發(fā)熱伴血小板減少綜合征布尼亞病毒非結(jié)構(gòu)蛋白NSs原核表達(dá)載體的構(gòu)建與表達(dá)
本文選題:發(fā)熱伴血小板減少綜合征布尼亞病毒 切入點:NSs 出處:《現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)》2015年10期 論文類型:期刊論文
【摘要】:目的利用大腸桿菌原核表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)發(fā)熱伴血小板減少綜合征布尼亞病毒(SFTSV)NSs重組蛋白。方法采用RT-PCR技術(shù),從SFTSV毒株提取的病毒總RNA中,擴(kuò)增NSs全長基因,將其克隆至p ET22b(+)中構(gòu)建原核表達(dá)載體p ET22b-NSs,經(jīng)酶切及測序鑒定后轉(zhuǎn)化表達(dá)菌BL21(DE3),IPTG誘導(dǎo),通過Western Blot鑒定NSs蛋白的表達(dá)。結(jié)果酶切、測序證明重組原核表達(dá)載體p ET22b-NSs構(gòu)建成功,免疫印跡法可見NSs基因編碼蛋白表達(dá)。結(jié)論實現(xiàn)了發(fā)熱伴血小板減少綜合征布尼亞病毒重組NSs蛋白的原核高效表達(dá),為進(jìn)一步深入研究發(fā)熱伴血小板減少綜合征布尼亞病毒NSs蛋白的結(jié)構(gòu)與功能奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:Objective to express the recombinant protein of SFT SVS NSs of Bunia virus with fever and thrombocytopenia syndrome by E. coli prokaryotic expression system. Methods the full-length NSs gene was amplified from the total RNA of the virus extracted from the SFTSV strain by RT-PCR technique. The prokaryotic expression vector pET22b-NSswas cloned into pET22b (). The expression of NSs protein was induced by restriction endonuclease digestion and sequencing, and the expression of NSs protein was identified by Western Blot. Results the recombinant prokaryotic expression vector p ET22b-NSs was successfully constructed by restriction endonuclease digestion and sequencing. Conclusion the prokaryotic expression of recombinant NSs protein of fever associated with thrombocytopenia syndrome virus can be achieved by Western blotting. The results laid a foundation for further study on the structure and function of NSs protein of Bunia virus with fever and thrombocytopenia syndrome.
【作者單位】: 江蘇省疾病預(yù)防控制中心;
【分類號】:R510
【參考文獻(xiàn)】
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【共引文獻(xiàn)】
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【二級參考文獻(xiàn)】
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【相似文獻(xiàn)】
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本文編號:1641047
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