本文關(guān)鍵詞：中國流行株C基因型HBV穩(wěn)定復(fù)制表達(dá)小鼠模型的建立

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【摘要】：目的構(gòu)建穩(wěn)定復(fù)制中國流行株C基因型HBV的小鼠模型。方法將攜帶1.3倍C基因型HBV基因組(adr血清型)的重組腺相關(guān)病毒r AAV8-1.3HBV-C轉(zhuǎn)導(dǎo)人肝癌細(xì)胞Hu H7,采用ELISA法評估HBV抗原(HBs Ag、HBe Ag)在肝癌細(xì)胞中的表達(dá)。篩選高表達(dá)的重組病毒,經(jīng)尾靜脈注射入6~8周齡C57BL/6小鼠體內(nèi),建立HBV-C復(fù)制小鼠模型(實(shí)驗(yàn)組,n=8);同時建立文獻(xiàn)已報道HBV-D復(fù)制小鼠模型(對照組,n=7,r AAV8-1.3HBV-D,ayw血清型)。動態(tài)監(jiān)測兩組小鼠血清(眼底靜脈叢采血)HBV DNA載量和HBs Ag、HBe Ag的抗原表達(dá)量;于第9周處死小鼠,HE染色觀察肝組織病理改變,免疫組化染色分析HBs Ag和HBc Ag的表達(dá)。結(jié)果重組病毒r AAV8-1.3HBV-C體外轉(zhuǎn)導(dǎo)人肝癌細(xì)胞Hu H7,72h后細(xì)胞上清中可檢測到HBs Ag和HBe Ag的表達(dá)。小鼠注射重組病毒后第2、3、5、7、9周,血清HBV DNA存在穩(wěn)定復(fù)制,血清HBe Ag表達(dá)水平較穩(wěn)定,但血清HBs Ag表達(dá)存在波動。兩組小鼠肝組織未見明顯的炎性細(xì)胞浸潤及組織結(jié)構(gòu)異常,但可檢測到HBs Ag和HBc Ag蛋白。結(jié)論利用高嗜肝性重組8型腺相關(guān)病毒載體攜帶1.3倍C基因型HBV基因組體內(nèi)轉(zhuǎn)導(dǎo)C57BL/6小鼠,成功地建立了穩(wěn)定復(fù)制并持續(xù)表達(dá)C基因型HBV的小鼠模型。
【作者單位】： 桂林醫(yī)學(xué)院研究生院;解放軍302醫(yī)院全軍傳染病研究所/臨床研究管理中心;五加和分子醫(yī)學(xué)研究所有限公司;
【關(guān)鍵詞】： 乙型肝炎病毒 基因型 模型 動物
【基金】：國家自然科學(xué)基金面上項目(81371852,81573676,81373136)~~
【分類號】：R-332;R512.62
【正文快照】： 乙型肝炎病毒(HBV)感染動物模型是研究HBV致病機(jī)制、篩選新型有效抗HBV藥物和治療方法的重要工具[1-2]。目前應(yīng)用于HBV研究的動物模型包括黑猩猩、樹，

本文編號：538610