本文選題：乙型肝炎表面抗原　切入點(diǎn)：乙型肝炎表面抗體　出處：《第四軍醫(yī)大學(xué)》2017年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：背景乙型病毒性肝炎是影響人類健康的重要傳染病之一,疾病的早期診斷和抗病毒治療可有效地阻斷HBV傳播和降低HBV相關(guān)的疾病負(fù)擔(dān)。HBV血清學(xué)標(biāo)志物是HBV診斷和病情評估的重要依據(jù)和指標(biāo)。在日常HBV血清學(xué)檢驗(yàn)中,常會出現(xiàn)一些不典型血清學(xué)模式,難以合理解釋。目前研究認(rèn)為這些不典型的血清學(xué)表現(xiàn)可能與病毒或宿主免疫方面的改變相關(guān)。HBsAg與抗-HBs共存現(xiàn)象是一類較常見的不典型血清學(xué)模式,目前研究認(rèn)為其發(fā)生可能與HBV S基因突變株相關(guān),但其機(jī)制仍未充分闡明。由于既往研究樣本量和研究對象異質(zhì)性的限制,對該現(xiàn)象的流行病學(xué)特征和臨床特征的認(rèn)識仍存在爭議,對HBsAg與抗-HBs共存感染者中抗-HBs水平和親和力的研究也不足,因此HBsAg與抗-HBs共存現(xiàn)象的臨床意義尚未充分闡明。另外,對HBsAg與抗-HBs共存現(xiàn)象機(jī)制的研究均來自病例對照研究,盡管有少部分研究報(bào)道該現(xiàn)象可以持續(xù)存在,但缺乏對該現(xiàn)象自然轉(zhuǎn)歸的研究,即該現(xiàn)象的產(chǎn)生、血清學(xué)指標(biāo)和病毒基因特征的變化趨勢、相關(guān)的預(yù)后轉(zhuǎn)歸均未見報(bào)道。目的通過系統(tǒng)綜述和Meta分析的方法了解和分析HBsAg與抗-HBs共存現(xiàn)象的流行病學(xué)特征和臨床特征,同時(shí)測定共存感染者血清抗-HBs的親和力常數(shù),以明確其臨床意義。結(jié)合HBsAg陽性感染者隊(duì)列和HBsAg與抗-HBs共存感染者隊(duì)列的隨訪,探明HBs Ag與抗-HBs共存現(xiàn)象的自然轉(zhuǎn)歸和相關(guān)的影響因素�；谏疃葴y序技術(shù),結(jié)合HBsAg與抗-HBs共存現(xiàn)象的自然轉(zhuǎn)歸,分析其病毒準(zhǔn)種的變化過程,進(jìn)一步闡述病毒因素在HBsAg與抗-HBs共存現(xiàn)象發(fā)生過程中的作用。方法:1.檢索Pubmed、Medline、Web of Science、Embase和Cochrance等外文數(shù)據(jù)庫,查找HBsAg與抗-HBs共存現(xiàn)象相關(guān)文獻(xiàn),同時(shí)通過手工檢索相關(guān)參考文獻(xiàn)進(jìn)行補(bǔ)充。觀測結(jié)局指標(biāo)包括:感染者年齡、性別、HBV DNA水平、ALT水平和“a”決定簇突變。連續(xù)變量采用平均差和95%置信區(qū)間表示、二分類變量用相對危險(xiǎn)度和95%置信區(qū)間表示。采用I2檢驗(yàn)分析納入研究的統(tǒng)計(jì)學(xué)異質(zhì)性。2.以HBs Ag與抗-HBs共存感染者為病例組,以慢性HBV感染者為對照組,進(jìn)行HBs Ag定量檢測,比較兩組感染者HBsAg水平的分布特征;在前期突變分析的基礎(chǔ)上進(jìn)一步用Jameson-Wolf算法計(jì)算突變氨基酸序列與野生氨基酸序列的抗原性指數(shù),分析突變位點(diǎn)引起的抗原性指數(shù)變化。同時(shí)以HBsAg與抗-HBs共存感染者為病例組,以疫苗接種者為對照組,進(jìn)行抗-HBs定量檢測,采用競爭性酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)進(jìn)行抗-HBs親和力常數(shù)測定,比較兩組人群抗-HBs水平的分布特征和親和力常數(shù)的大小。3.