發(fā)布時間：2018-03-20 14:38

  本文選題：白細(xì)胞介素38　切入點：天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶　出處：《吉林大學(xué)》2016年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：背景:乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)是一個小DNA病毒,屬于嗜肝DNA病毒科。HBV感染是一個全球性的健康威脅。全球約1/3人曾感染HBV,3.4-4億人HBV表面抗原(HBs Ag)呈陽性。HBV是慢性肝炎、肝硬化及原發(fā)性肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的首要病因。每年HBV相關(guān)終末期肝病及HCC能造成超過50-100萬人死亡。慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)治療的首要目標(biāo)是通過有效抑制HBV DNA來減少肝硬化及HCC的發(fā)生幾率。目前,批準(zhǔn)治療CHB的藥物有兩種,為干擾素和核苷(酸)類似物�，F(xiàn)在,大家認(rèn)同宿主適應(yīng)性免疫反應(yīng),尤其是細(xì)胞免疫反應(yīng),對HBV感染的最終結(jié)果起到至關(guān)重要的作用。許多細(xì)胞因子也參與了對HBV感染的免疫應(yīng)答。HCC是世界上第五大常見的癌癥,是全球癌癥相關(guān)死亡的第三大原因。HCC缺乏能夠早期診斷的敏感且特異的生物標(biāo)志物,極大地阻礙了治療效果。至今為止,只有少許血清標(biāo)志物可以用來檢測HCC,其中最為常見的標(biāo)志物為甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)。但是AFP的敏感性和特異性達(dá)不到一個優(yōu)秀的腫瘤標(biāo)志物的要求。因此我們迫切的需要一個新的標(biāo)志物來提高早期HCC的檢測。所以,我們要繼續(xù)探尋治療CHB的新方法以阻止其進(jìn)展;并且尋找一個更好的血清標(biāo)志物實現(xiàn)對HBV相關(guān)性HCC的早期診斷。白細(xì)胞介素38(IL-38)是2001年被發(fā)現(xiàn)的IL-1家族的新成員。因為IL-38與IL-1Ra擁有41%序列同源性,與IL-36Ra具有43%的序列同源性,推測IL-38可能具有抑制炎癥反應(yīng)的作用。這一推測獲得了研究支持,實驗表明重組的IL-38能與IL-36受體相連并且在炎癥狀態(tài)下抑制外周血單個核細(xì)胞分泌IL-17、IL-22和IL-8,由此推測IL-38可能具有IL-36受體阻滯劑功能。另有研究表明抑制人外周血單個核細(xì)胞表達(dá)IL-38后,狼瘡相關(guān)性促炎因子的表達(dá)顯著增加�；蛳嚓P(guān)研究表明IL-38與銀屑病性關(guān)節(jié)炎、強(qiáng)直性脊柱炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等炎癥性疾病有關(guān)。IL-38在CHB中的表達(dá)及其功能尚未有報道。β2糖蛋白Ⅰ(Beta 2-Glycoprotein I,β2GPI),又名為載脂蛋白(apolipoprotein H,APOH),在1961年被發(fā)現(xiàn),主要在肝臟合成。它在抗磷脂抗體綜合征的陰離子抗原自身抗體識別過程中起輔助作用,并與凝血調(diào)節(jié)和復(fù)發(fā)性流產(chǎn)有關(guān)。在各種代謝綜合征及疾病狀態(tài)下的個體β2GPI的表達(dá)具有很大的差異性,提示β2GPI可能具有重要的臨床價值。研究發(fā)現(xiàn),β2GPI可以與重組的HBs Ag相連接,推測β2GPI可能促進(jìn)HBV進(jìn)入肝細(xì)胞。并且,β2GPI與HBs Ag的結(jié)合活性在HBV復(fù)制活躍的病人的血清中增高。我們團(tuán)隊的前期研究也證實了β2GPI與HBs Ag的特異性結(jié)合。此外,我們首次證實SMMC-7721 HCC細(xì)胞膜上存在能與β2GPI特異性結(jié)合的蛋白,這個蛋白經(jīng)鑒定為annexin II。我們后來發(fā)現(xiàn)高表達(dá)的β2GPI能促進(jìn)HBs Ag與細(xì)胞表面結(jié)合,從而促進(jìn)病毒顆粒與鈉離子�；悄懰峁厕D(zhuǎn)運多肽(sodium-taurocholate co-transporting polypeptide,NTCP)受體的接觸,并且β2GPI與膜連蛋白ⅠI(annexin II)的結(jié)合作用能促進(jìn)病毒和細(xì)胞膜融合的發(fā)生。