīng)表明,白細胞介素家族在結核所導致的炎癥和免疫中扮演非常重要的作用,但是否白細胞介素在脊柱結核椎間盤破壞的過程中扮演同樣的作用需要進一步的研究。白細胞介素家族有大量的免疫調節(jié)蛋白組成,能夠參與細胞和組織中的免疫應答,同時也具有促炎和抗炎的作用。少數(shù)成員能夠作為化學引誘物協(xié)同趨化因子幫助T細胞向病灶部位遷移,還有部分成員能夠參與細胞對病毒的免疫反應,作用類似于IFNs、TNF和MMPs在脊柱結核中是重要的炎性標志物,因此白細胞介素家族具有成為潛在的治療靶點的可能。目前關于白細胞介素在脊柱結核椎間盤破壞的病理過程中的作用較少,尤其是在人類的標本組織中更少�；谝陨锨闆r,我們選擇了白細胞介素家族中具有代表性的白細胞介素包括IL-9,IL-10,IL-12,IL-13,IL-16,IL-17,IL-18,IL-26和IL-27。白細胞分類是基于白細胞自身結構、受體類型和功能分類的。在我們的研究中包括IL-1家族(IL-18),共γ鏈家族(IL-9),IL-10家族(IL-10、26),IL-12家族(IL-12,IL-27),具有趨化活性細胞因子家族(IL-16)和IL-17家族。因此研究上述白介素將有助加深我們對脊柱結核椎間盤破壞機制的研究。2方法2.1脊柱結核組:2013年1月至2014年12月在廣西醫(yī)科大學第一附屬脊柱骨病外科確診為脊柱結核,有行病灶清除,神經(jīng)減壓,植骨融合的手術適應癥并且進行該手術的患者,共計70例。椎間盤突出組:2013年1月至2014年12月在廣西醫(yī)科大學第一附屬脊柱骨病外科確診椎間盤突出癥,有行椎間盤切除手術適應癥并且已經(jīng)行該手術的患者,共計70例。正常組(control group):2013年1月至2014年12月在廣西醫(yī)科大學第一附屬脊柱骨病外科確診脊柱骨折,有行椎間盤切除手術適應癥并且已經(jīng)行該手術的患者,共計10例。實驗樣本獲得以后,由兩名經(jīng)驗豐富的病理學家對組織標本進行檢查,確保樣本的準確性。所有樣品由外科手術獲得后,立即放入液氮中冷凍并保存直至進行組織RNA提取。2.2采用組織RNA提取技術、逆轉錄技術和實時熒光定量PCR(Real time fluorescent quantitative PCR,RT-PCR)技術,研究分析IL-9,IL-10,IL-12,IL-13,IL-16,IL-17,IL-18,IL-26和IL-27的m RNA轉錄水平在結核性椎間盤組織、退行性椎間盤組織和正常椎間盤組織內的表達情況以及差異性。通過Spearman秩相關分析ILs表達的配對相關性。2.3采用臨床問卷調查與實驗室檢查相結合的方式進行相關資料的采集。結合ILs基因表達數(shù)據(jù),分析研究各項基因表達指標與脊柱結核臨床資料之間的相關性3結果3.1研究數(shù)據(jù)表明在脊柱結核組IL-10,IL-16,IL-17,IL-18和IL-27的m RNA表達顯著高于對照組(P0.05)。脊柱結核組中IL-10,IL-16,IL-18和IL-27m RNA表達顯著高于椎間盤突出組(P0.05)。脊柱結核組中患者的炎癥反應指標越高IL-16,IL-17和IL-18的m RNA表達越高,IL-10和IL-27越低(P0.05)。3.2實驗結果表明在脊柱結核和椎間盤突出組中多種白介素mRNA的表達具有相關性,在脊柱結核組中IL-18的m RNA表達水平與IL-16和IL-17正相關,IL-10和IL-27的m RNA表達水平與IL-16,IL-17和IL-18m RNA表達水平負相關,IL-16的m RNA表達水平與IL-17的m RNA表達水平具有正相關,IL-10的m RNA表達水平與IL-27的m RNA表達水平具有正相關。3.3實驗結果表明性別、病灶部位與ILs的表達沒有統(tǒng)計學差異,在脊柱結核組和椎間盤突出組中IL-18的m RNA的表達水平與年齡具有正相關(P=0.023、P=0.007)。