本文選題：蛋白芯片 + 慢性乙型肝炎��； 參考：《第三軍醫(yī)大學》2014年碩士論文

【摘要】：目的：研究慢性HBV感染者不同臨床表型細胞因子譜的特征及血清CCL20水平在HBV相關(guān)肝纖維化、肝硬化及肝細胞癌中的診斷價值。 方法：90例慢性HBV感染者，根據(jù)HBsAg濃度、HBV DNA、HBV血清標志物及ALT水平將其分為持續(xù)ALT正常和慢性乙型肝炎兩部分。持續(xù)ALT正常者包括免疫耐受、非活性HBsAg攜帶、HBsAg清除等三種表型，健康獻血員做對照；慢性乙型肝炎根據(jù)HBeAg狀態(tài)分為HBeAg陽性和HBeAg陰性兩種表型。通過定制的蛋白質(zhì)芯片檢測血清IFN-γ、IL-1β、IL-2、IL-4、IL-6、IL-7、IL-9、IL-10、IL-12p40、IL-12p70、 IL-15、 IL-17A、 IL-17C、 IL-21、 IL-22、 IL-23p19、 IL-28A、 IL-29、CCL5、CCL16、CCL20、CCL22、CXCL9、CXCL10、CXCL11、CD30、 GITR、IL-6R、 gp130和TGF-β1等30個細胞因子的表達水平，蛋白質(zhì)相互作用分析工具STRING分析細胞因子間的相互作用。在此基礎(chǔ)上，篩選出CCL20進行深入分析。共納入85例慢性HBV感染者及45例HBV相關(guān)肝細胞癌患者，ELISA檢測血清CCL20水平，PASW18.0統(tǒng)計學分析血清CCL20水平與其余反映肝臟病變程度的檢測指標（血清肝纖維化指標、Fibroscan測定的肝臟硬度值、肝活檢病理纖維化分期及腫瘤大�。┑南嚓P(guān)性，并對其在慢性HBV感染病情程度診斷的價值進行評估。 結(jié)果： 1.與健康對照相比，持續(xù)ALT正常的慢性HBV感染者JAK-STAT信號通路相關(guān)因子表達普遍上調(diào)，包括γ鏈細胞因子（IL-2、IL-4、IL-7、IL-9、IL-15及IL-21）、IL-12家族成員（IL-12p40、IL-12p70及IL-23p19）和λ干擾素（IL-28A和IL-29）；非活動性HBsAg攜帶組IL-2、IL-4、IL-15、IL-21、IL-12p70、IL-23p19及IL-29表達升高是其區(qū)別于其他兩種表型的重要特征。 2.無論HBeAg陽性或陰性慢性乙型肝炎患者，，CXCL9、CXCL10、CXCL11、CCL20、IL-10、IL-4、IL-17C、IL-1β、IL-12p70、IL-17A與ALT均存在顯著正相關(guān)性，CXC亞族的三個因子CXCL9、CXCL10、CXCL11的相關(guān)程度最高。gp130、IFN-γ、IL-23p19、IL-12p40、IL-22、IL-29、IL-6、IL-9、GITR與ALT的顯著正相關(guān)僅見于HBeAg陽性慢性乙型肝炎中； IL-7、IL-21及TGF-β1與ALT的顯著相關(guān)性僅見于HBeAg陰性慢性乙型肝炎。ALT＞5×ULN者與非活動性HBsAg攜帶組間的細胞因子表達差異數(shù)量分別為11個和17個，其中的11個因子在兩種表型CHB組中一致，另外6個僅在HBeAg陰性慢性乙型肝炎組中呈現(xiàn)低表達的因子分別為IL-29、IL-6、IL-9、IL-6R、IFN-γ、TGF-β1。 3.血清CCL20水平在HBeAg陽性慢性乙型肝炎患者中與肝纖維化指標（HA、PCⅢ、 CⅣ、 LN）的相關(guān)性分析結(jié)果分別為0.444（P=0.008）、0.396（P=0.019）、0.424（P=0.011）和0.415（P=0.013），而在HBeAg陰性慢性乙型肝炎患者中相關(guān)性分析結(jié)果分別為0.731（P=9.930×10-6）、0.634（P=2.932×10-4）、0.361（P=0.218）和0.284（P=0.134）；其與肝臟硬度值的相關(guān)系數(shù)為0.507（P=7.282×10-7）。 4.血清CCL20診斷診斷肝纖維化的ROC曲線下面積為0.848，P=7.055×10-5，最佳臨界值77.4pg/mL,敏感度70%，特異度96%；診斷不良預后肝癌的ROC曲線下面積0.718，P=0.03，最佳臨界值66.9pg/mL。 結(jié)論： 1.JAK-STAT通路多種細胞因子表達上調(diào)是慢性HBV感染的重要免疫特征；IL-2、IL-15、IL-21、IL-12p70、IL-23p19及IL-29表達升高有利于HBV免疫清除； 2.CXCL9、CXCL10、CXCL11及CCL20適合作為衡量慢性HBV感染炎癥程度的免疫評估指標；IL-29、IL-6、IL-9、IL-6R、IFN-γ、TGF-β1上調(diào)缺陷可能與HBeAg陰性慢性乙型肝炎的免疫發(fā)病機制有關(guān)； 3.CCL20在慢性乙型肝炎中具有促炎和致纖維化雙重特征，其血清水平適合作為HBV相關(guān)肝纖維化、肝硬化和肝細胞癌的診斷和預后評估的免疫指標。
[Abstract]:Objective: To study the characteristics of cytokine profiles in different clinical phenotypes of chronic HBV infection and the diagnostic value of serum CCL20 level in HBV related liver fibrosis, cirrhosis and hepatocellular carcinoma.
Methods: 90 patients with chronic HBV infection, according to the concentration of HBsAg, HBV DNA, HBV serum markers and ALT levels will be divided into two parts for ALT in normal and chronic hepatitis B. Persistent normal ALT including immune tolerance, non active HBsAg carry, HBsAg clearance and other three kinds of phenotype, health volunteer blood donors as control; according to the HBeAg state of chronic hepatitis B were divided into HBeAg positive and two HBeAg negative phenotype. Through custom protein chip detection of serum IFN- gamma, IL-1 beta, IL-2, IL-4, IL-6, IL-7, IL-9, IL-10, IL-12p40, IL-12p70, IL-15, IL-17A, IL-17C, IL-21, IL-22, IL-23p19, IL-28A, IL-29, CCL5. CCL16, CCL20, CCL22, CXCL9, CXCL10, CXCL11, CD30, GITR, IL-6R, gp130 and TGF- beta 1 expression levels of 30 cytokines, protein interaction analysis of interaction between cytokines of the tool STRING. On this basis, CCL20 was selected for further analysis. A total of Na In 85 cases of patients with chronic HBV infection and 45 cases of HBV related hepatocellular carcinoma, serum CCL20 level of ELISA, PASW18.0 statistical analysis of serum CCL20 level and other indexes reflect the degree of liver disease (serum fibrosis index, Fibroscan determination of liver stiffness values, liver biopsy and pathological fibrosis staging and tumor size) correlation. And the severity of chronic HBV infection diagnosis value was evaluated.
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本文編號：1733453