目的研究一氧化氮（nitric oxide,NO）對T細(xì)胞和單核細(xì)胞分泌細(xì)胞因子的作用及機制。方法用抗人CD3抗體或抗人CD3抗體聯(lián)合抗人CD28抗體或LPS刺激培養(yǎng)外周血單個核細(xì)胞（PBMCs）、純化T細(xì)胞或純化單核細(xì)胞,加或不加一氧化氮培養(yǎng),ELISA檢測培養(yǎng)細(xì)胞上清液中細(xì)胞因子的含量;流式細(xì)胞術(shù)檢測T細(xì)胞表面活化分子CD69和CD25的表達、T-box轉(zhuǎn)錄因子（T-bet）的表達,STAT1和STAT4的磷酸化程度以及T細(xì)胞的分裂情況。結(jié)果一氧化氮呈時間和劑量依賴方式抑制T細(xì)胞產(chǎn)生IFN-γ、TNF-α和IL-2,但促進單核細(xì)胞IL-1β、IL-6和TNF-α的分泌,且不誘導(dǎo)細(xì)胞的凋亡。進一步研究發(fā)現(xiàn)其抑制細(xì)胞晚期活化分子的表達和細(xì)胞的分裂,以及抑制T細(xì)胞相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子T-bet的表達,但不抑制STAT1和STAT4的磷酸化程度。結(jié)論一氧化氮通過非細(xì)胞毒性作用抑制活化的T細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞因子,但促進活化的單核細(xì)胞的細(xì)胞因子的分泌,其機制是通過抑制轉(zhuǎn)錄因子T-bet信號通路而抑制T細(xì)胞細(xì)胞因子的分泌,該研究將為臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。 

【文章來源】：免疫學(xué)雜志. 2019,35(12)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：9 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 實驗材料
    1.2 PBMCs分離、培養(yǎng)和淋巴細(xì)胞純化
    1.3 ELISA
    1.4 ELISPOT
    1.5流式細(xì)胞術(shù)
    1.6 CFSE染色法檢測T細(xì)胞的分裂
    1.7 AnnexinⅤ-FITC/PI試劑盒檢測外周血中細(xì)胞凋亡
    1.8 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 一氧化氮呈濃度和時間依賴抑制人PBMCs的IFN-γ、TNF-α和IL-2分泌
    2.2 一氧化氮對人PBMCs的凋亡無促進作用
    2.3 一氧化氮抑制PBMCs產(chǎn)生細(xì)胞因子的半最大效應(yīng)濃度（EC50)
    2.4一氧化氮抑制T細(xì)胞的細(xì)胞因子，但促進單核細(xì)胞的細(xì)胞因子產(chǎn)生
    2.5 一氧化氮抑制T細(xì)胞相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子T-bet的表達
    2.6 一氧化氮抑制純化T細(xì)胞CD25但對CD69的表達無影響
    2.7一氧化氮抑制CD4+和CD8+T細(xì)胞的分裂
3 討論



本文編號：3467336