吸煙習慣與IL-17的m RNA的表達水平具有正相關、與IL-10的m RNA的表達水平具有負相關(P=0.008,P=0.041)。VAS評分能夠影響IL-10,IL-16,IL-17,IL-18和IL-27的m RNA的表達水平(P=0.009,P=0.007,P=0.034,P=0.016,P=0.008)。VAS評分在8-10時,L-16,IL-17和IL-18的m RNA表達水平比VAS評分在0-4時高。病情的持續(xù)時間能夠影響IL-10,IL-16,IL-17,IL-18和IL-27的m RNA表達水平(P=0.014,P=0.033,P=0.037,P=0.006和P=0.009),病程在3 12月時IL-16,IL-17和IL-18的表達較病程3月時高,IL-10和IL-27的m RNA表達水平較病程3月時低。CRP和ESR能夠影響IL-10,IL-16,IL-17和IL-27的m RNA表達(CRP:P=0.018,P=0.007,P=0.024,P=0.009;ESR:P=0.037,P=0.041,P=0.003,P=0.008)。CRP30 mg/L時,IL-16和IL-17的m RNA表達較高,CRP10mg/L時,IL-10和IL-27的m RNA表達較高。ESRs40 mm/h時,IL-16和IL-17 m RNA表達較高,ESRs20 mm/h時,IL-10和IL-27的m RNA表達較高。4結論1.在本實驗中證實在脊柱結核椎間盤組織中IL-10、IL-16、IL-17、IL-18和IL-27的m RNA有表達,在脊柱結核的病理過程中IL-16、IL-17和IL-18可能參與了脊柱結核的免疫激活并且介導了脊柱結核椎間盤的細胞外基質的破壞。在本實驗中證實在椎間盤突出癥患者病灶部位椎間盤組織中IL-17、IL-27的m RNA有表達,推測IL-17、IL-27可能通過調控炎癥反應介導椎間盤的退變。2.在本實驗中證實在脊柱結核椎間盤組織中IL-10、IL-16、IL-17、IL-18和IL-27的m RNA的表達水平相互之間具有相關性,推測在脊柱結核的炎癥免疫反應過程是多種細胞因子協(xié)同調節(jié)的結果。3.在本實驗中證實在脊柱結核椎間盤組織中IL-18的m RNA表達水平與年齡的大小具有相關性,推測IL-18可能參與椎間盤的破壞和退變。4.在本實驗中證實在脊柱結核椎間盤組織中IL-10和IL-17的m RNA表達水平與脊柱結核患者的吸煙習慣和吸煙的量有相關關系,推測IL-10和IL-17可能參與尼古丁等物質對椎間盤的破壞。5.在本實驗中證實在脊柱結核椎間盤組織中IL-16、IL-17和IL-18的m RNA表達水平與VAS評分具有正相關。脊柱結核椎間盤組織中IL-10和IL-27的m RNA表達水平與VAS評分具有負相關。推測白介素可能通過調控炎癥免疫反應加重疼痛。6.在本實驗中證實在脊柱結核椎間盤組織中IL-16、IL-17和IL-18的m RNA表達水平與病程長短具有正相關。脊柱結核椎間盤組織中IL-10和IL-27的m RNA表達水平與病程長短具有負相關。推測白介素可能通過調控炎癥免疫反應影響患者的愈后。7.在本實驗中證實在脊柱結核椎間盤組織中IL-16和IL-17的m RNA表達水平與CRP、ESR具有正相關。脊柱結核椎間盤組織中IL-10和IL-27的m RNA表達水平與CRP、ESR具有負相關。推測多種白介素在脊柱結核的炎癥反應中發(fā)揮作用,并且炎癥反應的不同階段不同白介素的作用不同。
[Abstract]:......
【學位授予單位】：廣西醫(yī)科大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R529.2

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本文編號：1798575