本文關(guān)鍵詞：星形膠質(zhì)細(xì)胞異質(zhì)性對(duì)其神經(jīng)元轉(zhuǎn)分化的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：星形膠質(zhì)細(xì)胞是哺乳動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)內(nèi)含量最豐富的細(xì)胞類型,廣泛參與各種中樞神經(jīng)生理及病理過程,如調(diào)節(jié)腦血流量、協(xié)助神經(jīng)突觸傳遞、參與構(gòu)成血腦屏障,通過縫隙連接結(jié)構(gòu),釋放和攝取多種信號(hào)物質(zhì)等,并且在病理?xiàng)l件刺激下星形膠質(zhì)細(xì)胞通過自身活化及增殖包裹和局限病灶區(qū)域,阻止病灶的進(jìn)一步蔓延,對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病損傷的修復(fù)起到重要作用。星形膠質(zhì)細(xì)胞在發(fā)現(xiàn)之初被認(rèn)為是一類同質(zhì)性的細(xì)胞,僅僅通過形態(tài)上的差異將其區(qū)分為纖維型星形膠質(zhì)細(xì)胞和原漿型星形膠質(zhì)細(xì)胞。而隨著對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞研究的不斷深入,目前普遍認(rèn)為星形膠質(zhì)細(xì)胞在發(fā)育起源、基因表達(dá)、生物功能等方面都存在明顯的細(xì)胞異質(zhì)性,同時(shí)在不同的病理?xiàng)l件刺激下星形膠質(zhì)細(xì)胞也展現(xiàn)出不同的活化應(yīng)激反應(yīng),在多種疾病進(jìn)程中扮演著異質(zhì)性的角色。由于神經(jīng)元具有無法再生和增殖的特性,而病灶區(qū)周圍星形膠質(zhì)細(xì)胞的過度活化也不利于神經(jīng)軸索的再生和連接,這些都成為治療中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病和損傷的主要障礙。近年來,隨著基因重編程技術(shù)和再生醫(yī)學(xué)的發(fā)展,將星形膠質(zhì)細(xì)胞,特別是過度活化的反應(yīng)性星形膠質(zhì)細(xì)胞直接轉(zhuǎn)分化為神經(jīng)元逐漸成為治療中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病或損傷的一種新策略。目前在體外和體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中人們已經(jīng)利用多種轉(zhuǎn)錄因子及小分子化合物成功誘導(dǎo)星形膠質(zhì)細(xì)胞直接轉(zhuǎn)分化為不同類型的成熟神經(jīng)元。然而,在哺乳動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi),由星形膠質(zhì)細(xì)胞誘導(dǎo)轉(zhuǎn)分化為神經(jīng)元的效率仍然比較低,且大腦、脊髓等不同部位的星形膠質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)分化為神經(jīng)元的效率也存在明顯差異。究其原因,除了星形膠質(zhì)細(xì)胞所處不同外在微環(huán)境的影響之外,與星形膠質(zhì)細(xì)胞本身的內(nèi)在異質(zhì)性是否有關(guān),目前還不清楚。在本研究中,我們?cè)隗w外培養(yǎng)新生或成年小鼠皮層、小腦和脊髓等不同部位來源的星形膠質(zhì)細(xì)胞,并用轉(zhuǎn)錄分子NGN2或ASCL1通過基因重編程誘導(dǎo)轉(zhuǎn)分化為神經(jīng)元。結(jié)果發(fā)現(xiàn),不同來源的星形膠質(zhì)細(xì)胞在體外直接誘導(dǎo)轉(zhuǎn)分化為神經(jīng)元的效率存在顯著差異,而且這種差異的產(chǎn)生與所用不同轉(zhuǎn)錄因子沒有關(guān)系。通過對(duì)胚胎發(fā)育過程中與神經(jīng)元特化或基因重編程過程中與神經(jīng)元轉(zhuǎn)分化密切相關(guān)的一系列關(guān)鍵分子進(jìn)行分析,我們發(fā)現(xiàn),Notch1通路信號(hào)分子在不同來源星形膠質(zhì)細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)情況與其轉(zhuǎn)分化為神經(jīng)元的過程密切相關(guān)。我們進(jìn)一步利用γ-分泌酶抑制劑DAPT或慢病毒RNA干擾阻斷Notch1信號(hào)通路,結(jié)果顯示與對(duì)照組相比,Notch1信號(hào)通路阻斷組的星形膠質(zhì)細(xì)胞向神經(jīng)元轉(zhuǎn)分化的效率明顯提高。上述研究結(jié)果表明,星形膠質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)分化為神經(jīng)元的效率受其細(xì)胞異質(zhì)性影響,該作用是由星形膠質(zhì)細(xì)胞內(nèi)Notch1信號(hào)通路所介導(dǎo)。這些研究有助于我們?cè)谖磥砀玫乩没蛑鼐幊碳夹g(shù)將星形膠質(zhì)細(xì)胞誘導(dǎo)轉(zhuǎn)分化為神經(jīng)元,從而促進(jìn)其在中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病或損傷治療中的應(yīng)用。
【關(guān)鍵詞】：星形膠質(zhì)細(xì)胞 細(xì)胞異質(zhì)性 基因重編程 細(xì)胞轉(zhuǎn)分化 神經(jīng)元 Notch1信號(hào)通路
【學(xué)位授予單位】：第二軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R338
【目錄】：

