本文關鍵詞： HIV- CCR基因 RNA干擾 人工miRNA　出處：《中國皮膚性病學雜志》2017年04期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的構建人工miR-CCR5,并研究其對HIV-1感染宿主細胞的影響。方法以miR-155為基礎骨架,根據HIV-1 CCR5基因序列設計并合成4對miRNA寡聚單鏈DNA,構建4個人工miR-CCR5。采用qPCR技術檢測其對CCR5基因的沉默效率和對干擾素表達的影響;MTT法測定其對被轉染細胞的毒性;抗HIV-1_(BaL)感染實驗檢測其對HIV-1感染的抑制作用。結果 qPCR結果顯示,4個人工miR-CCR5對CCR5基因都具有一定的沉默效果,其中miR-CCR5-4的沉默效率最高,達72%;且不會對細胞干擾素的表達產生影響。MTT實驗證實miR-CCR5-4不會影響被轉染細胞的活性,此外,病毒抑制實驗顯示,miR-CCR5-4對HIV-1_(BaL)p24蛋白的抑制作用達70.48%,效果明顯。結論所獲得的miR-CCR5-4可為進一步的抗HIV-1_(BaL)感染研究提供基礎。
[Abstract]:Objective to construct artificial miR-CCR5 and study the effect of miR-CCR5 on HIV-1 infected host cells. According to the sequence of HIV-1 CCR5 gene, four pairs of miRNA oligonucleotides were designed and synthesized, and four artificial miR-CCR5s were constructed. The silencing efficiency of CCR5 gene and the expression of interferon were detected by qPCR technique. Results the results of qPCR showed that the four artificial miR-CCR5 had certain silencing effect on CCR5 gene, and miR-CCR5-4 had the highest silencing efficiency. No effect on the expression of interferon. MTT assay confirmed that miR-CCR5-4 did not affect the activity of transfected cells. Virus inhibition test showed that the inhibitory effect of miR-CCR5-4 on HIV-1_(BaL)p24 protein was 70.48. Conclusion the obtained miR-CCR5-4 may provide a basis for further research on anti-HIV-1 Bal infection.
【作者單位】： 衡陽師范學院生命科學與環(huán)境學院功能金屬有機材料湖南省重點實驗室;南華大學藥學與生命科學學院;Laboratory
【基金】：湖南省自然科學基金重點項目(09JJ3034)
【分類號】：R512.91

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本文編號：1495974