對HBs Ag陽性/抗-HBs陰性感染者每年進(jìn)行一次隨訪,檢測其血清學(xué)指標(biāo),分析HBsAg與抗-HBs共存感染現(xiàn)象的發(fā)生率和影響因素。采用配對病例對照研究方法分析新發(fā)HBsAg與抗-HBs共存感染者在抗-HBs產(chǎn)生前后血清學(xué)指標(biāo)和病毒序列特征的變化情況。同時(shí)對HBsAg與抗-HBs共存感染者進(jìn)行隨訪,觀察其血清學(xué)指標(biāo)和病毒序列特征的變化情況。4.選取6例新發(fā)HBsAg與抗-HBs共存感染者,擴(kuò)增其S區(qū)基因片段,采用羅氏GS FLX+454進(jìn)行深度測序,分析其準(zhǔn)種構(gòu)成,比較其在抗-HBs產(chǎn)生前后準(zhǔn)種構(gòu)成的變化情況,同時(shí)分析準(zhǔn)種構(gòu)成特征與血清指標(biāo)間的相互關(guān)系。結(jié)果1.按檢索策略共檢索到文獻(xiàn)6867篇,最后納入文獻(xiàn)23篇,HBs Ag與抗-HBs共存感染者病例1709例,慢性HBV感染者對照18615例。Meta分析結(jié)果顯示,HBsAg陽性人群中,HBs Ag與抗-HBs共存現(xiàn)象的流行率約為4.15%(95%CI:4.00%~5.00%)。HBsAg與抗-HBs共存感染者年齡高于對照組(MD=1.96歲,95%CI:0.07~3.86,P=0.04);HBV DNA水平低于對照組(MD=0.30 log10 copies/ml,95%CI:0.05~0.55,P=0.02)。兩組感染者間HBe Ag陽性率(OR=1.15,95%CI:0.93~1.42,P=0.21)和ALT水平(MD=-4.05 IU/L,95%CI:-15.15~7.05,P=0.47)均無顯著性差異。HBsAg與抗-HBs共存感染者“a”決定簇126、129、130、131、133、134、135、138和145位點(diǎn)的突變率顯著高于對照組,存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,而其他位點(diǎn)間未見統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。2.HBsAg與抗-HBs共存感染者HBs Ag水平與慢性HBV感染者無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(2.99±0.80 vs 3.19±0.74 log IU/ml,F=2.12,P=0.15)。“a”決定簇突變均引起HBsAg MHR和“a”決定簇抗原指數(shù)的顯著增加,其中MHR抗原性指數(shù)增加5.02(t=3.00,P=0.01),“a”決定簇指數(shù)增加4.21(t=2.83,P=0.02)。HBsAg與抗-HBs共存感染者的抗-HBs水平顯著低于疫苗接種者(1.69±0.53 vs 2.70±0.45 log IU/ml,F=4.18,P=0.04)。HBsAg與抗-HBs共存感染者的抗-HBs親和力常數(shù)為3.94±2.94 10-8 mol/l,疫苗接種者的抗體親和力常數(shù)為3.55±2.77 10-8 mol/l,兩組人群抗-HBs親和力常數(shù)間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(t=0.34,P=0.74)。3.HBsAg陽性/抗-HBs陰性感染者隨訪結(jié)果顯示,HBsAg與抗-HBs共存現(xiàn)象的年均發(fā)生率為1.41±0.28%。影響抗-HBs產(chǎn)生的因素有年齡≥50歲(RR:1.02,95%CI:1.00~1.04,P=0.03),HBeAg陽性(RR:3.42,95%CI:1.90~6.17,P0.01),基線ALT異常(RR:3.65,95%CI:1.94~6.89,P0.01),HBV DNA水平≥20000 IU/ml(RR:2.25,95%CI:1.26~3.99,P0.01)。新發(fā)HBsAg與抗-HBs共存感染者在抗-HBs產(chǎn)生前后其HBsAg水平和ALT水平未見顯著性變化,但其HBV DNA水平顯著下降(t=3.26,P0.01)。