• 摘要6-8
• Abstract8-10
• 縮寫詞匯10-12
• 前言12-15
• 材料與方法15-21
• 一、星形膠質(zhì)細(xì)胞的原代培養(yǎng)15-16
• 二、NGN2或ASCL1質(zhì)粒構(gòu)建和慢病毒包裝16
• 三、星形膠質(zhì)細(xì)胞向神經(jīng)元直接轉(zhuǎn)分化16
• 四、Notch1通路抑制試驗(yàn)16-17
• 五、免疫熒光染色17-18
• 六、Brd U標(biāo)記的細(xì)胞增殖試驗(yàn)18-19
• 七、RNA抽提和實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)19
• 八、蛋白印跡試驗(yàn)19
• 九、計(jì)數(shù)與統(tǒng)計(jì)分析19-21
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果21-42
• 一、小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞的體外培養(yǎng)與鑒定21-25
• 二、星形膠質(zhì)細(xì)胞在基因表達(dá)及增殖能力方面具有異質(zhì)性25-27
• 三、不同來源星形膠質(zhì)細(xì)胞直接轉(zhuǎn)分化為神經(jīng)元的效率存在差異27-34
• 四、Notch1信號(hào)通路在不同來源星形膠質(zhì)細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)水平存在差異34-36
• 五、抑制星形膠質(zhì)細(xì)胞內(nèi)Notch1信號(hào)通路可提高其向神經(jīng)元直接轉(zhuǎn)分化的效率36-42
• 討論42-44
• 參考文獻(xiàn)44-48
• 文獻(xiàn)綜述 星形膠質(zhì)細(xì)胞在中樞神經(jīng)系統(tǒng)病理進(jìn)程中的異質(zhì)性48-69
• 參考文獻(xiàn)57-69
• 在讀期間發(fā)表的文章和參加科研工作情況69-70
• 致謝70-71

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中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 沈維高;何欣;王振江;;星形膠質(zhì)細(xì)胞的生物學(xué)功能及其與疾病的關(guān)系研究進(jìn)展[J];北華大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2008年06期

2 石軍,張可成,蔡文琴;大鼠腦皮質(zhì)星形膠質(zhì)細(xì)胞的限制性細(xì)胞培養(yǎng)[J];中國組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)雜志;2000年02期

3 莫永炎,姜勇,陳瑗;腦星形膠質(zhì)細(xì)胞生物學(xué)功能研究進(jìn)展[J];生理科學(xué)進(jìn)展;2002年01期

4 朱潔 ,蔡文琴;成年哺乳動(dòng)物海馬中的星形膠質(zhì)細(xì)胞可生成新的神經(jīng)元[J];生理科學(xué)進(jìn)展;2002年01期

5 姚君茹,潘三強(qiáng),呂來清;星形膠質(zhì)細(xì)胞的可塑性[J];解剖學(xué)研究;2002年01期

6 李卉麗,秦綠葉,萬有,韓濟(jì)生,于常海;疼痛研究的新亮點(diǎn):星形膠質(zhì)細(xì)胞[J];生理科學(xué)進(jìn)展;2003年01期

7 陳yN招,徐如祥,徐宗俊,楊志林,姜曉丹;星形膠質(zhì)細(xì)胞可以誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞系緊密連接的形成[J];細(xì)胞生物學(xué)雜志;2003年05期

