改良抗酸染色在結(jié)核性漿膜炎臨床診斷中的價(jià)值及應(yīng)用
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【摘要】:背景結(jié)核病是由結(jié)核分枝桿菌引起的一種慢性、全身性傳染病。自20世紀(jì)80年代以來,伴隨著人口遷徙日益增多、免疫抑制劑的廣泛應(yīng)用和HIV感染者不斷增多、多種抗藥性結(jié)核病菌株的產(chǎn)生,結(jié)核病(包括肺外結(jié)核)的發(fā)病率在發(fā)展中國(guó)家都有明顯增加。目前我國(guó)結(jié)核病年發(fā)病人數(shù)約為130萬,在全球發(fā)病率中居第二位。在結(jié)核病防治中,結(jié)核分枝桿菌的分離培養(yǎng)仍舊是診斷的“金標(biāo)準(zhǔn)”,但是,培養(yǎng)陽(yáng)性率只有35%左右,且培養(yǎng)周期較長(zhǎng)(通常需4-8周),嚴(yán)重限制了金標(biāo)準(zhǔn)的臨床應(yīng)用。由于結(jié)核病在各個(gè)組織器官均可發(fā)生,不同器官組織的結(jié)構(gòu)差異使得不同器官組織結(jié)核病的表現(xiàn)亦會(huì)出現(xiàn)相應(yīng)的差異。目前臨床上常用的結(jié)核病診斷方法包括:細(xì)菌學(xué)檢查、免疫學(xué)診斷、分子生物學(xué)檢測(cè)、病理學(xué)診斷、影像學(xué)診斷等方法。體液涂片抗酸染色顯微鏡檢查抗酸桿菌是臨床診斷結(jié)核病最主要的細(xì)菌學(xué)方法,抗酸桿菌也是實(shí)驗(yàn)室需要重點(diǎn)檢測(cè)的細(xì)菌,然而傳統(tǒng)抗酸染色法檢測(cè)結(jié)核病的陽(yáng)性率只有5%。目的涂片抗酸染色鏡檢法檢測(cè)抗酸桿菌應(yīng)用于臨床診斷已有100余年。抗酸染色涂片鏡檢法因其快速、廉價(jià),并且具有特異性,是世界范圍內(nèi)結(jié)核病檢查中使用最廣泛的技術(shù)。因其不需要復(fù)雜技術(shù)和財(cái)政支持,WHO推薦發(fā)展中國(guó)家在結(jié)核病防控中采用此項(xiàng)技術(shù)。一種全新的改良抗酸染色法在結(jié)核性腦膜炎的診斷中取得了驚人的成就:可以將結(jié)核性腦膜炎診斷的陽(yáng)性率由16.7%提高到93.8%[1,2]。我們嘗試能否將此改良抗酸染色法移植到結(jié)核性漿膜炎的臨床診斷中,以期建立一種快速簡(jiǎn)捷、靈敏度好、特異性高、臨床診斷收益高的漿膜腔積液檢測(cè)抗酸桿菌的改良抗酸染色法。方法自2013年5月至2013年10月連續(xù)6個(gè)月,收集第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院、陜西省結(jié)核病醫(yī)院、西安市結(jié)核病醫(yī)院三所醫(yī)院疑診結(jié)核性漿膜炎病例作為此次研究對(duì)象,留取其漿膜腔積液以盲法送實(shí)驗(yàn)室待檢,同時(shí)行傳統(tǒng)抗酸及改良抗酸兩種染色方法檢測(cè)抗酸桿菌。檢測(cè)到抗酸桿菌者,記錄為傳統(tǒng)法/改良法陽(yáng)性,否則記錄為傳統(tǒng)法/改良法陰性,傳統(tǒng)抗酸法取5ml漿膜腔積液離心15分鐘(3000轉(zhuǎn)/分),取沉淀物涂片,干透后進(jìn)行傳統(tǒng)抗酸法染色,自然干燥后10×100倍鏡檢。改良抗酸法采用粟氏fmu-6細(xì)胞沉淀器和特殊處理的載玻片,收集0.5ml漿膜腔積液,經(jīng)粟氏fmu-6細(xì)胞離心機(jī)(700轉(zhuǎn)/分)離心7分鐘,待涂片瀝干后,用加入了tritonx-100的媒染劑染色。進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,比較傳統(tǒng)法與改良法抗酸桿菌陽(yáng)性檢出率的差異。對(duì)臨床確診為結(jié)核性漿膜炎(疑診須經(jīng)隨訪最終確診)病例中改良法檢測(cè)結(jié)果為陰性的病例進(jìn)行分析;并回顧性統(tǒng)計(jì)確診病例中改良法與傳統(tǒng)法對(duì)于結(jié)核性漿膜炎的陽(yáng)性檢出數(shù),比較兩者檢出率的差異;回顧性統(tǒng)計(jì)確診病例中既往細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果、病理檢查結(jié)果、診斷性治療結(jié)果、血液t淋巴細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)結(jié)果,統(tǒng)計(jì)上述四種方法對(duì)于結(jié)核性漿膜炎的陽(yáng)性檢出率,分別比較上述四種方法與改良法陽(yáng)性檢出率的差異。結(jié)果用初診為結(jié)核性漿膜炎的100例患者的漿膜腔積液,比較改良法和傳統(tǒng)法的抗酸桿菌陽(yáng)性檢出率:改良法的陽(yáng)性檢出率為34%(34/100),傳統(tǒng)法的陽(yáng)性檢出率為3%(3/100),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(mcnemarx2=6.004,p0.001),改良法的陽(yáng)性率高于傳統(tǒng)法;兩名醫(yī)生對(duì)改良法檢測(cè)抗酸桿菌結(jié)果作比較:觀察符合率=95%、卡帕(kappa)值=89.2%,改良染色法的可靠性高。