目的:研究不同濃度雌二醇(estradiol,E2)對人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞(human amniotic mesenchymal stromal cells,HAMSCs)體外培養(yǎng)中增殖、凋亡的影響。方法:采用改良酶消化法提取HAMSCs,流式細(xì)胞學(xué)方法和免疫熒光法鑒定提取細(xì)胞。HAMSCs培養(yǎng)方法分為對照組和E2組(分別加入濃度為10-5、10-6、10-7、10-8 mol/L E2)。CCK-8檢測各組HAMSCs增殖情況;q RT-PCR檢測干細(xì)胞特異基因Oct-4和凋亡相關(guān)基因Bcl-2、Bax的表達(dá);Western blot檢測凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2、Bax的表達(dá)。結(jié)果:CCK-8檢測顯示各濃度E2組和對照組的HAMSCs增殖活性在1～6 d都隨時間的變化而變化(F時間=2 418.132,P時間=0.000);各濃度E2組在1～4 d的增殖率與對照組無明顯差異;4 d后,各濃度E2組的增殖率明顯高于對照組(F組別=246.601,P組別=0.000),各濃度組間無明顯差異。q RT-PCR檢測顯示10-6 mol/L E2組(1.00±0.10)的Oct-4 m RNA表達(dá)...

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圖1羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞原代培養(yǎng)及表面標(biāo)記物鑒定PE對照CD45-PE100101102103104100101102103104細(xì)151050細(xì)3020100

重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報2019年第44卷第3期（JournalofChongqingMedicalUniversity2019.Vol.44No.3）2.3qRT-PCR檢測Oct-4、Bcl-2、BaxmRNA表達(dá)含2%血清濃度的DMEM/F12培養(yǎng)基分別加入濃度為10-5、10-6....

圖2免疫熒光方法檢測羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞Vimentin、CK18表達(dá)情況

重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報2019年第44卷第3期（JournalofChongqingMedicalUniversity2019.Vol.44No.3）2.3qRT-PCR檢測Oct-4、Bcl-2、BaxmRNA表達(dá)含2%血清濃度的DMEM/F12培養(yǎng)基分別加入濃度為10-5、10-6....

圖4羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞不同濃度E作用下β-actin48kD對照組10-5mol/L10-6mol/L10-7mol/L10-8mol/L

對HAMSCs起促凋亡作用。E2濃度為10-6mol/L時對抗凋亡基因（Bcl-2）無顯著影響，而其他濃度（10-5、10-7、10-8mol/L）都下調(diào)抗凋亡基因（Bcl-2），從蛋白水平也可看出E2濃度在10-6mol/L時對凋亡蛋白的影響最小，這可能是E2在此濃度時對維持H....

本文編號：4027526