本文關(guān)鍵詞：瑞舒伐他汀對(duì)UUO大鼠模型腎組織HO-1及TGF-β1，，α-SMA表達(dá)的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:腎間質(zhì)纖維化是幾乎所有慢性腎臟疾病發(fā)展至終末期腎臟病的共同通路。腎間質(zhì)纖維化是以腎小管基底膜的增厚、腎間質(zhì)成分增多及基質(zhì)沉積為主要表現(xiàn),其病理發(fā)展過程涉及炎癥反應(yīng)、氧化應(yīng)激、多種細(xì)胞因子及多種信號(hào)通路、細(xì)胞凋亡、成纖維細(xì)胞增殖和活化及上皮細(xì)胞向成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)分化等多因素作用。血紅素加氧酶(heme oxygenase,HO)是血紅素分解代謝過程中的起始酶和限速酶,以往的研究發(fā)現(xiàn),HO有三種同工酶,分別為HO-1、HO-2、HO-3,其中HO-1極易被誘導(dǎo)表達(dá)發(fā)揮多種生物學(xué)作用。HO-1存在于哺乳動(dòng)物(包括人)的多種組織細(xì)胞的微粒體中,正常情況下,在某些特定器官或組織微量表達(dá)或不表達(dá),以脾臟表達(dá)最高。在腎臟組織主要表達(dá)于皮質(zhì)腎單位的近端、遠(yuǎn)端小管、髓質(zhì)的集合管上皮細(xì)胞。過去已有大量研究表明,HO-1及血紅素分解代謝的膽綠素、CO、Fe2+均能起到抗炎、抗氧化應(yīng)激、抗細(xì)胞凋亡、調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖等保護(hù)作用,而腎間質(zhì)纖維化亦涉及炎癥、氧化應(yīng)激、細(xì)胞凋亡等多因素作用。這說明HO-1可能通過其生物學(xué)功能發(fā)揮抗腎間質(zhì)纖維化作用。國外研究表明,HO-1缺乏的動(dòng)物模型中,腎小管上皮細(xì)胞間充質(zhì)轉(zhuǎn)分化(epithelial myofibroblast transdifferentiation,EMT)的程度明顯增加,腎間質(zhì)纖維化明顯加重。而EMT時(shí)產(chǎn)生的肌成纖維細(xì)胞能夠表達(dá)α平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)。國內(nèi)研究表明,在單側(cè)輸尿管梗阻模型中,通過誘導(dǎo)HO-1表達(dá),能夠下調(diào)單核細(xì)胞趨化蛋白-1(monocyte chemotactic protein 1,MCP-1)及轉(zhuǎn)化生長因子β1(transforming growth factor,TGF-β1)的水平,延緩腎間質(zhì)纖維化的進(jìn)展。因此,誘導(dǎo)HO-1的高表達(dá)可能成為延緩腎間質(zhì)纖維化的一種方法。他汀類藥物具有降脂、降壓、抗增殖、穩(wěn)定斑塊等作用,已成為臨床上常用的心腦血管疾病治療藥物。研究表明,他汀類藥物能夠誘導(dǎo)HO-1高表達(dá)減輕腎臟缺血再灌注損傷。他汀類藥物在UUO中能否誘導(dǎo)HO-1而影響TGF-β1、α-SMA水平,減輕腎間質(zhì)纖維化,目前尚未有報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)擬通過建立單側(cè)輸尿管梗阻(unilateral urethral obstruction,UUO)大鼠腎間質(zhì)纖維化模型,應(yīng)用瑞舒伐他汀藥物干預(yù),結(jié)合HE染色、Masson染色、免疫組織化學(xué)染色等手段,觀察各個(gè)實(shí)驗(yàn)組HO-1、TGF-β1、α-SMA在不同時(shí)段的表達(dá),探討他汀類藥物抗腎間質(zhì)纖維化作用的新靶點(diǎn),為臨床上應(yīng)用他汀類藥物治療腎間質(zhì)纖維化提供新的理論依據(jù)。方法:選擇清潔級(jí)健康雄性SD大鼠54只,體重(180±20)克,經(jīng)適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后,隨機(jī)分成三組如下:1.假手術(shù)組(A組),2.單側(cè)輸尿管結(jié)扎組(B組),3.瑞舒伐他汀治療組(C組),每組各18只。手術(shù)前12小時(shí),大鼠開始禁食水。手術(shù)過程:A、B、C三組均麻醉、消毒后,行左側(cè)腹部縱行切口,逐層游離組織后,暴露左腎,找到左側(cè)輸尿管,A組僅游離左側(cè)輸尿管作為對(duì)照,B、C組游離左側(cè)輸尿管后于輸尿管中上1/3交界處結(jié)扎輸尿管并剪斷輸尿管,防止逆行感染。各組大鼠于手術(shù)前一天開始給藥,C組給予瑞舒伐他汀混懸液10mg/(Kg.d)劑量灌胃,A、B兩組均以等容的0.9%氯化鈉注射液灌胃。每天根據(jù)體重情況調(diào)整藥物用量。實(shí)驗(yàn)期間大鼠可自由進(jìn)食水。術(shù)后第3天、7天、14天,分別從A、B、C三組隨機(jī)選取各6只大鼠,手術(shù)取出左側(cè)梗阻腎組織,置入4%多聚甲醛液固定,石蠟包埋,切片。采用HE染色、Masson染色,光鏡下觀察各組大鼠腎組織病理變化,免疫組織化學(xué)方法測(cè)定HO-1、TGF-β1、α-SMA在腎組織的表達(dá)水平,應(yīng)用多功能真彩色細(xì)胞圖象分析管理系統(tǒng)進(jìn)行半定量分析。