本文關(guān)鍵詞：環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)檢測(cè)馬爾尼菲青霉菌的研究

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【摘要】：目的應(yīng)用環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增(LAMP)技術(shù)建立馬爾尼菲青霉菌(PM)快速檢測(cè)方法,探討該方法的特異性、敏感性等,評(píng)價(jià)其臨床應(yīng)用價(jià)值。方法針對(duì)馬爾尼菲青霉菌的特異性基因MP1基因設(shè)計(jì)4條特異引物,反應(yīng)前加入鈣黃綠素?zé)晒庠噭?63℃恒溫反應(yīng)60min,結(jié)束后通過目視檢測(cè)熒光及濁度儀檢測(cè)產(chǎn)物濁度值判斷結(jié)果;評(píng)價(jià)所建立LAMP方法的特異性和敏感性,建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,并用LAMP法及PCR法檢測(cè)樣本,比較樣本檢出情況。結(jié)果該方法特異性良好,PM出現(xiàn)特異性LAMP擴(kuò)增反應(yīng),而煙曲霉菌、腐皮鐮刀菌、棘狀外瓶酶菌、大腸埃希菌、嗜水氣單胞菌、哈氏孤菌、創(chuàng)傷孤菌、水等均未出現(xiàn)擴(kuò)增;檢測(cè)限約為1.7×10-7 ng/μl,為PCR檢測(cè)方法的10倍;以LAMP反應(yīng)時(shí)間X軸,濃度的負(fù)次方數(shù)為Y軸,構(gòu)建的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為y=0.4145x-8.9968,相關(guān)系數(shù)R2=0.9963,呈良好的線性關(guān)系;樣本檢測(cè)結(jié)果顯示,LAMP法較PCR法獲得更高的敏感性。結(jié)論 LAMP檢測(cè)方法具有特異性高、敏感性高、反應(yīng)時(shí)間短的特點(diǎn),簡便易行,適合于基層對(duì)PM的快速檢測(cè)。
【作者單位】： 廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院呼吸內(nèi)科;廣西水產(chǎn)科學(xué)研究院;
【基金】：廣西衛(wèi)生廳科技研究基金資助項(xiàng)目(Z211314)
【分類號(hào)】：R519
【正文快照】： 馬爾尼菲青霉病(PSM)是一種由馬爾尼菲青霉菌(PM)感染引起的一種機(jī)會(huì)感染性的深部真菌病,具有地域流行性。該病發(fā)病隱匿,臨床表現(xiàn)復(fù)雜,治療困難,其生存率與早期診斷密切相關(guān)。因此,快捷、高效、準(zhǔn)確診斷PSM具有重要意義。2000年,Notomi等[1]開發(fā)了環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增(LAMP)技術(shù),并

【相似文獻(xiàn)】

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