本文關(guān)鍵詞：氟康唑和黃芩苷聯(lián)合對耐氟康唑的白念珠菌ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的影響　出處：《昆明醫(yī)科大學(xué)》2013年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：目的：1.研究氟康唑和黃芩苷單用以及聯(lián)合應(yīng)用對標(biāo)準(zhǔn)菌株、臨床分離的對耐氟康敏感菌株和臨床分離的對氟康唑耐藥的白念珠菌菌株(即白假絲酵母菌)MIC的影響。2.氟康唑和黃芩苷單用與聯(lián)合應(yīng)用對白念珠菌耐藥株細(xì)胞膜上主動(dòng)外排基因CDR1、CDR2表達(dá)水平(mRNA)的影響以及對基因表達(dá)產(chǎn)物ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的影響的研究。 方法：1、采用(ATCC)標(biāo)準(zhǔn)白念珠菌菌株和臨床分離的對氟康唑敏感和對氟康唑耐藥的菌株：通過微量稀釋法進(jìn)行氟康唑、黃芩苷兩種藥物敏感性實(shí)驗(yàn)研究(根據(jù)美國國家臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)(NCCLS)制定的M27-A方案)；2、采用棋盤式微量稀釋法檢測黃芩苷與氟康唑聯(lián)合用藥對白念珠菌的抑菌效果,以部分抑菌濃度指數(shù)來評價(jià)；3、用RT-PCR法檢測臨床分離敏感菌株、耐藥株和標(biāo)準(zhǔn)株的主動(dòng)外排基因CDR1、CDR2的表達(dá)水平(mRNA)。4.采用檢測氟康唑和黃芩苷單用和聯(lián)合應(yīng)用后標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床分離的敏感,耐藥菌株的細(xì)胞外液中羅丹明6G的濃度,來間接檢測ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的外排情況,從而明確ABC轉(zhuǎn)運(yùn)的外排活性的高低,來進(jìn)一步觀察CDR1.CDR2基因表達(dá)產(chǎn)物ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的表達(dá)水平。5.統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用單側(cè)t檢驗(yàn)。 結(jié)果：1、氟康唑、黃芩苷對白念珠菌標(biāo)準(zhǔn)菌株,臨床分離的對氟康唑敏感和耐藥菌株的MIC分別為4mg/ml、4μg/ml,2mg/ml、1ug/ml,8mg/ml,64ug/ml；2、氟康唑、黃芩苷聯(lián)合用藥對標(biāo)準(zhǔn)、臨床分離的對氟康唑敏感和耐藥菌株的MIC分別為0.5mg/ml、1μg/ml, FICI=1/4+0.5/4=0.3750.5,0.25mg/ml、0.125μg/ml, FICI=0.25/2+0.125/1=0.250.5;2mg/ml,16μg/ml, FICI=1/8+16/64=0.3750.5表明黃芩苷與氟康唑合用具有較強(qiáng)協(xié)同抗菌作用；3、標(biāo)準(zhǔn)菌株在未用藥時(shí)CDR1.CDR2均未見表達(dá),在用氟康唑和黃芩苷前后均未出現(xiàn)CDR1, CDR2表達(dá)水平的明顯差異(P0.05),在氟康唑和黃芩苷聯(lián)用后出現(xiàn)CDR1的表達(dá),而CDR2未見表達(dá)；臨床分離的敏感菌株在未用藥時(shí)CDR1低表達(dá),CDR2未見表達(dá),應(yīng)用氟康唑和黃芩苷單獨(dú)和聯(lián)合用藥后CDRl表達(dá)水平均升高(P0.05), CDR2表達(dá)水平無差異(P0.05)；臨床分離的耐氟康唑的菌株未用藥時(shí)見CDR1.CDR2的表達(dá),在應(yīng)用氟康唑和黃芩苷單獨(dú)處理和兩種藥物聯(lián)合處理后均出現(xiàn)CDRl表達(dá)水平升高(P0.05),并伴有CDR2的表達(dá)水平上調(diào)(P0.05)。4.三株菌株在未用藥時(shí)細(xì)胞外液的羅丹明6G濃度在加入葡萄糖后升高,在加入氟康唑和黃芩苷單獨(dú)用藥時(shí),均出現(xiàn)細(xì)胞外液羅丹明6G濃度升高水平降低(P0.05),并且黃芩苷單獨(dú)用藥組升高水平較氟康唑單獨(dú)用藥組升高水平高(P0.05),兩種藥物聯(lián)合應(yīng)用時(shí)細(xì)胞外液羅丹明6G濃度升高水平顯著低于氟康唑和黃芩苷單獨(dú)用藥組(P0.05)。 結(jié)論：1、黃芩昔、氟康唑?qū)Π准俳z酵母菌均有不同程度的抑制作用,各自的MIC有所差異,它們聯(lián)合用藥與各自單用藥對白假絲酵母菌的MIC值相比較有所減低,且FICI0.5,兩藥的相互作用為協(xié)同作用。2.黃芩苷和氟康唑均能上調(diào)耐氟康唑白念珠菌的CDRl的基因表達(dá),并能抑制ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的外排功能。3.CDR2基因的表達(dá)可能于CDRl基因的表達(dá)有關(guān)。
[Abstract]:Objective : 1 . To study the effects of fluconazol and baicalin on the MIC of Candida albicans strains ( i.e . , Candida albicans ) resistant to fluconazol and clinical isolates . The effects of fluconazol and baicalin on the expression level ( mRNA ) of active efflux genes CDR1 and CDR2 on the cell membrane of Candida albicans were studied . Methods : 1 . The sensitivity and the clinical isolates of Candida albicans strains and clinical isolates were used to study the susceptibility to Fluconazole and Fluconazole . The inhibitory effect of baicalin and Fluconazole on Candida albicans was evaluated by microdilution method . Results : The levels of CDR1 and CDR2 were increased ( P < 0.05 ) . The levels of CDR1 and CDR2 were increased after the combination of fluconazol and baicalin ( P0.05 ) . Conclusion : 1 . The inhibitory effect of baicalin and fluconazol on Candida albicans is different . The MIC values of the two drugs are reduced compared with the MIC of Candida albicans , and the interaction between them is synergistic . 2 . Both baicalin and fluconazol can increase the gene expression of CDR1 of Candida albicans and inhibit the efflux of ABC transporter .

