發(fā)布時間：2022-01-07 05:33

　　目的觀察大鼠脂肪間充質(zhì)干細胞（ADMSCs）對大鼠卵巢自體移植的作用。方法 8周齡SD大鼠分為4組:正常對照組、自體移植組、自體移植+ADMSCs組及去勢組,在自體移植后28d,行卵巢組織HE染色卵泡計數(shù),用免疫組化觀察血管生成情況,用TUNEL熒光染色技術(shù)進行細胞凋亡計數(shù),ELISA測定血清FSH、AMH水平。結(jié)果自體移植+ADMSCs組總卵泡數(shù)、原始卵泡數(shù)均顯著高于自體移植組（P<0.05）。自體移植+ADMSCs組細胞凋亡計數(shù)顯著低于自體移植組（P<0.05）。與自體移植組相比,自體移植+ADMSCs組大鼠血清FSH水平更低,AMH水平更高（P<0.05）。自體移植+ADMSCs組CD31陽性細胞分布與正常對照組更接近。結(jié)論在大鼠卵巢自體移植過程中應(yīng)用ADMSCs可改善大鼠卵巢自體移植效果,提高移植效率。 

【文章來源】：生殖醫(yī)學雜志. 2020,29(02)

【文章頁數(shù)】：6 頁

【圖文】：

各組卵巢HE染色

4．卵巢組織HE染色：術(shù)后28d，自體移植組、自體移植+ADMSCs組大鼠麻醉后取出移植卵巢組織，正常對照組大鼠取出雙側(cè)卵巢組織后，取2mm×1mm×1mm大小，多聚甲醛固定，石蠟包埋，連續(xù)切片，切片厚度3～4μm，每個卵巢組織取第5張切片進行HE染色，卵泡計數(shù)。并對卵泡種類及形態(tài)進行分類，分類標準如下：原始卵泡：指單層扁平或扁平與立方混合的顆粒細胞包繞卵母細胞；細胞；次級卵泡：指兩層或以上立方型顆粒細胞包繞卵母細胞；竇狀卵泡指兩層以上的顆粒細胞，卵泡內(nèi)有竇腔形成；形態(tài)正常的卵泡：圓形或橢圓形卵泡形態(tài)，顆粒細胞分布均勻，卵母細胞或顆粒細胞未見濃縮核；形態(tài)異常的卵泡：卵泡失去圓形或橢圓形結(jié)構(gòu)，卵母細胞形態(tài)不規(guī)則，核固縮，顆粒細胞排列紊亂、缺失明顯或出現(xiàn)核固縮。為了避免重復(fù)計數(shù)，只有卵母細胞核可見的卵泡被計數(shù)在內(nèi)。5.TUNEL熒光染色評價細胞凋亡率：卵巢移植后28d，應(yīng)用TUNEL熒光染色技術(shù)，根據(jù)試劑盒（Roche，瑞士）說明書，計算石蠟包埋切片中的DNA損傷率。取各卵巢組織，連續(xù)切片，取第4張切片行TUNEL熒光染色，按照試劑盒說明進行檢測。熒光顯微鏡下正常細胞核呈藍色，凋亡細胞核呈綠色。利用Image Por-plus 6.0圖像分析軟件計算陽性細胞百分比，即凋亡指數(shù)（AI）。

ADMSCs鑒定

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Immunomodulatory effects of mesenchymal stem cells derived from adipose tissues in a rat orthotopic liver transplantation model[J]. Chi-Dan Wan, Rui Cheng, Hong-Bo Wang and Tao LiuDepartment of General Surgery, Union Hospital, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, Wuhan 430022, China.  Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International. 2008(01)



本文編號：3573916