目的原核表達細粒棘球絳蟲（Echinococcus granulosus,Eg）谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶（Glutathione S-Transferase,GST）蛋白,分析其結(jié)構(gòu)與功能特點。方法將EgGST基因亞克隆于PET-28b表達載體,轉(zhuǎn)化至大腸埃希菌BL21中,用異丙基-β-D-硫代半乳糖苷誘導(dǎo)蛋白表達;蛋白經(jīng)Ni柱純化后,用SDS-PAGE及Western-blot進行鑒定;并運用DNAstar軟件及在線軟件預(yù)測分析其結(jié)構(gòu)與功能特點。結(jié)果重組EgGST蛋白以可溶性形式在大腸埃希菌中高效表達,其相對分子質(zhì)量為45 000;該蛋白潛在B細胞表位區(qū)域為aa 26～33,89～97,116～124,147～158,201～215;潛在T細胞表位區(qū)域為aa 12～20,122～120,79～87,61～69,29～37,62～70。結(jié)論成功獲得可溶性重組EgGST蛋白,該蛋白具有一定的免疫原性,具有成為細粒棘球蚴病疫苗分子潛力。 

【文章來源】：中國預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志. 2019,20(07)CSCD

【文章頁數(shù)】：4 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 試劑與儀器
    1.2 重組質(zhì)粒的構(gòu)建
    1.3 重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化、蛋白誘導(dǎo)表達及可溶性分析
    1.4 重組蛋白純化
    1.5 SDS-PAGE及Western blot分析
    1.6 二級結(jié)構(gòu)和三級結(jié)構(gòu)預(yù)測
    1.7 B細胞表位和T細胞表位預(yù)測
2 結(jié) 果
    2.1 重組EgGST蛋白的誘導(dǎo)表達、純化及鑒定
    2.2 EgGST二級結(jié)構(gòu)
    2.3 EgGST三級結(jié)構(gòu)
    2.4 EgGST的B細胞表位
        2.4.1 DNAstar軟件預(yù)測
        2.4.2 ABCpred網(wǎng)站預(yù)測
    2.5 EgGST的T細胞表位
3 討 論


【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3338557