【學(xué)位授予單位】：昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R519.3

【參考文獻(xiàn)】

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1 任南,文細(xì)毛;白色念珠菌致病機(jī)制的研究進(jìn)展[J];中國感染控制雜志;2003年02期

2 劉春平,南國榮,王鳳榮,四榮聯(lián),王剛生;射干提取物對紅色毛癬菌抑菌作用的實(shí)驗(yàn)研究[J];河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);1999年03期

3 吳秀珍;傅穎媛;李劍平;陶建華;劉婷;;黃芩苷對白色念珠菌超微結(jié)構(gòu)的影響[J];江西醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2007年04期

4 曾松榮,曾曉君,黃曉敏,柯野;十種中草藥對白色念珠菌的藥敏試驗(yàn)研究[J];山東醫(yī)藥;2005年23期

5 汪長中;程惠娟;徐穎;官妍;洪靜;汪斌;云云;王艷;;黃芩苷體外抗白念珠菌生物膜作用的研究[J];上海中醫(yī)藥雜志;2008年08期

6 周智興;傅穎媛;;黃芩苷對白色念珠菌酶活性的影響[J];時(shí)珍國醫(yī)國藥;2007年11期

7 歐陽錄明,黃曉敏,吳興無,張波,劉漢勝;中草藥體外抗白色念珠菌的實(shí)驗(yàn)研究[J];中國中醫(yī)藥信息雜志;2000年03期

8 熊英,傅穎媛,況南珍,張文平;黃芩苷抗白念珠菌作用及機(jī)制研究[J];中國藥理學(xué)通報(bào);2004年12期

9 宋軍,于廉君,李鶴玉,趙小秋;丁香酚抗真菌作用的實(shí)驗(yàn)研究[J];中國皮膚性病學(xué)雜志;1996年04期

10 宮毓靜,安汝國,虞慧,王理達(dá),鄭俊華,果德安;164種中藥乙醇提取物抗真菌作用研究[J];中草藥;2002年01期

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本文編號：1431212