8 陳青;劉傳勇;;星形膠質(zhì)細(xì)胞的活化機(jī)制及功能研究[J];泰山醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2006年01期

9 郭進(jìn);何建平;安書成;;星形膠質(zhì)細(xì)胞釋放谷氨酸的途徑及其調(diào)控機(jī)制[J];陜西師范大學(xué)繼續(xù)教育學(xué)報(bào);2006年03期

10 于常海;趙睿;;承載期望的“星”:星形膠質(zhì)細(xì)胞[J];科學(xué);2007年06期

中國重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉慶瑩;趙珠峰;朱長庚;;星形膠質(zhì)細(xì)胞在癲癇復(fù)發(fā)中的作用[A];解剖學(xué)雜志——中國解剖學(xué)會(huì)2002年年會(huì)文摘匯編[C];2002年

2 唐愛輝;王同飛;王世強(qiáng);;星形膠質(zhì)細(xì)胞鈣活動(dòng):腦細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)中的第二興奮系統(tǒng)?[A];中國神經(jīng)科學(xué)學(xué)會(huì)第六屆學(xué)術(shù)會(huì)議暨學(xué)會(huì)成立十周年慶祝大會(huì)論文摘要匯編[C];2005年

3 池美珠;陳超;錢燕;李劍敏;吳步猛;;產(chǎn)前重復(fù)激素治療對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞發(fā)育的影響[A];浙江省圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2005年

4 魏爾清;;半胱氨酰白三烯受體對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞功能的調(diào)節(jié)作用[A];中國藥理學(xué)會(huì)第九次全國會(huì)員代表大會(huì)暨全國藥理學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2007年

5 吳建云;王鮮忠;王劍;諶劍波;范光麗;張家驊;;大腦皮質(zhì)星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)及鑒定[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)動(dòng)物解剖學(xué)及組織胚胎學(xué)分會(huì)第十五次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2008年

6 趙玉武;程曉娟;;星形膠質(zhì)細(xì)胞與腦水腫的形成[A];山東省2013年神經(jīng)內(nèi)科學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議暨中國神經(jīng)免疫大會(huì)2013論文匯編[C];2013年

7 董其平;柴真;;谷氨酸對(duì)培養(yǎng)的星形膠質(zhì)細(xì)胞的鈣活動(dòng)的影響[A];“基因、進(jìn)化與生理功能多樣性”海內(nèi)外學(xué)術(shù)研討會(huì)暨中國生理學(xué)會(huì)第七屆比較生理學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要[C];2009年

8 曾俊;李康生;;柯薩奇病毒感染星形膠質(zhì)細(xì)胞及細(xì)胞因子變化研究[A];新發(fā)和再發(fā)傳染病防治熱點(diǎn)研討會(huì)論文集[C];2010年

9 鮑歡;徐曉云;顧曉波;徐霞紅;胡暉;;缺氧后水通道蛋白4在體外培養(yǎng)星形膠質(zhì)細(xì)胞表達(dá)變化的實(shí)驗(yàn)研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十三次全國神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2010年

10 熊加祥;白云;宋敏;王艷艷;楊曉亞;;星形膠質(zhì)細(xì)胞表達(dá)免疫分子維持大腦免疫穩(wěn)態(tài)[A];中國神經(jīng)科學(xué)學(xué)會(huì)第六屆學(xué)術(shù)會(huì)議暨學(xué)會(huì)成立十周年慶祝大會(huì)論文摘要匯編[C];2005年

中國重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫 前7條

1 記者 胡德榮;星形膠質(zhì)細(xì)胞由“天使”變“魔鬼”原因找到[N];健康報(bào);2012年

2 記者 劉海英;星形膠質(zhì)細(xì)胞可調(diào)節(jié)呼吸強(qiáng)度[N];科技日?qǐng)?bào);2010年

3 劉霞;腦內(nèi)星形膠質(zhì)細(xì)胞在實(shí)驗(yàn)室培育成功[N];科技日?qǐng)?bào);2011年

4 汪敏華;大腦星形膠質(zhì)細(xì)胞有兩種新功能[N];解放日?qǐng)?bào);2003年

5 吳一福;黃芪可調(diào)節(jié)星形膠質(zhì)細(xì)胞“時(shí)間模式”[N];中國醫(yī)藥報(bào);2005年

6 南方日?qǐng)?bào)記者 曹斯　實(shí)習(xí)生 趙莞 張寧 通訊員 鄒瑩 張淼;用ATP對(duì)抗不快樂[N];南方日?qǐng)?bào);2013年

