新生鼠T細(xì)胞胸腺內(nèi)外凋亡動(dòng)態(tài)分析
本文關(guān)鍵詞:新生鼠T細(xì)胞胸腺內(nèi)外凋亡動(dòng)態(tài)分析,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的探究小鼠出生后胸腺細(xì)胞的動(dòng)態(tài)發(fā)育及胸腺細(xì)胞胸腺內(nèi)外凋亡的狀況,為進(jìn)一步闡明胸腺細(xì)胞胸腺內(nèi)外凋亡的真實(shí)狀況提供新的證據(jù)。方法以剛出生后1天、3天、7天、14天和28天的C57BL/6小鼠為細(xì)胞凋亡檢測(cè)對(duì)象:分別取胸腺、脾臟及血液制備細(xì)胞懸液;取出生后7、14天的C57BL/6小鼠的胸腺及脾臟器官,制備冰凍切片。懸浮細(xì)胞進(jìn)行以下處理:(1)胸腺細(xì)胞紫外照射及地塞米松誘導(dǎo)為陽(yáng)性對(duì)照組;(2)CD3抗體及Annexin V/7-AAD聯(lián)合染色;(3)F4/80抗體染色;(4)Annexin V-Alexa Fluor488/PI雙染;(5)提取細(xì)胞DNA。分別利用流式細(xì)胞術(shù)、熒光顯微鏡及瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)進(jìn)行細(xì)胞凋亡相關(guān)檢測(cè);胸腺及脾臟冰凍切片進(jìn)行TUNEL染色,利用熒光顯微鏡對(duì)凋亡細(xì)胞進(jìn)行原位觀察。結(jié)果在自然狀態(tài)下,小鼠胸腺細(xì)胞中CD3+T細(xì)胞百分率隨日齡增長(zhǎng)變化幅度不大,而外周免疫器官(脾臟)中CD3+T細(xì)胞含量顯著增加;小鼠胸腺細(xì)胞平均凋亡率約為1.6%,不同日齡間未見明顯差異;各時(shí)間點(diǎn)脾臟、血液中CD3+T細(xì)胞凋亡率及巨噬細(xì)胞比率均顯著高于胸腺。結(jié)論在自然狀態(tài)下幼齡小鼠胸腺功能已接近成熟穩(wěn)定,而外周免疫器官(脾臟)隨小鼠的年齡不斷發(fā)育變化;小鼠脾臟、血液中CD3+T細(xì)胞凋亡率顯著高于胸腺,提示除胸腺外,脾臟及血液可能為T細(xì)胞完全成熟前的凋亡部位。
【關(guān)鍵詞】:胸腺細(xì)胞 凋亡 流式細(xì)胞術(shù)
【學(xué)位授予單位】:遼寧醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R392.12
【目錄】:
- 中文論著摘要4-5
- 英文論著摘要5-7
- 英文縮略語(yǔ)表7-9
- 前言9-11
- 實(shí)驗(yàn)材料與方法11-16
- 實(shí)驗(yàn)結(jié)果16-25
- 討論25-28
- 結(jié)論28-29
- 本研究創(chuàng)新性的自我評(píng)價(jià)29-30
- 參考文獻(xiàn)30-32
- 附錄32-41
- 綜述32-38
- 參考文獻(xiàn)35-38
- 在學(xué)期間科研成績(jī)38-39
- 致謝39-40
- 個(gè)人簡(jiǎn)介40-41
【相似文獻(xiàn)】
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