本文關(guān)鍵詞：手術(shù)減壓對(duì)大鼠脊髓撞擊并壓迫模型的神經(jīng)細(xì)胞自噬與凋亡影響的實(shí)驗(yàn)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:觀(guān)察手術(shù)減壓對(duì)大鼠脊髓撞擊并壓迫模型的脊髓組織細(xì)胞自噬與凋亡的影響,探討手術(shù)減壓促進(jìn)脊髓功能恢復(fù)的機(jī)制。方法:清潔級(jí)Sprague-Dawley大鼠72只,體重250~300g,按隨機(jī)數(shù)字表法分為持續(xù)壓迫組(n=24)、手術(shù)減壓組(n=24)、假手術(shù)組(n=24)。采用Allen’s法+自制壓迫件置入椎管造成脊髓急性損傷合并椎管內(nèi)占位,各組分別在造模后8h、24h、3d、7d取材。采用BBB評(píng)分法評(píng)估大鼠后肢運(yùn)動(dòng)功能變化,RTFQ-PCR檢測(cè)樣本Beclin-1 mRNA和Bcl-2 mRNA表達(dá),免疫熒光法檢測(cè)自噬相關(guān)蛋白LC3的表達(dá),活性檢測(cè)試劑盒測(cè)定半胱氨酰天冬氨酸特異性蛋白酶-3(Caspase-3)的活性。結(jié)果:1、BBB評(píng)分:持續(xù)壓迫組和手術(shù)減壓組SD大鼠脊髓損傷后3d始見(jiàn)下肢活動(dòng),兩組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;造模后7d手術(shù)減壓組大鼠BBB評(píng)分高于持續(xù)壓迫組(P0.05);假手術(shù)組大鼠BBB評(píng)分在術(shù)后8h、24h、3d、7d相互間比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。2、熒光定量PCR結(jié)果2.1在各個(gè)時(shí)間點(diǎn),持續(xù)壓迫組和手術(shù)減壓組大鼠脊髓組織Beclin-1mRNA表達(dá)水平均較假手術(shù)組升高(P0.05),持續(xù)壓迫組高于手術(shù)減壓組(P0.05)。2.2損傷后24h、3d、7d,手術(shù)減壓組大鼠脊髓組織Bcl-2mRNA表達(dá)水平高于持續(xù)壓迫組(P0.05)。3、免疫熒光染色:熒光顯微鏡下觀(guān)察到LC3在持續(xù)壓迫組和手術(shù)減壓組神經(jīng)細(xì)胞中均有較高表達(dá)。在各對(duì)應(yīng)時(shí)間點(diǎn),手術(shù)減壓組LC3陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)低于持續(xù)壓迫組(P0.05)。4、Caspase-3活性檢測(cè)結(jié)果:手術(shù)減壓組Casepase-3活性在損傷后8h、24h、3d、7d較持續(xù)壓迫組均降低(P0.05)。結(jié)論:1、脊髓損傷后,自噬在神經(jīng)細(xì)胞中的表達(dá)升高,手術(shù)減壓可以使脊髓損傷后細(xì)胞自噬的表達(dá)下降。2、脊髓損傷后,凋亡在神經(jīng)細(xì)胞中的表達(dá)增強(qiáng),手術(shù)減壓降低脊髓損傷后細(xì)胞凋亡的表達(dá)。3、手術(shù)減壓能夠促進(jìn)大鼠脊髓撞擊并壓迫模型神經(jīng)功能恢復(fù),可能與抑制細(xì)胞凋亡、降低細(xì)胞自噬表達(dá)有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：脊髓損傷 自噬 凋亡 減壓 大鼠
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R651.2;R-332
【目錄】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-9
• 中英文縮略詞表9-10
• 第1章 引言10-12
• 第2章 材料與方法12-20
• 2.1 材料12-14
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)手術(shù)器械12
• 2.1.2 主要試劑12
• 2.1.3 主要溶液的配制12-13
• 2.1.4 實(shí)驗(yàn)儀器13-14
• 2.2 方法14-19
• 2.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組14
• 2.2.2 動(dòng)物模型的制作14-15
• 2.2.3 術(shù)后處理15
• 2.2.4 BBB評(píng)分15-16
• 2.2.5 樣本采集16-17
• 2.2.6 RTFQ-PCR17
• 2.2.7 免疫熒光染色17-18
• 2.2.8 Caspase-3活性檢測(cè)18-19
• 2.3 數(shù)據(jù)分析19-20
• 第3章 結(jié)果20-26
• 3.1 大鼠后肢運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分20-21
• 3.2 Beclin-1 mRNA表達(dá)水平21-22
• 3.3 Bcl-2 mRNA表達(dá)水平22-23
• 3.4 LC3免疫熒光染色23-24
• 3.5 Caspase-3活性檢測(cè)24-26
• 第4章 討論26-29
• 第5章 結(jié)論與展望29-30
• 5.1 結(jié)論29
• 5.2 展望29-30
• 致謝30-31
• 參考文獻(xiàn)31-35
• 附圖35-37
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果37-38
• 綜述 創(chuàng)傷性脊髓損傷的病理機(jī)制研究進(jìn)展38-45
• 參考文獻(xiàn)43-45

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本文編號(hào)：341628