巨自噬與分子伴侶介導(dǎo)的自噬在饑餓誘導(dǎo)的Raji細(xì)胞中相繼順序被激活
發(fā)布時(shí)間:2024-10-05 06:41
目的研究巨自噬與分子伴侶介導(dǎo)的自噬在饑餓誘導(dǎo)的Raji細(xì)胞中出現(xiàn)的先后順序及其機(jī)制。方法用激光共聚焦顯微鏡和熒光顯微鏡觀察MDC熒光染色后,Raji細(xì)胞內(nèi)自噬體的形成情況; Western blot檢測細(xì)胞LC3Ⅰ/Ⅱ、Beclin-1、Hsc70及Lamp-2a等蛋白的表達(dá)水平。結(jié)果在饑餓誘導(dǎo)的Raji細(xì)胞中,巨自噬與分子伴侶介導(dǎo)的自噬是相繼順序,而非同步被激活,巨自噬活性在饑餓誘導(dǎo)的最初幾小時(shí)快速升高并達(dá)到峰值,然后隨著饑餓時(shí)間的延長逐漸下降,而與巨自噬活性下降相伴隨的是分子伴侶介導(dǎo)的自噬活性逐漸增加。結(jié)論腫瘤細(xì)胞在饑餓誘導(dǎo)的不同階段通過不同的自噬方式應(yīng)對壓力刺激,巨自噬與分子伴侶介導(dǎo)的自噬之間此消彼長、協(xié)調(diào)補(bǔ)充的關(guān)系更有助于腫瘤細(xì)胞適應(yīng)內(nèi)外環(huán)境的變化,維持自身的生長與增殖。
【文章頁數(shù)】:4 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 細(xì)胞株
1.2 試劑
1.3 儀器
1.4 方法
1.4.1 細(xì)胞培養(yǎng)與處理
1.4.2 MDC熒光染色觀察自噬體
1.4.3 Western blot法檢測Beclin-1、LC3-Ⅰ/Ⅱ、Hsc70和Lamp-2a蛋白的表達(dá)
1.4.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
2.1 饑餓誘導(dǎo)不同時(shí)間Raji細(xì)胞巨自噬活性的改變
2.2 饑餓誘導(dǎo)不同時(shí)間巨自噬相關(guān)蛋白的表達(dá)水平
2.3 饑餓誘導(dǎo)不同時(shí)間細(xì)胞內(nèi)CMA相關(guān)蛋白的表達(dá)水平
3 討論
本文編號:4007659
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1 材料與方法
1.1 細(xì)胞株
1.2 試劑
1.3 儀器
1.4 方法
1.4.1 細(xì)胞培養(yǎng)與處理
1.4.2 MDC熒光染色觀察自噬體
1.4.3 Western blot法檢測Beclin-1、LC3-Ⅰ/Ⅱ、Hsc70和Lamp-2a蛋白的表達(dá)
1.4.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
2.1 饑餓誘導(dǎo)不同時(shí)間Raji細(xì)胞巨自噬活性的改變
2.2 饑餓誘導(dǎo)不同時(shí)間巨自噬相關(guān)蛋白的表達(dá)水平
2.3 饑餓誘導(dǎo)不同時(shí)間細(xì)胞內(nèi)CMA相關(guān)蛋白的表達(dá)水平
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