HBsAg與抗-HBs共存感染者HBeAg陰轉(zhuǎn)率與未產(chǎn)生抗-HBs的HBe Ag陽性感染者(6/17 vs 209/548,P=0.89)無顯著性差異。序列特征分析顯示,擴(kuò)增獲得的5對新發(fā)共存感染者HBV S基因片段中,有3對感染者其基因型與序列均未發(fā)生變化,剩余2對感染者在抗-HBs產(chǎn)生后出現(xiàn)“a”決定簇突變株。對HBsAg與抗-HBs共存感染者隨訪,共有效隨訪58例共存感染者,平均隨訪2.9±1.49年,其中有15例感染者發(fā)生抗-HBs轉(zhuǎn)陰,但其中5例感染者在隨后的隨訪中,又可檢測到抗-HBs,HBsAg與抗-HBs共存感染者發(fā)生抗-HBs陰轉(zhuǎn)的年均發(fā)生率為18.05%;有4例感染者HBsAg消失,年均發(fā)生率為7.69%;其余74.26%的感染者持續(xù)HBsAg與抗-HBs共存狀態(tài)。在持續(xù)共存現(xiàn)象的感染者中,觀察其血清學(xué)指標(biāo)發(fā)現(xiàn)其HBs Ag水平(F=0.78,P=0.46)、抗-HBs水平(F=1.11,P=0.34)、HBV DNA水平(F=0.42,P=0.66)和ALT水平(F=0.39,P=0.68)均未見顯著性變化。序列特征分析顯示,擴(kuò)增獲得的14對共存感染者HBV S基因片段中,有7對感染者存在“a”決定簇突變株,突變點(diǎn)位I126N、P127S、Q129N、Q129H、M133L、Y134N、Y134F、G145A,1對感染者未見“a”決定簇突變株,3對感染者隨訪后發(fā)生了S區(qū)“a”決定簇突變株的變化。4.在發(fā)生抗-HBs轉(zhuǎn)換的6例感染者中,4例感染者初始血清的優(yōu)勢毒株為野生株,其所占比例分別為99.01%、98.85%、99.38%和96.93%,2例感染者初始血清優(yōu)勢毒株為“a”決定簇突變株,其所占比例為89.89%和51.11%。在產(chǎn)生抗-HBs后,6例感染者優(yōu)勢毒株均未發(fā)生變化。同時(shí)其氨基酸和核苷酸水平的準(zhǔn)種復(fù)雜度(P=0.39和P=0.51)、氨基酸和核苷酸水平的平均遺傳距離(P=0.68和P=0.86)、平均同義替換數(shù)(P=0.86)和平均非同義替代數(shù)(P=0.71)在抗-HBs轉(zhuǎn)換前后均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。結(jié)論1.HBsAg與抗-HBs共存感染者HBV DNA水平低于慢性感染者,提示共存感染者體內(nèi)病毒復(fù)制水平較慢性感染者低。HBsAg與抗-HBs共存感染者HBV“a”決定簇部分位點(diǎn)突變率顯著高于慢性感染者。2.HBsAg與抗-HBs共存感染者的抗-HBs親和力常數(shù)與疫苗接種者無顯著性差異,提示共存感染者的抗-HBs具有保護(hù)力�！癮”決定簇突變可引起HBs Ag“a”決定簇抗原指數(shù)的升高。3.HBsAg與抗-HBs共存現(xiàn)象是HBV自然發(fā)展過程的一類,慢性感染者可自然發(fā)展為HBsAg與抗-HBs共存感染者。影響這一進(jìn)程的因素有基線HBV DNA水平、HBe Ag狀態(tài)、感染者年齡。在慢性感染者變?yōu)镠BsAg與抗-HBs共存感染者后,其HBV DNA水平降低,進(jìn)一步提示抗-HBs具有保護(hù)性。4.在抗-HBs轉(zhuǎn)換前后,感染者優(yōu)勢毒株未發(fā)生變化。HBsAg與抗-HBs共存現(xiàn)象的產(chǎn)生并非由抗-HBs對“a”決定簇突變株的結(jié)合力降低而引起,而是慢性HBV感染者轉(zhuǎn)歸的一種。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R512.62
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本文編號：1571250