本文關(guān)鍵詞：膜周蛋白PICK1促進(jìn)細(xì)胞膜上P2Y6受體表達(dá)及小膠質(zhì)細(xì)胞的吞噬功能

  更多相關(guān)文章： 膜周蛋白PICK PY受體 小膠質(zhì)細(xì)胞 吞噬

【摘要】：膜周蛋白PICK1(protein interacting C-kinase-1)參與多種膜受體與膜上蛋白的運(yùn)輸并影響細(xì)胞的功能。本研究旨在探索小膠質(zhì)細(xì)胞PICK1與P2Y6受體之間的相互作用是否可改變P2Y6受體在細(xì)胞膜上的表達(dá),以及對(duì)小膠質(zhì)細(xì)胞吞噬功能的影響。采用小鼠腦內(nèi)皮層原代培養(yǎng)的小膠質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)揭示,與PICK1敲除小鼠比較,野生小鼠皮層小膠質(zhì)細(xì)胞內(nèi)存在PICK1-P2Y6受體相互作用。生物素化、密度梯度離心結(jié)合蛋白質(zhì)印跡實(shí)驗(yàn)證明,PICK1基因敲除小鼠的小膠質(zhì)細(xì)胞膜表面P2Y6受體表達(dá)水平降低。熒光膠珠吞噬實(shí)驗(yàn)結(jié)合免疫組織化學(xué)染色顯示,PICK1基因敲除小鼠的小膠質(zhì)細(xì)胞對(duì)UDP(刺激)引起的熒光膠珠吞噬作用減弱。蛋白質(zhì)印跡實(shí)驗(yàn)顯示,與野生型小鼠比較,PICK1基因敲除小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞中的Akt-308T磷酸化水平明顯降低;使用Akt抑制劑API-2能有效抑制Akt在小膠質(zhì)細(xì)胞內(nèi)的(磷酸化)激活及UDP刺激引起的吞噬作用。上述結(jié)果表明,敲除PICK1能下調(diào)小膠質(zhì)細(xì)胞膜上P2Y6受體的表達(dá),并降低小膠質(zhì)細(xì)胞的吞噬功能,且這一過(guò)程依賴(lài)Akt磷酸化修飾。總之,PICK1可促進(jìn)P2Y6受體在細(xì)胞膜上的表達(dá),是小膠質(zhì)細(xì)胞吞噬功能的重要調(diào)節(jié)子;敲除PICK1可下調(diào)P2Y6膜受體表達(dá),并降低小膠質(zhì)細(xì)胞的吞噬功能。這一結(jié)果可加深對(duì)小膠質(zhì)細(xì)胞的吞噬功能及機(jī)制的認(rèn)識(shí)。
【作者單位】： 嘉興學(xué)院醫(yī)學(xué)院微生物學(xué)與免疫學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】： 膜周蛋白PICK PY受體 小膠質(zhì)細(xì)胞 吞噬
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(No.81501043) 2014年浙江省教育廳一般科研項(xiàng)目(No.Y201431577)資助~~
【分類(lèi)號(hào)】：R392.12
【正文快照】： *聯(lián)系人Tel:0573-83643870;E-mail:zhujia0322@163.comReceived:November 26,2015;Revised:April 1,2016;Accepted:April 18,2016Supported by National Natural Science Foundation of China(No.81501043)and Project of Zhejiang Provincial Education Department(No.Y20143

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