我們還發(fā)現(xiàn)NF-κB通路可以在β2GPI和HBs Ag的共同作用下被激活,從而促進(jìn)了HBV相關(guān)性HCC的發(fā)生。然而,β2GPI能否作為HBV相關(guān)性HCC的腫瘤標(biāo)志物以及它在急性乙型肝炎(acute hepatitis B,AHB)和CHB患者中的表達(dá)及意義尚不清楚。目標(biāo):研究IL-38在CHB患者抗病毒治療過程中的表達(dá)情況及臨床意義;β2GPI在HBV相關(guān)性HCC、CHB、AHB患者中的表達(dá)情況、臨床意義及作為HBV相關(guān)性HCC標(biāo)志物的價值研究。方法:乙肝病毒e抗原(HBe Ag)陽性的CHB患者經(jīng)系統(tǒng)口服替比夫定(Ld T,600mg/天)治療52周,并每隔12周進(jìn)行一次體格檢查及實驗室檢查。酶聯(lián)免疫吸附試驗(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)檢測46例CHB患者在替比夫定治療過程中血清IL-38的動態(tài)表達(dá)水平和43例健康對照組的血清IL-38的表達(dá)水平。ELISA檢測43例HBV相關(guān)性HCC、54例CHB、10例AHB患者及12例健康人的血漿β2GPI的表達(dá)水平。微量樣本多指標(biāo)流式蛋白定量技術(shù)(cytometric bead array,CBA)檢測血清或血漿中T細(xì)胞因子的表達(dá)水平。羅氏公司全自動生化分析儀檢測ALT、AST的水平;化學(xué)發(fā)光分析儀檢測HBs Ag、HBs Ab、HBe Ag和HBe Ab的表達(dá)水平;熒光定量PCR檢測HBV DNA載量的變化。結(jié)果:(1)治療前CHB患者血清IL-38的表達(dá)水平顯著高于健康對照組的血清IL-38表達(dá)水平;(2)Ld T抗病毒治療12周時,CHB患者的血清IL-38表達(dá)水平顯著下降,達(dá)到健康人的水平,并且在此之后保持穩(wěn)定;(3)治療前CHB患者的血清IL-38的表達(dá)水平和血清AST表達(dá)水平具有正相關(guān)性;(4)治療前血清IL-38高表達(dá)的患者與血清IL-38低表達(dá)的患者相比,在Ld T抗病毒治療中有更高的幾率獲得病毒學(xué)應(yīng)答;(5)血清IL-38的表達(dá)與抗病毒治療原發(fā)性不應(yīng)答有關(guān);(6)抗病毒治療過程中,CHB患者血清IL-38的表達(dá)水平與血清IL-6、IL-12的表達(dá)水平具有正相關(guān)性;(7)HBV相關(guān)性HCC及CHB患者的血漿β2GPI表達(dá)水平顯著高于健康人的血漿表達(dá)水平,但AHB患者的血漿β2GPI表達(dá)水平與健康人相當(dāng);(8)β2GPI聯(lián)合AFP能增加AFP對HBV相關(guān)性HCC的診斷價值;(9)CHB患者血漿β2GPI的表達(dá)與HBe Ag的表達(dá)有關(guān);(10)AHB患者血漿β2GPI的表達(dá)水平與血漿IFN-γ的表達(dá)水平呈正相關(guān)。結(jié)論:(1)IL-38和β2GPI的表達(dá)水平對乙型肝炎病毒相關(guān)性肝臟疾病在治療和診斷上具有提示意義;(2)治療前血清IL-38高表達(dá)的CHB患者更容易在Ld T的治療過程中獲得有效的病毒學(xué)應(yīng)答;未經(jīng)治療的CHB患者血清中升高的IL-38表達(dá)水平反應(yīng)了肝臟損傷的程度,同時也是宿主自身強(qiáng)力清除HBV感染的間接提示;(3)β2GPI在HBV相關(guān)性HCC患者的血漿中表達(dá)水平顯著增高,提示了β2GPI具有作為HBV相關(guān)性HCC臨床腫瘤標(biāo)志物的潛在價值。
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【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R512.62;R575

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 Yue-Ping Liu;Chun-Yan Yao;;Rapid and quantitative detection of hepatitis B virus[J];World Journal of Gastroenterology;2015年42期

2 袁仙麗;李明才;李燕;高雪明;高巧艷;;人白細(xì)胞介素-38的特性分析及B細(xì)胞表位的預(yù)測[J];生物技術(shù);2014年01期

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本文編號：1639534