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Bad和PCNA在尖銳濕疣組織中的表達(dá)及意義

發(fā)布時(shí)間:2018-01-14 18:02

  本文關(guān)鍵詞:Bad和PCNA在尖銳濕疣組織中的表達(dá)及意義 出處:《鄭州大學(xué)》2017年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文


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【摘要】:背景和目的尖銳濕疣(condyloma acuminatum,CA)是人類乳頭瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染皮膚粘膜引起的良性贅生物,好發(fā)于外生殖器、肛周、尿道口、宮頸,偶可見于趾間、口腔、臍窩等部位。近年來CA的發(fā)病率呈不斷上升趨勢(shì),是目前我國(guó)很常見的性傳播性疾病(sexually transmitte diseases,STD)之一,該病主要發(fā)生在性活躍的人群中,多見于青壯年男女。雖然CA是一種良性的增生性疾病,但其具有傳染性強(qiáng),疣體增長(zhǎng)迅速,治療后常易復(fù)發(fā)等特點(diǎn),且部分巨大型CA有癌變傾向,致使患者心理壓力大,甚至部分患者出現(xiàn)抑郁癥狀,嚴(yán)重影響患者的身心健康,該病成為國(guó)家疾病控制中心(centers for disease control,CDC)重點(diǎn)檢測(cè)的STD之一。CA皮損生長(zhǎng)快,治療后高復(fù)發(fā)率,這可能與CA組織中存在異常增殖和凋亡的角質(zhì)形成細(xì)胞有關(guān),但關(guān)于CA組織中角質(zhì)形成細(xì)胞異常增殖和異常凋亡的確切機(jī)制尚不十分清楚,這種異常增殖和凋亡可能受到多種凋亡相關(guān)基因的調(diào)控。促凋亡蛋白Bad是Bcl-2家族蛋白中的一員,同時(shí)具有BH3同源結(jié)構(gòu)區(qū)域和序列,可以促進(jìn)細(xì)胞凋亡。當(dāng)?shù)蛲龃碳ば盘?hào)存在,可導(dǎo)致Bad的結(jié)構(gòu)發(fā)生改變,其活化后即轉(zhuǎn)位到線粒體外膜與Bcl-xL結(jié)合,從而誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。多項(xiàng)研究表明,促凋亡蛋白Bad對(duì)多種腫瘤的形成、轉(zhuǎn)移有著重要的意義。PCNA是一種酸性的核蛋白,作為DNA聚合酶的一種輔酶,可以參加細(xì)胞異常增殖過程中DNA的復(fù)制,而且還與細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)密切相關(guān),PCNA是目前公認(rèn)的腫瘤細(xì)胞S期的一種標(biāo)志物,已被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞異常增生的實(shí)驗(yàn)研究。但促凋亡蛋白Bad在CA組織中的表達(dá)情況以及其和PCNA的相關(guān)性缺乏研究,為探究CA組織中Bad的表達(dá)情況及其與PCNA之間的關(guān)系,本實(shí)驗(yàn)采用免疫組化的方法檢測(cè)Bad和PCNA在CA組織和正常包皮組織中的表達(dá)情況,探討B(tài)ad和PCNA在CA的發(fā)生、發(fā)展中的可能病理機(jī)制。材料與方法1材料53例CA患者皮損組織標(biāo)本為實(shí)驗(yàn)組,其中男性32例,女性21例;年齡16~65歲,平均32.5士8.7歲;病程14天~180天,平均50.7士4.3天。實(shí)驗(yàn)組標(biāo)本均來自2015年9月至2016年9月鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院皮膚與性病科門診患者。所有入選患者臨床表現(xiàn)典型,醋酸白實(shí)驗(yàn)陽性,皮損行組織病理檢查并符合CA的組織學(xué)表現(xiàn),分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)證明有HPV感染存在,均與CA的診斷標(biāo)準(zhǔn)相符合,無其他系統(tǒng)性疾病,皮損取材前患者均未接受免疫性的藥物、冷凍、激光等任何相關(guān)治療。28例正常對(duì)照組標(biāo)本都來自我院泌尿科成年男性包皮環(huán)切術(shù)后所切除的包皮組織,并經(jīng)組織病理檢查證明其為正常的組織上皮。2方法采用免疫組化的方法檢測(cè)Bad和PCNA的表達(dá)情況,所有的實(shí)驗(yàn)步驟嚴(yán)格按照所用試劑盒上的說明進(jìn)行操作。Bad陽性表達(dá)主要處于細(xì)胞膜和細(xì)胞質(zhì),陽性細(xì)胞顯色為棕黃色至棕褐色顆粒。PCNA陽性表達(dá)定位于細(xì)胞核,棕黃色或棕褐色顆粒為陽性染色。參照文獻(xiàn)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn),根據(jù)組織切片中細(xì)胞染色強(qiáng)弱及陽性細(xì)胞所占總細(xì)胞的百分比實(shí)行分級(jí)評(píng)分。染色強(qiáng)度分為不著色、淺黃色、棕黃色、棕褐色,分別對(duì)應(yīng)著0分、1分、2分、3分。陽性細(xì)胞占總細(xì)胞的百分比:小于等于10%為0分,在11%和25%之間為1分,在26%和50%之間為2分,在51%和75%之間為3分,大于等于76%為4分。最后將上述兩項(xiàng)分值的乘積作為最終得分:得分為0分,判定陰性(-);分值在1分和4分之間,判定為弱陽性(+);5分至8分,判定為陽性(++);9分至12分,判定為強(qiáng)陽性(+++)。3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理將實(shí)驗(yàn)所得的數(shù)據(jù)采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,用χ2檢驗(yàn)Bad和PCNA的陽性表達(dá)率差異,Bad和PCNA的陽性表達(dá)強(qiáng)度應(yīng)用秩和檢驗(yàn)的方法,運(yùn)用非參系統(tǒng)中的Spearman方法分析CA組織中Bad和PCNA之間的相關(guān)性,檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)P0.05,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果1 Bad在CA組織和正常包皮組織中的表達(dá)53例CA患者組織中,Bad出現(xiàn)陽性表達(dá)為37例,其陽性表達(dá)率為69.81%(37/53),陽性表達(dá)的強(qiáng)度多呈++~+++,陽性顯色主要位于細(xì)胞膜和細(xì)胞質(zhì);28例正常包皮組織細(xì)胞中Bad出現(xiàn)陽性表達(dá)為8例,其陽性表達(dá)率為28.57%(8/28),陽性表達(dá)的強(qiáng)度多呈-~+。