在49例確診為結(jié)核性漿膜炎患者的漿膜腔積液,比較改良法和傳統(tǒng)法的陽(yáng)性病例檢出率:改良法的陽(yáng)性率為59.18%(29/49),傳統(tǒng)法的陽(yáng)性率為6.12%(3/49),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(mcnemarx2=2.204,p0.001),改良法的陽(yáng)性率高于傳統(tǒng)法的陽(yáng)性率。對(duì)以上49份病例進(jìn)一步分層統(tǒng)計(jì),改良法的陽(yáng)性率均高于傳統(tǒng)法:從未抗結(jié)核治療的28例中改良法和傳統(tǒng)法的陽(yáng)性率分別為71.43%(20/28)、3.57%(1/28),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(mcnemarx2=0.415,p0.001);已經(jīng)抗結(jié)核治療的21例中改良法和傳統(tǒng)法的陽(yáng)性率分別為42.86%(9/21)、9.52%(4/21),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(mcnemarx2=2.947,p=0.016)。改良法的陽(yáng)性率受患者接受抗結(jié)核治療時(shí)間的影響:在治療時(shí)間≤14天組的陽(yáng)性率為69.4%(25/36),在治療時(shí)間14天組為30.7%(4/13),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=5.914,p=0.015);在治療時(shí)間≤28天組的陽(yáng)性率為66.7%(26/39),在治療時(shí)間28天組為30.0%(3/10),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=4.430,p=0.035)。回顧上述病例中既往細(xì)菌培養(yǎng)、病理檢查、診斷性治療結(jié)果、血液t淋巴細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)結(jié)果,分別與改良法結(jié)果比較:培養(yǎng)的陽(yáng)性率為15.8%(3/19),改良法的陽(yáng)性率為26.3%(5/19),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=9.975,p=0.02);病理檢查的陽(yáng)性率為77.8%(21/27),改良法的陽(yáng)性率為74.1%(20/27),差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=0.220,p=0.633);診斷性治療的陽(yáng)性率為97.9%(46/47),改良法的陽(yáng)性率為59.6%(28/47),差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=0.693,p=0.405);血液t淋巴細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)的陽(yáng)性率為86.0%(37/43),改良法的陽(yáng)性率為65.1%(28/43),差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=0.701,p=0.402)。結(jié)論改良法的陽(yáng)性率高、真實(shí)性強(qiáng),kappa值高、可靠性強(qiáng)。疑/確診結(jié)核性漿膜炎病例中改良法陽(yáng)性檢出率均大于傳統(tǒng)法。確診病例中發(fā)病有初發(fā)、復(fù)發(fā),病情有穩(wěn)定、活動(dòng),干預(yù)有已治、未治,分層較廣。改良法的陽(yáng)性率與病理檢查結(jié)果、血液t淋巴細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)結(jié)果、診斷性治療的陽(yáng)性率比較,無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。但是病理取材受穿刺部位限制,有取材遺漏等缺陷;血液t淋巴細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)有細(xì)胞分離、提取、洗滌等較為復(fù)雜的技術(shù),不能區(qū)分活動(dòng)性結(jié)核與潛伏感染者[3]且檢查費(fèi)用高;診斷性治療耗時(shí)長(zhǎng)更易受耐藥影響。改良法抗酸染色卻不受取材部位限制,不需要復(fù)雜的操作、太多的醫(yī)療花費(fèi),對(duì)實(shí)驗(yàn)要求不高,可操作性強(qiáng)。改良法對(duì)于胞內(nèi)細(xì)菌的檢出無疑增加了結(jié)核病原菌診斷的特異性。改良法操作簡(jiǎn)捷、靈敏度好、特異性高、臨床效益高,值得在結(jié)核性漿膜炎的臨床診斷中推廣。
【學(xué)位授予單位】:第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R529.0
【相似文獻(xiàn)】
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中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條
1 郭永博;改良抗酸染色在結(jié)核性漿膜炎臨床診斷中的價(jià)值及應(yīng)用[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2015年
,本文編號(hào):1159018
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