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,使用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±S)表示統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)結(jié)果,單因素方差分析數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,結(jié)果為P0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果:光鏡下各組HE染色:A組:未見明顯異常;B組:術(shù)后第3天腎小管間質(zhì)見少量炎癥細(xì)胞浸潤,部分腎小管輕度擴(kuò)張;術(shù)后第7天可見腎小管明顯擴(kuò)張,上皮細(xì)胞變性、壞死,腎間質(zhì)炎性細(xì)胞浸潤較前增加,腎間質(zhì)寬度明顯增加;術(shù)后第14天,可見較多腎小管萎縮,腎小管基底膜有彌漫性增厚、皺縮。C組:術(shù)后腎間質(zhì)及腎小管的表現(xiàn)與同時(shí)期的B組表現(xiàn)相同,隨梗阻時(shí)間延長病變逐漸加重,病變程度略輕于B組,但重于A組。Masson染色:A組:各時(shí)期均無明顯膠原纖維沉積。B、C組于術(shù)后第3天,出現(xiàn)腎小管輕度擴(kuò)張,腎間質(zhì)膠原纖維輕度增加;術(shù)后第7天及第14天,腎小管擴(kuò)張度較前增加,膠原纖維明顯增多,間質(zhì)纖維化程度較前增加;且隨梗阻時(shí)間延長纖維化程度進(jìn)行性加重,同一時(shí)相相比,C組間質(zhì)纖維化病變程度輕于B組,但明顯重于A組。免疫組化染色結(jié)果顯示:(1)HO-1表達(dá):A組:腎小球、腎小管幾乎無表達(dá);B組:腎小管上皮細(xì)胞表達(dá)增加,術(shù)后3天至表達(dá)高峰,之后隨梗阻時(shí)間延長,表達(dá)量漸下降,與同時(shí)相A組相比仍高于A組,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);C組:腎小管上皮細(xì)胞表達(dá)增加,與B組表達(dá)趨勢(shì)相同,3天時(shí)表達(dá)最高,隨梗阻時(shí)間延長,表達(dá)量進(jìn)行性下降,但比同時(shí)相B組表達(dá)量高,與B組同時(shí)相相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),與A組同時(shí)相相比表達(dá)量高,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。(2)TGF-β1表達(dá):A組:在腎小管上皮細(xì)胞有少量表達(dá);B組:腎小管上皮細(xì)胞可見表達(dá),且隨著梗阻時(shí)間延長,表達(dá)呈進(jìn)行性增加,與A組同時(shí)相相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);C組:腎小管上皮細(xì)胞表達(dá)與B組表達(dá)趨勢(shì)相同,但與同時(shí)相B組表達(dá)相比較均有顯著下降,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),與A組同時(shí)相相比明顯升高,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。(3)α-SMA表達(dá):A組:腎小管上皮細(xì)胞及腎間質(zhì)幾乎無表達(dá);B組:腎小管上皮細(xì)胞可見表達(dá),腎間質(zhì)少量表達(dá),且隨梗阻時(shí)間延長呈進(jìn)行性增加,與同時(shí)相A組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);C組:腎小管上皮細(xì)胞及間質(zhì)少量表達(dá),與B組表達(dá)趨勢(shì)相同,但比同時(shí)相B組表達(dá)量低,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),且比同時(shí)相A組表達(dá)量高,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:1在單側(cè)輸尿管梗阻大鼠模型中,TGF-β1、α-SMA水平隨梗阻時(shí)間延長逐漸升高。2在梗阻早期,HO-1表達(dá)升高,隨梗阻時(shí)間延長,HO-1表達(dá)逐漸下降;應(yīng)用瑞舒伐他汀干預(yù)后,HO-1表達(dá)明顯增加,腎間質(zhì)纖維化程度減輕。3瑞舒伐他汀減輕腎間質(zhì)纖維化的作用機(jī)制可能部分是通過誘導(dǎo)HO-1高表達(dá),進(jìn)而下調(diào)TGF-β1、α-SMA水平實(shí)現(xiàn)的。
【關(guān)鍵詞】：單側(cè)輸尿管梗阻(unilateral urethral obstruction UUO) 瑞舒伐他汀(Rosuvastatin) 腎間質(zhì)纖維化 血紅素加氧酶-1(heme oxygenase-1) 轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1) α平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R965;R-332
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-12
• 前言12-13
• 材料與方法13-17
• 結(jié)果17-19
• 附圖19-39
• 附表39-41
• 討論41-45
• 結(jié)論45-46
• 參考文獻(xiàn)46-49
• 綜述 血紅素加氧酶-1 及其誘導(dǎo)劑在腎臟疾病的作用研究進(jìn)展49-59
• 參考文獻(xiàn)54-59
• 致謝59-60
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷60