7 記者 班瑋;德國腦細(xì)胞再生研究取得新進(jìn)展[N];人民日?qǐng)?bào);2010年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 曾招;離子通道TRPM7調(diào)節(jié)細(xì)胞生理的分子機(jī)制研究[D];蘇州大學(xué);2014年

2 黃維一;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞旁分泌因子對(duì)缺血性腦卒中后星形膠質(zhì)細(xì)胞活性及功能的影響[D];南方醫(yī)科大學(xué);2015年

3 楊俊華;星形膠質(zhì)細(xì)胞來源的ATP促進(jìn)丘腦中的突觸刪除[D];浙江大學(xué);2015年

4 鄧雅婷;龍膽苦苷鎮(zhèn)痛與抗抑郁的中樞作用及機(jī)制研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2015年

5 李新;星形膠質(zhì)細(xì)胞NDRG2在七氟烷預(yù)處理神經(jīng)保護(hù)作用中的機(jī)制研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2015年

6 鐘志宏;亞鐵離子對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞的損傷作用及香芹酚在實(shí)驗(yàn)性腦出血中的神經(jīng)保護(hù)作用[D];上海交通大學(xué);2014年

7 張建成;星形膠質(zhì)細(xì)胞來源的IL-17A對(duì)缺血性腦卒中神經(jīng)再生和功能恢復(fù)的影響及機(jī)制研究[D];華中科技大學(xué);2015年

8 洪洋;孕酮對(duì)Aβ所致星形膠質(zhì)細(xì)胞炎癥反應(yīng)的調(diào)節(jié)作用及機(jī)制研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2016年

9 凌云志;帕瑞昔布減輕過氧化氫誘導(dǎo)的大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷的作用及機(jī)制研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2015年

10 徐進(jìn);腦出血后星形膠質(zhì)細(xì)胞AQP4內(nèi)化及其機(jī)制的研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2015年

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1 張麗麗;脂肪基質(zhì)細(xì)胞誘導(dǎo)分化為星形膠質(zhì)細(xì)胞過程中線粒體凋亡與自噬的關(guān)系[D];河北聯(lián)合大學(xué);2014年

2 劉峻崎;三種中藥有效成分調(diào)控中風(fēng)后星形膠質(zhì)細(xì)胞的作用及其機(jī)制[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2016年

3 黃夢(mèng)之;星形膠質(zhì)細(xì)胞對(duì)內(nèi)側(cè)膝狀體神經(jīng)元聽反應(yīng)電活動(dòng)的影響[D];杭州師范大學(xué);2016年

4 楊茜;TRIF信號(hào)在原代星形膠質(zhì)細(xì)胞炎癥因子釋放中的作用及機(jī)制[D];成都醫(yī)學(xué)院;2016年

5 吳思思;全麻藥物對(duì)大鼠外側(cè)前額葉皮層星形膠質(zhì)細(xì)胞突觸調(diào)控的影響[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2016年

6 謝禮瑋;全麻藥物對(duì)培養(yǎng)大鼠皮層星形膠質(zhì)細(xì)胞興奮性和遞質(zhì)釋放的影響[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2016年

7 何雯;小花棘豆中苦馬豆素對(duì)羊的毒性作用及大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞影響的研究[D];塔里木大學(xué);2016年

8 裴海霞;TREK-1過表達(dá)與脈絡(luò)寧注射液對(duì)氧糖剝奪星形膠質(zhì)細(xì)胞及其谷氨酸代謝的作用[D];蘭州大學(xué);2016年

9 古玉梅;淫羊藿苷對(duì)實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎（EAE）小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞及軸突的影響[D];廣東藥科大學(xué);2016年

10 李良娟;MAPK-COX路徑在GnRH調(diào)節(jié)星形膠質(zhì)細(xì)胞PGE2表達(dá)中的作用[D];西南大學(xué);2016年

  本文關(guān)鍵詞：星形膠質(zhì)細(xì)胞異質(zhì)性對(duì)其神經(jīng)元轉(zhuǎn)分化的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：353649