實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組中Bad的陽性表達(dá)率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=18.436,P0.05),Bad在兩組中的陽性表達(dá)強(qiáng)度有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(H=23.063,P0.05)。2 PCNA在CA組織和正常包皮組織中的表達(dá)53例CA患者組織中,PCNA出現(xiàn)陽性表達(dá)為46例,其陽性率為86.79%(46/53),陽性表達(dá)的強(qiáng)度多呈++~+++,陽性顏色主要位于細(xì)胞核,大多數(shù)呈棕褐色顆粒;28例對(duì)照組中PCNA出現(xiàn)陽性表達(dá)為11例,其陽性表達(dá)率為39.28%,陽性表達(dá)強(qiáng)度大多數(shù)呈+~++。兩組中PCNA的陽性表達(dá)率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=4.356,P0.05),PCNA在兩組中的陽性表達(dá)強(qiáng)度有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(H=13.452,P0.05)。3 Bad和PCNA在CA組織中表達(dá)的相關(guān)性分析在37例Bad表達(dá)陽性中,PCNA陽性表達(dá)的有31例,6例陰性;在46例PCNA蛋白表達(dá)陽性中,Bad出現(xiàn)陽性表達(dá)的有31例,陰性15例。經(jīng)過Spearman相關(guān)分析CA組織中Bad與PCNA的陽性表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.379,P0.05)。結(jié)論1.Bad在CA組織中的陽性表達(dá)率和陽性表達(dá)強(qiáng)度均高于對(duì)照組,表明CA組織中存在Bad的過表達(dá),這種過表達(dá)提示Bad在一定程度上能促進(jìn)CA組織中角質(zhì)形成細(xì)胞的凋亡,抑制CA的過度增生。2.PCNA在CA組織中的陽性表達(dá)率和陽性表達(dá)強(qiáng)度均高于對(duì)照組,表明CA組織中存在PCNA的高表達(dá),這種高表達(dá)提示CA組織中角質(zhì)形成細(xì)胞存在異常的增殖。3.在CA組織中促凋亡蛋白Bad和增殖細(xì)胞核抗原PCNA之間的表達(dá)呈正相關(guān),提示Bad和PCNA可能共同參與CA的發(fā)生、發(fā)展,也提示了CA疾病的形成受到多種凋亡相關(guān)基因的調(diào)控,但其確切機(jī)制仍需進(jìn)一步研究。
[Abstract]:In recent years , CA is one of the most common sexually active diseases in China . The expression of Bad and PCNA in CA and its relationship with PCNA were studied by immunohistochemical method . The positive expression of Bad and PCNA in CA tissue and normal skin tissue was significantly higher than that in control group ( 蠂2 = 18.436 , P0.05 ) . The positive expression of Bad in CA was positively correlated with the positive expression of Bad and PCNA ( r = 0.379 , P0.05 ) . Conclusion The positive expression rate and the positive expression intensity of Bad in CA tissue are higher than those in the control group . The positive expression rate and the positive expression intensity of PCNA in CA tissues are higher than those in the control group . The positive expression rate and the positive expression intensity of PCNA in CA tissues are significantly higher than those in the control group , suggesting that the expression of PCNA in CA tissue is positive correlation , suggesting that Bad and PCNA may be involved in CA ' s development and development , but also suggest that the formation of CA disease is regulated by various apoptosis related genes , but the exact mechanism still needs further study .

【學(xué)位授予單位】:鄭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號(hào)】:R752.53

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):1424676

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