本文關(guān)鍵詞：環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增法檢測棘顎口線蟲方法的建立

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【摘要】：棘顎口線蟲是引起人體顎口線蟲病最主要的病原,其引起的病例呈世界性分布。由于其復(fù)雜的生活史,以及不同生長階段形態(tài)的變化差異,傳統(tǒng)的形態(tài)學(xué)鑒定方法很難鑒別。為了快速、靈敏和可靠的鑒定棘顎口線蟲,本研究建立了一套檢測棘顎口線蟲的DNA環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法。根據(jù)LAMP方法原理,針對棘顎口線蟲的ITS2 rDNA設(shè)計(jì)了三套特異性引物特異性識(shí)別靶基因。進(jìn)行了特異性、靈敏度、穩(wěn)定性和實(shí)際樣品的測試。結(jié)果表明,該方法對棘顎口線蟲DNA能夠特異性擴(kuò)增,而比對蟲體DNA均無擴(kuò)增;對含有棘顎口線蟲ITS2目的基因片段的質(zhì)粒DNA的檢測限為1 fg/μL,比傳統(tǒng)的PCR方法靈敏度高100倍;對51批次實(shí)際樣品的進(jìn)行檢測,LAMP方法與傳統(tǒng)的PCR測序方法結(jié)果相符。本研究設(shè)計(jì)的LAMP檢測方法適用于特異性檢測棘顎口線蟲。
【作者單位】： 華南理工大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院;廣州機(jī)場出入境檢驗(yàn)檢疫局國家水產(chǎn)品檢測重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;暨南大學(xué)食品安全與營養(yǎng)研究院;
【關(guān)鍵詞】： 環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)(LAMP) 棘顎口線蟲 快速檢測
【基金】：國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局科技計(jì)劃項(xiàng)目(2015IK055) 廣東出入境檢驗(yàn)檢疫局科技項(xiàng)目(2014GDK25)
【分類號(hào)】：R532.1
【正文快照】： 顎口線蟲病是人感染顎口線蟲屬線蟲的幼蟲而 引起的疾病,主要是由于食入生的或未熟的含有顎口線蟲的淡水魚。它能夠引起人的移行性皮下包塊,還可侵襲深部組織和器官,如肺、眼、肝、腎和神經(jīng)系統(tǒng)等,引起嚴(yán)重癥狀甚至死亡[1~3]。顎口線蟲有13個(gè)種,目前已報(bào)道的致病種有6個(gè),其中

【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1030499