本文選題：乙肝病毒　切入點：BST-　出處：《第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報》2015年17期

【摘要】：目的研究骨髓基質(zhì)細(xì)胞抗原2(bone marrow stromal antigen 2,BST-2)對乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)復(fù)制與釋放的影響。方法以不同濃度干擾素處理人肝癌細(xì)胞株Hep G2.2.15,Western blot和熒光定量PCR檢測BST-2蛋白水平和RNA水平;分別用構(gòu)建的BST-2真核表達(dá)質(zhì)粒p CDNA3.1-BST2-FLAG和BST-2拮抗蛋白HIV Vpu真核表達(dá)質(zhì)粒,轉(zhuǎn)染Hep G2.2.15細(xì)胞,酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)檢測細(xì)胞培養(yǎng)液乙肝病毒表面抗原(HBs Ag)和乙肝病毒e抗原(HBe Ag),熒光定量PCR檢測HBV mRNA,Southern blot檢測HBV DNA。結(jié)果轉(zhuǎn)染p CDNA3.1-BST2-FLAG后,HBV mRNA降低26%,細(xì)胞內(nèi)HBV DNA降低31%,細(xì)胞培養(yǎng)液中HBV DNA降低33%(P0.05),細(xì)胞培養(yǎng)液中HBs Ag下降至82%,HBe Ag下降至77%(P0.05);加入Vpu蛋白后,BST-2的抑制作用受到對抗,HBV mRNA恢復(fù)至92%,細(xì)胞內(nèi)HBV DNA恢復(fù)至93%,細(xì)胞培養(yǎng)液中HBV DNA升至98%,細(xì)胞培養(yǎng)液中HBs Ag恢復(fù)至102%,HBe Ag恢復(fù)至99%,HBV復(fù)制與釋放明顯增強(qiáng)。結(jié)論 BST-2對HBV復(fù)制與釋放具有抑制作用,該抑制作用可被HIV Vpu蛋白拮抗。
[Abstract]:Objective to study the effect of bone marrow stromal cell antigen 2(bone marrow stromal antigen 2 (BST-2) on the replication and release of hepatitis B virus (HBV). Methods Human hepatoma cell line Hep G2.2.15 was treated with different concentrations of interferon. The level of BST-2 protein and RNA were detected by fluorescence quantitative PCR and Western blot. The constructed BST-2 eukaryotic expression plasmids p CDNA3.1-BST2-FLAG and BST-2 antagonist HIV Vpu were transfected into Hep G2.2.15 cells. Enzyme linked immunosorbent assay (Elisa) was used to detect HBV surface antigen (HBs) and HBV e antigen (HBe AgN) in cell culture medium. Fluorescence quantitative PCR was used to detect HBV mRNAs and Southern blot to detect HBV DNA.Results after transfection with p CDNA3.1-BST2-FLAG, mRNA decreased by 26% and HBV DNA decreased by 31%. In cell culture medium, HBV DNA decreased to 33% P0.05, HBs Ag in cell culture medium decreased to 82%, HBe Ag decreased to 77% P0.05, the inhibitory effect of Vpu protein on BST-2 was restored to 92%, HBV DNA recovered to 93%, HBV DNA in cell culture medium increased to 98%. In cell culture medium, HBs Ag returned to 102 and HBe Ag recovered to 99% HBe Ag. Conclusion BST-2 has inhibitory effect on HBV replication and release. The inhibitory effect was antagonized by HIV Vpu protein.
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院檢驗科;重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院感染科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金面上項目(30972582) 重慶市衛(wèi)生和計劃生育委員會基金(2012-2-060)~~
【分類號】：R512.62

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：1660821