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 朱慧慧;張璐瑤;;瑞舒伐他汀預(yù)處理對(duì)肝缺血再灌注肺損傷大鼠肺組織HO-1和iNOS表達(dá)的影響[J];中國實(shí)用神經(jīng)疾病雜志;2014年22期

2 馬龍;吳昆;馬明福;馬嵋;孟峻嵩;于湘友;;左旋精氨酸預(yù)處理對(duì)老齡大鼠腎缺血再灌注損傷的保護(hù)作用[J];華南國防醫(yī)學(xué)雜志;2014年02期

3 唐群;吳華;雷久士;;山藥多糖預(yù)處理對(duì)缺血再灌注損傷大鼠腎臟缺氧誘導(dǎo)因子1α的影響[J];世界中西醫(yī)結(jié)合雜志;2013年06期

4 趙維;吳廣禮;何正佳;趙彬;;山莨菪堿對(duì)橫紋肌溶解致急性腎損傷大鼠腎組織內(nèi)HO-1表達(dá)及腎功能的影響[J];中國中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志;2013年01期

5 王淑敏;王遠(yuǎn)征;;氯高鐵血紅素對(duì)早期糖尿病腎病大鼠腎臟的影響[J];東南大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2012年04期

6 朱小兵;吳論;劉志群;;右美托咪啶對(duì)腎臟缺血再灌注損傷大鼠腎組織血紅素氧合酶-1表達(dá)的影響[J];中國現(xiàn)代醫(yī)藥雜志;2012年06期

7 ;Heme oxygenase-1 prevents liver fibrosis in rats by regulating the expression of PPAR_γ and NF-_κB[J];World Journal of Gastroenterology;2012年14期

8 張博華;陳晶;;冬蟲夏草藥理作用研究進(jìn)展[J];中醫(yī)藥信息;2012年01期

9 李娜;丁勝;王紅祥;趙n\;容松;;辛伐他汀通過上調(diào)血紅素氧合酶-1減少腎臟缺血再灌注損傷[J];中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志;2011年12期

10 孫靜姝;劉怡晟;黃海東;蔣更如;;冬蟲夏草通過誘導(dǎo)血色素加氧酶-1表達(dá)抑制腎小管間質(zhì)纖維化[J];中國中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志;2011年05期

  本文關(guān)鍵詞：瑞舒伐他汀對(duì)UUO大鼠模型腎組織HO-1及TGF-β1，α-SMA表達(dá)的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：320936