本文關(guān)鍵詞： HIV- CCR基因 RNA干擾 人工miRNA　出處：《中國皮膚性病學(xué)雜志》2017年04期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的構(gòu)建人工miR-CCR5,并研究其對HIV-1感染宿主細(xì)胞的影響。方法以miR-155為基礎(chǔ)骨架,根據(jù)HIV-1 CCR5基因序列設(shè)計并合成4對miRNA寡聚單鏈DNA,構(gòu)建4個人工miR-CCR5。采用qPCR技術(shù)檢測其對CCR5基因的沉默效率和對干擾素表達(dá)的影響;MTT法測定其對被轉(zhuǎn)染細(xì)胞的毒性;抗HIV-1_(BaL)感染實驗檢測其對HIV-1感染的抑制作用。結(jié)果 qPCR結(jié)果顯示,4個人工miR-CCR5對CCR5基因都具有一定的沉默效果,其中miR-CCR5-4的沉默效率最高,達(dá)72%;且不會對細(xì)胞干擾素的表達(dá)產(chǎn)生影響。MTT實驗證實miR-CCR5-4不會影響被轉(zhuǎn)染細(xì)胞的活性,此外,病毒抑制實驗顯示,miR-CCR5-4對HIV-1_(BaL)p24蛋白的抑制作用達(dá)70.48%,效果明顯。結(jié)論所獲得的miR-CCR5-4可為進(jìn)一步的抗HIV-1_(BaL)感染研究提供基礎(chǔ)。
[Abstract]:Objective to construct artificial miR-CCR5 and study the effect of miR-CCR5 on HIV-1 infected host cells. According to the sequence of HIV-1 CCR5 gene, four pairs of miRNA oligonucleotides were designed and synthesized, and four artificial miR-CCR5s were constructed. The silencing efficiency of CCR5 gene and the expression of interferon were detected by qPCR technique. Results the results of qPCR showed that the four artificial miR-CCR5 had certain silencing effect on CCR5 gene, and miR-CCR5-4 had the highest silencing efficiency. No effect on the expression of interferon. MTT assay confirmed that miR-CCR5-4 did not affect the activity of transfected cells. Virus inhibition test showed that the inhibitory effect of miR-CCR5-4 on HIV-1_(BaL)p24 protein was 70.48. Conclusion the obtained miR-CCR5-4 may provide a basis for further research on anti-HIV-1 Bal infection.
【作者單位】： 衡陽師范學(xué)院生命科學(xué)與環(huán)境學(xué)院功能金屬有機(jī)材料湖南省重點實驗室;南華大學(xué)藥學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院;Laboratory
【基金】：湖南省自然科學(xué)基金重點項目(09JJ3034)
【分類號】：R512.91

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本文編號：1495974