本文選題：乙肝病毒　切入點：BST-　出處：《第三軍醫(yī)大學學報》2015年17期

【摘要】：目的研究骨髓基質細胞抗原2(bone marrow stromal antigen 2,BST-2)對乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)復制與釋放的影響。方法以不同濃度干擾素處理人肝癌細胞株Hep G2.2.15,Western blot和熒光定量PCR檢測BST-2蛋白水平和RNA水平;分別用構建的BST-2真核表達質粒p CDNA3.1-BST2-FLAG和BST-2拮抗蛋白HIV Vpu真核表達質粒,轉染Hep G2.2.15細胞,酶聯免疫吸附實驗(ELISA)檢測細胞培養(yǎng)液乙肝病毒表面抗原(HBs Ag)和乙肝病毒e抗原(HBe Ag),熒光定量PCR檢測HBV mRNA,Southern blot檢測HBV DNA。結果轉染p CDNA3.1-BST2-FLAG后,HBV mRNA降低26%,細胞內HBV DNA降低31%,細胞培養(yǎng)液中HBV DNA降低33%(P0.05),細胞培養(yǎng)液中HBs Ag下降至82%,HBe Ag下降至77%(P0.05);加入Vpu蛋白后,BST-2的抑制作用受到對抗,HBV mRNA恢復至92%,細胞內HBV DNA恢復至93%,細胞培養(yǎng)液中HBV DNA升至98%,細胞培養(yǎng)液中HBs Ag恢復至102%,HBe Ag恢復至99%,HBV復制與釋放明顯增強。結論 BST-2對HBV復制與釋放具有抑制作用,該抑制作用可被HIV Vpu蛋白拮抗。
[Abstract]:Objective to study the effect of bone marrow stromal cell antigen 2(bone marrow stromal antigen 2 (BST-2) on the replication and release of hepatitis B virus (HBV). Methods Human hepatoma cell line Hep G2.2.15 was treated with different concentrations of interferon. The level of BST-2 protein and RNA were detected by fluorescence quantitative PCR and Western blot. The constructed BST-2 eukaryotic expression plasmids p CDNA3.1-BST2-FLAG and BST-2 antagonist HIV Vpu were transfected into Hep G2.2.15 cells. Enzyme linked immunosorbent assay (Elisa) was used to detect HBV surface antigen (HBs) and HBV e antigen (HBe AgN) in cell culture medium. Fluorescence quantitative PCR was used to detect HBV mRNAs and Southern blot to detect HBV DNA.Results after transfection with p CDNA3.1-BST2-FLAG, mRNA decreased by 26% and HBV DNA decreased by 31%. In cell culture medium, HBV DNA decreased to 33% P0.05, HBs Ag in cell culture medium decreased to 82%, HBe Ag decreased to 77% P0.05, the inhibitory effect of Vpu protein on BST-2 was restored to 92%, HBV DNA recovered to 93%, HBV DNA in cell culture medium increased to 98%. In cell culture medium, HBs Ag returned to 102 and HBe Ag recovered to 99% HBe Ag. Conclusion BST-2 has inhibitory effect on HBV replication and release. The inhibitory effect was antagonized by HIV Vpu protein.
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學附屬第二醫(yī)院檢驗科;重慶醫(yī)科大學附屬第二醫(yī)院感染科;
【基金】：國家自然科學基金面上項目(30972582) 重慶市衛(wèi)生和計劃生育委員會基金(2012-2-060)~~
【分類號】：R512.62

【參考文獻】

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1 ;Development of Novel Therapeutics for Chronic Hepatitis B[J];Virologica Sinica;2010年04期

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3 王書訓;;乙肝病毒X基因編碼氨基酸的變異分析[J];氨基酸和生物資源;2014年03期

4 李繼昌;;替諾福韋治療重型乙肝臨床療效分析[J];海南醫(yī)學院學報;2012年10期

5 隋洪帥;韓婧婉;楊紹敏;賈磊;劉永健;李敬云;李林;;我國云南部分HIV-1感染者黏合素蛋白基因單核苷酸多態(tài)性研究[J];軍事醫(yī)學;2013年07期

6 周云;連建奇;賈戰(zhàn)生;;持續(xù)性HBV或HCV感染與免疫穩(wěn)態(tài)[J];臨床肝膽病雜志;2014年09期

7 尹鑫;魏萍;王曉鈞;;天然免疫限制因子Tetherin的抗病毒機理研究進展[J];生物化學與生物物理進展;2014年01期

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9 Joel da Cunha;Luciana Morganti Ferreira Maselli;Ana Carolina Bassi Stern;Celso Spada;Sérgio Paulo Bydlowski;;Impact of antiretroviral therapy on lipid metabolism of human immunodeficiency virus-infected patients: Old and new drugs[J];World Journal of Virology;2015年02期

10 馮波;鄧文斌;肖文勇;唐波;趙耀宗;吳坤強;;PCR擴增HBV x基因特征序列檢測乙肝病毒DNA[J];湘潭大學自然科學學報;2011年01期

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7 張智，駱抗先，梁熾森;乙肝病毒復制是慢性肝病活動的直接原因[J];第一軍醫(yī)大學學報;1994年01期

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9 ;α－干擾素可防止乙肝病毒復制[J];河南醫(yī)學研究;1994年02期

10 郝曉,崔東來,姚希賢,張曉嵐,靳洪濤,本文對乙型肝炎患者(簡稱乙肝)有、無乙肝病毒復制者的細胞免疫功能狀態(tài)進行了檢測 ,以HBeAg、HBVDNA-PCR均陽性為復制指標 ,HBaAg、HBeAg、HBVDNA-PCR均陰性為非復制指標.52例患者 ,復制及非復制組各26例.結果為:乙肝病毒(HBV)復制組CD_4~+/CD_a~+為1.36±0.34 ,非復制組2.99±0.61 ,P<0.05 ,NK細胞活性測定復制組為40.01±12.48 ,非復制組68.80±9.82 ,P<0.01 ,LAK細胞活性測定 ,復制組為44.20±11.51 ,非復制組為67.90±9.82 ,P<0.01.結果表明:有病毒復制者的細胞免疫功能明顯低下.說明細胞免疫功能狀況對HBV復制具有明顯影響 ,此為乙肝具有病毒復制者 ,治療上使用免疫促進劑提供了依據.;乙肝病毒復制與非復制狀態(tài)細胞免疫功能的研究[J];臨床薈萃;1998年10期

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本文編號：1660821