目的:將DoE應(yīng)用于IGF-IR重組scFv的純化優(yōu)化,建立最優(yōu)純化條件,得到純度高、收率高的最終產(chǎn)物。方法:本研究采用DoE方法對大腸桿菌中表達(dá)的1型胰島素樣生長因子受體（IGF-1R）進(jìn)行重組單鏈可變片段（scFv）的優(yōu)化純化。結(jié)果:最終得到純度為98%的scFv。最后通過20倍放大實(shí)驗(yàn)對優(yōu)化條件進(jìn)行了驗(yàn)證。結(jié)論:我們提出,這里描述的DoE方法也適用于生產(chǎn)其他重組抗體結(jié)構(gòu)。 

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【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 化學(xué)藥、色譜介質(zhì)和設(shè)備
    1.2 重組scFv對IGF-IR的表達(dá)及小尺度DoE凈化優(yōu)化
    1.3 在放大實(shí)驗(yàn)中對優(yōu)化條件進(jìn)行了驗(yàn)證
    1.4 分析方法
2 結(jié)果
    2.1 scFv在大腸桿菌中對IGF-IR的可溶性表達(dá)
    2.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)在捕獲步驟中使用Capto L親和力色譜法
    2.3 凝膠過濾及成品純度測定
    2.4 驗(yàn)證最佳凈化條件
3討論



本文編號：3721807