本文選題：核酸檢測(cè)　切入點(diǎn)：獻(xiàn)血者篩查　出處：《中國輸血雜志》2015年11期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的評(píng)估不同原理核酸檢測(cè)(NAT)血液篩查系統(tǒng)在降低輸血傳播HBV殘余風(fēng)險(xiǎn)中的作用。方法對(duì)6 889人(次)無償獻(xiàn)血者血液標(biāo)本做常規(guī)血清學(xué)檢測(cè),應(yīng)用轉(zhuǎn)錄介導(dǎo)的擴(kuò)增(TMA)技術(shù)(Ultrio試劑)對(duì)所有血樣平行單樣本定性檢測(cè)HBV/HCV/HIV,對(duì)血清學(xué)無反應(yīng)性標(biāo)本5 165例采用PCR-熒光探針法(MPX試劑)以6人份混樣模式做NAT。追蹤2個(gè)NAT平臺(tái)得到的反應(yīng)性標(biāo)本,羅氏CAP/CTM核酸定量檢測(cè)系統(tǒng)做核酸鑒別試驗(yàn),羅氏電化學(xué)發(fā)光做乙肝血清學(xué)5項(xiàng)檢測(cè),QPCR法測(cè)定HBV病毒載量,巢氏-PCR方法做HBV DNA基因分型,統(tǒng)計(jì)分析各項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)之間關(guān)聯(lián)及差異。結(jié)果 TMA初篩檢出HBV DNA單獨(dú)反應(yīng)性標(biāo)本12例[反應(yīng)率0.17%(12/6 889),鑒別試驗(yàn)陽性7例(占TMA初篩陽性數(shù)的58.3%)],PCR-熒光探針法拆分后檢出HBV DNA單獨(dú)反應(yīng)性9例[0.17%(9/5 165)],2種NAT平臺(tái)檢測(cè)HBV DNA均為陽性4例,合計(jì)檢出17例反應(yīng)性標(biāo)本。該2種原理的NAT檢測(cè)系統(tǒng)對(duì)HBV DNA檢測(cè)結(jié)果的一致性差(TMA vs QPCR,K0),檢出率明顯不同(TMA vs QPCR,P0.05)。陽性標(biāo)本乙肝血清學(xué)5項(xiàng)檢測(cè):HBs Ag、HBe Ag均為陰性(0/16),抗-HBc陽性12例(12/16),抗-HBs陽性6例(6/16),抗-HBe陽性3例(3/16)。HBV DNA定量陽性4例,含量均5 IU/m L。獻(xiàn)血者追蹤結(jié)果:TMA檢出HBV DNA單獨(dú)反應(yīng)性3例(3/10),鑒別試驗(yàn)HBV DNA陽性3例,MPX檢出HBV DNA單獨(dú)陽性5例(5/10),2種NAT平臺(tái)檢測(cè)均為陽性者3例,合計(jì)檢出5例;10例追蹤標(biāo)本的HBs Ag、HBe Ag仍均為陰性,抗-HBc陽性8例(新轉(zhuǎn)陽3例),抗-HBs陽性5例(新轉(zhuǎn)陽1例),抗-HBe陽性2例(新轉(zhuǎn)陽1例),HBV DNA定量陽性4例(新檢出1例),含量均5 IU/m L。巢氏-PCR S區(qū)序列陽性標(biāo)本做HBV基因分型:B型占66.7%(6/9),C型占33.3%(3/9)。結(jié)論 TMA與PCR-熒光定量法均能有效降低輸血?dú)堄囡L(fēng)險(xiǎn),但針對(duì)檢出限附近低病毒載量標(biāo)本均有部分漏檢,血站在條件具備時(shí)可使用更高靈敏度的新試劑。
[Abstract]:Objective to evaluate the role of different principles of nucleic acid test (Nat) blood screening system in reducing the residual risk of transfusion transmitted HBV. Using transcription-mediated amplification technique (Ultrio reagent) to qualitatively detect HBV / HCV / HIV / HIV in parallel single sample of all blood samples and 5 165 cases of serological nonreactive specimens by PCR- fluorescence probe method (MPX). Reactive specimens obtained from the NAT platform, The CAP/CTM nucleic acid quantitative detection system was used to identify the nucleic acid, the serological detection of hepatitis B was performed by Roche electrochemiluminescence assay, and the carrying capacity of HBV virus was determined by QPCR. The genotyping of HBV DNA was performed by nested PCR method. Results 12 cases of HBV DNA single reactive specimen were detected by TMA. [the reaction rate was 0.17% and 12 / 6 889%, 7 cases (58.3%) were positive in differential test] PCR-fluorescence probe method was used to separate the sample. There were 9 cases of HBV DNA reactivity alone [0.17% / 5 165] and 4 cases were positive for HBV DNA detected by two kinds of NAT platforms. A total of 17 reactive specimens were detected. The results of the two principle NAT detection systems were not consistent with those of HBV DNA. The detection rate was significantly different from that of TMA vs QPCRX P0.05.The positive samples were positive for HBV serological tests, and all of them were 0 / 16% negative and anti-HBs Ag-HBeAg were negative. 12 cases were positive for -HBc, 6 cases were positive for anti-HBs, and 3 cases were positive for anti-HBe, 3 cases were positive for anti-HBe, 4 cases were positive for HBV DNA. The results of blood donor tracing showed that HBV DNA was only reactive in 3 cases (3 / 10), and HBV DNA was positive in 3 cases (P < 0 05). HBV DNA was positive in 5 cases (5 / 10) and HBV DNA in 3 cases (P < 0 05). In total, 5 cases (10 cases) were found to be still negative for HBs Ag-HBe Ag, and 10 cases were found to be still negative for HBe Ag. 8 cases were positive for anti-HBc (3 cases were newly converted to positive, 5 cases were positive for anti-HBs), 2 cases were positive for anti-HBe (1 case was newly converted to positive), 4 cases were positive for DNA (1 case was newly detected, all of them were positive in 5 IU/m / L). The proportion of HBV genotypes B to B was 66.7%. Conclusion the residual risk of blood transfusion can be effectively reduced by TMA and PCR- fluorescence quantitative method. However, some of the specimens with low viral load near the detection limit are missing, so the new reagent with higher sensitivity can be used in the blood station when the conditions are available.
【作者單位】： 深圳市血液中心;
【基金】：深圳市科技創(chuàng)新委員會(huì)項(xiàng)目(JCYJ20140403093211510) 深圳市科衛(wèi)生計(jì)生系統(tǒng)科研項(xiàng)目(201401074)
【分類號(hào)】：R512.62

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本文編號(hào)：1571290