銅綠假單胞菌外膜蛋白F及B型鞭毛蛋白與VP22融合DNA疫苗體液免疫效應的研究
本文關鍵詞:銅綠假單胞菌外膜蛋白F及B型鞭毛蛋白與VP22融合DNA疫苗體液免疫效應的研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的:評價I型單純皰疹病毒(herpes simplex virus 1,HSV-1)間層蛋白VP22能否增強銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginosa,Pa)外膜蛋白F(the outer membrane protein F,Opr F)與B型鞭毛蛋白(type B flagellins,Fla B)體液免疫效力,為進一步研究VP22分子與Pa抗原分子融合的DNA疫苗奠定基礎。方法:1.提取DNA疫苗p VAX1-Opr F、p VAX1-VP22-Opr F、p VAX1-Opr F-VP22、p VAX1-Fla B、p VAX1-Fla B-VP22、p VAX1-VP22;2.用體內(nèi)轉(zhuǎn)染試劑介導將疫苗肌肉注射BALB/c小鼠,免疫三次后制備小鼠抗血清;3.通過Western blot檢測抗血清與抗原蛋白結(jié)合的特異性;4.間接Elisa檢測抗血清效價,用方差分析/t檢驗的統(tǒng)計學方法分析抗血清效價的組間差異。結(jié)果:1.Western blot結(jié)果顯示p VAX1-Opr F、p VAX1-VP22-Opr F、p VAX1-Opr F-VP22免疫組小鼠抗血清均能特異性結(jié)合Opr F;p VAX1-Fla B和p VAX1-Fla B-VP22免疫組小鼠抗血清均能特異性結(jié)合Fla B。2.間接Elisa結(jié)果表明p VAX1-Opr F-VP22組抗體Ig G效價顯著高于p VAX1-Opr F和p VAX1-VP22-Opr F組(P0.05),而p VAX1-Opr F組和p VAX1-VP22-Opr F組之間無顯著差異(P0.05);p VAX1-Fla B-VP22組抗血清Ig G效價水平顯著高于p VAX1-Fla B組(P0.05)。結(jié)論:單表達抗原(Opr F與Fla B)的DNA疫苗以及抗原與VP22融合表達的DNA疫苗均能在小鼠體內(nèi)誘導特異性體液免疫反應;抗原(Opr F與Fla B)與VP22分子N-端融合表達能顯著增強DNA疫苗的體液免疫效力。
【關鍵詞】:銅綠假單胞菌 DNA疫苗 外膜蛋白F 鞭毛蛋白 VP22 體液免疫
【學位授予單位】:川北醫(yī)學院
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:R392
【目錄】:
- 致謝4-5
- 摘要5-7
- 英文摘要7-11
- 前言11-16
- 第一部分 銅綠假單胞菌外膜蛋白F與VP22 融合DNA疫苗體液免疫效應的研究16-29
- 實驗材料16-18
- 實驗方法18-25
- 實驗結(jié)果與分析25-29
- 第二部分 銅綠假單胞菌B型鞭毛蛋白與VP22 融合DNA疫苗體液免疫效應的研究29-34
- 實驗材料29-30
- 實驗方法30-32
- 實驗結(jié)果與分析32-34
- 討論34-38
- 結(jié)論38-39
- 參考文獻39-44
- 綜述:DNA疫苗研究現(xiàn)狀44-53
- 參考文獻50-53
- 附錄53-58
- 個人簡歷58
【參考文獻】
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本文編號:355024
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