本文關(guān)鍵詞：甲型流感病毒純化及病毒生物學(xué)特征分析，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的評價蔗糖密度梯度離心純化甲型流感病毒的方法,并對純化的病毒顆粒特征和免疫原性進(jìn)行分析。方法接種雞胚培養(yǎng)病毒,收獲尿囊液,超速離心濃縮,蔗糖密度梯度離心純化病毒,用血凝試驗、蛋白定量、透射電鏡和SDS-PAGE鑒定病毒顆粒。取病毒純化產(chǎn)物以0.03mg/只和0.005mg/只分組免疫小鼠,采集小鼠血清,利用血凝抑制試驗測定血清血凝抑制滴度。結(jié)果成功利用蔗糖密度梯度離心法純化出流感病毒,病毒原液經(jīng)純化后被分離成L、M、H三個病毒帶,其中M病毒帶的吸光度、蛋白濃度及血凝滴度最高,蛋白濃度可達(dá)1.2mg/mL,血凝滴度高達(dá)1×49。電鏡觀察顯示,L區(qū)帶為具有血凝活性的質(zhì)膜和結(jié)構(gòu)疏松的病毒組成,M區(qū)帶病毒顆粒呈球形、絲狀或棒狀。同時,有大量空心病毒顆粒存在。H區(qū)帶與M區(qū)帶類似,但未發(fā)現(xiàn)空心病毒顆粒。純化的病毒免疫小鼠后可產(chǎn)生具有較高血凝抑制活性的抗體。結(jié)論蔗糖密度梯度離心技術(shù)可用于流感病毒抗原的制備,且不影響病毒的免疫原性。因此,密度梯度離心法可為流感病毒的基礎(chǔ)研究及疫苗開發(fā)提供技術(shù)支持。
【作者單位】： 陜西省人民醫(yī)院中心實驗室;西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)部第三附屬醫(yī)院;陜西省疾病預(yù)防控制中心病毒所;
【關(guān)鍵詞】： 甲型流感病毒 蔗糖密度梯度超速離心 免疫原性
【基金】：國家科技重大專項傳染病監(jiān)測技術(shù)平臺項目(No.2013ZX10004202);國家科技重大專項(No.2014ZX10004002-002-005)~~
【分類號】：R373.13
【正文快照】： 甲型流感病毒屬于正黏病毒科,流感病毒屬,是引起急性呼吸道感染的病原體。疫苗接種是預(yù)防流感的有效途徑[1]。目前在流感病毒抗原或疫苗制備中,主要通過層析與密度梯度離心法制備[2],近來也有基因重組構(gòu)建病毒樣顆粒獲取抗原[3]。本研究用傳統(tǒng)的蔗糖密度梯度離心法純化流感病

【相似文獻(xiàn)】

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本文編號：410209