β2微球蛋白(B2M)標準品是研究透析相關(guān)淀粉樣變和評估血液透析器透過效率的重要試劑。B2M易于聚集的特性導(dǎo)致其作為標準品的單體濃度降低,使得檢測結(jié)果準確性下降。為了準確評價B2M標準品的質(zhì)量,該研究建立了基于凝膠過濾色譜的B2M樣品中非聚集單體的定量檢測方法。使用TSKgel SuperSW2000 (30 cm×4.6 mm, 4μm)凝膠篩分色譜柱,流動相為0.01 mol/L磷酸鹽緩沖液(PBS, pH 7.2～7.4),流速為0.5 mL/min,柱溫為25℃。使用紫外檢測器,檢測波長為280 nm,外標法定量。在0.05～0.50 g/L的B2M單體質(zhì)量濃度范圍內(nèi)線性良好,相關(guān)系數(shù)為0.994 8。定量限(信噪比為10)為0.08 g/L,添加水平為0.10～0.30 g/L時,回收率為85.0%～96.7%,相對標準偏差為1.7%～3.3%。使用該方法對實驗室自制重組人B2M標準品進行了質(zhì)量檢測,結(jié)果顯示,該方法處理簡單,準確度高,穩(wěn)定性好,且不受溶液中B2M二聚體的干擾,適用于B2M標準品的質(zhì)量分析。

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 實驗部分
    1.1 儀器、試劑與材料
    1.2 單體B2M和二聚體B2M的制備
    1.3 標準蛋白質(zhì)溶液的配制
    1.4 色譜條件
    1.5 凝膠過濾液相色譜對B2M的定性分析
    1.6 B2M單體定量檢測方法的建立
        1.6.1 B2M標準曲線的線性范圍及定量限
        1.6.2 檢測方法的精密度及穩(wěn)定性
        1.6.3 凝膠過濾液相色譜法與免疫比濁試劑盒分析B2M樣品的優(yōu)勢比較
2 結(jié)果與討論
    2.1 單體B2M和二聚體B2M的制備及檢測
    2.2 凝膠過濾液相色譜對B2M的定性分析結(jié)果
    2.3 方法學(xué)考察
        2.3.1 標準曲線的線性范圍及定量限
        2.3.2 精密度及穩(wěn)定性
        2.3.3 凝膠過濾液相色譜法與免疫比濁試劑盒分析B2M樣品的優(yōu)勢比較
3 結(jié)論



本文編號：4021442