本文關(guān)鍵詞：酒精聯(lián)合高脂飲食誘導(dǎo)小鼠脂肪肝模型的建立及發(fā)病機(jī)制探討，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:建立一種與人類脂肪肝發(fā)生發(fā)展進(jìn)程類似的小鼠脂肪肝模型,并借此來(lái)探討高脂飲食同時(shí)飲酒對(duì)肝臟可能的損傷途徑以及脂肪肝與胰島素抵抗之間的關(guān)系,為臨床研究提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:C57BL/6J小鼠120只,SPF級(jí),體重18~22g,雌雄各半,隨機(jī)分為兩組:對(duì)照組(Con)、模型組(Mod)各60只,雌雄各半。對(duì)照組動(dòng)物自由飲水,給予基礎(chǔ)飼料,熱量組成:碳水化合物71%,脂肪8%,,蛋白質(zhì)21%,總熱量為260kcal/100g;模型組動(dòng)物自由飲用20%乙醇溶液,飼喂高脂飼料,熱量組成:碳水化合物20%,脂肪59%,蛋白質(zhì)21%,總熱量為540kcal/100g。分別于喂養(yǎng)1周、2周、4周、7周后每組隨機(jī)選10只小鼠,雌雄各半,動(dòng)態(tài)觀察其肝臟形態(tài)學(xué)改變,第7周形態(tài)學(xué)證據(jù)顯示模型組動(dòng)物脂肪變性程度達(dá)到脂肪肝的標(biāo)準(zhǔn)時(shí),立即將剩余全部小鼠禁食12小時(shí),稱重后從小鼠眶后靜脈叢采血,用于測(cè)定空腹血清胰島素及血清ALT、AST、TBA、TG、CHO、TBIL、ALP、GLU、FFA。然后處死小鼠,立刻取出肝臟組織,大體觀察、稱重后迅速分離并截取約合適大小的肝右葉標(biāo)本放入2.5%戊二醛固定液中固定,4℃保存,用以在透射電鏡下觀察肝臟超微結(jié)構(gòu)的改變;然后將肝中葉新鮮組織用OCT包埋劑包埋,-20℃冰箱保存,用以肝組織切片油紅O染色;肝左葉放入10%中性福爾馬林固定;其余肝組織液氮冷凍后置-80℃超低溫冰箱保存,用于檢測(cè)肝組織TG、T-SOD、MDA、ADH、ALDH、T-AOC。結(jié)果:1在建模第6周和第7周期間,分別各有1只實(shí)驗(yàn)動(dòng)物死亡。2肝組織HE染色結(jié)果表明,建模2周后,模型組動(dòng)物肝細(xì)胞開始出現(xiàn)輕度脂肪變,隨著建模時(shí)間增長(zhǎng),脂肪變性嚴(yán)重程度逐漸加重,7周后部分動(dòng)物的肝細(xì)胞出現(xiàn)彌漫性大泡性肝細(xì)胞脂肪變性,脂肪變肝細(xì)胞占肝小葉的1/3以上,達(dá)到脂肪肝標(biāo)準(zhǔn);模型組動(dòng)物肝細(xì)胞還可見不同程度的肝細(xì)胞壞死現(xiàn)象,對(duì)照組動(dòng)物肝細(xì)胞未見明顯脂肪變性。3肝組織油紅O染色結(jié)果顯示,隨建模時(shí)間延長(zhǎng),模型組動(dòng)物肝細(xì)胞胞漿內(nèi)的紅色脂滴逐漸增多,到第7周時(shí),肝細(xì)胞漿內(nèi)可見大量紅色脂滴,肝細(xì)胞腫大,符合肝細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)沉積的特征。對(duì)照組動(dòng)物肝臟中脂滴含量明顯少于模型組。4建模7周后,與對(duì)照組相比,模型組雄性動(dòng)物體重增加4.20%(P0.05),肝重增加6.36%(P0.05),肝重系數(shù)無(wú)明顯增加(無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異);雌性動(dòng)物體重增加8.29%(P0.01),肝重增加10.23%(P0.01),肝重系數(shù)增加不明顯(無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異)。5建模7周后,與對(duì)照組相比,模型組動(dòng)物血清ALT水平上升一倍,AST水平上升81%,TBA水平上升108%,TG水平上升57%,CHO水平上升27%(均為P0.01);模型組動(dòng)物血清TBIL、ALP、GLU、FFA水平與對(duì)照組相比無(wú)明顯差別。6建模7周后,與對(duì)照組相比,模型組動(dòng)物肝臟TG上升27%(P0.05),MDA水平上升53%(P0.01),T-AOC下降35%(P0.01);模型組動(dòng)物肝臟ADH、T-SOD、ALDH水平與對(duì)照組相比無(wú)明顯差別。7建模7周后,與對(duì)照組相比,模型組動(dòng)物空腹血糖水平略有上升(無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異),空腹胰島素水平和胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR)顯著上升(P0.01)。8建模7周后,肝組織電鏡結(jié)果顯示模型組動(dòng)物肝細(xì)胞胞漿疏松;細(xì)胞核邊緣不規(guī)則、不清晰,核仁不明顯,電子密度降低;線粒體腫脹,嵴粒模糊不清;粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)明顯擴(kuò)張,出現(xiàn)斷裂;胞漿內(nèi)可見到大小不一的脂肪滴沉積。結(jié)論:1采用酒精聯(lián)合高脂飲食的方法建立C57BL/6J小鼠脂肪肝模型,建模7周后,測(cè)得模型組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重與肝重相對(duì)于對(duì)照組動(dòng)物均有明顯增加;動(dòng)物肝臟HE染色和油紅O染色觀察結(jié)果表明模型組小鼠肝臟的脂肪變性程度已達(dá)到脂肪肝的標(biāo)準(zhǔn)。2采用酒精聯(lián)合高脂飲食的方法建立C57BL/6J小鼠脂肪肝模型,建模7周后,血清ALT、AST、TBA、TG、CHO水平均明顯升高;肝臟TG水平明顯升高。血清和肝臟生化數(shù)據(jù)變化趨勢(shì)與脂肪肝的臨床數(shù)據(jù)改變相一致,模型建立成功。3采用酒精聯(lián)合高脂飲食的方法建立C57BL/6J小鼠脂肪肝模型,建模7周后,肝臟MDA水平明顯升高,T-AOC明顯下降,T-SOD也有下降趨勢(shì),說(shuō)明在本實(shí)驗(yàn)中氧化應(yīng)激和脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)有可能參與了脂肪肝的形成。4采用酒精聯(lián)合高脂飲食的方法建立C57BL/6J小鼠脂肪肝模型,建模7周后,空腹血糖水平略有上升,空腹胰島素水平上升兩倍,經(jīng)計(jì)算得出模型組動(dòng)物胰島素抵抗指數(shù)明顯高于對(duì)照組動(dòng)物,表明該模型建立的過(guò)程中伴有胰島素抵抗的發(fā)生。
【關(guān)鍵詞】：脂肪肝 酒精 高脂 氧化應(yīng)激 脂質(zhì)過(guò)氧化 胰島素抵抗
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R575.5;R-332
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-10
• 英文縮寫10-11
• 前言11
• 材料與方法11-27
• 結(jié)果27-29
• 附圖29-33
• 附表33-36
• 討論36-38
• 結(jié)論38-39
• 參考文獻(xiàn)39-41
• 綜述41-52
• 參考文獻(xiàn)49-52
• 致謝52-53
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷53

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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10 范建高,曾民德,李繼強(qiáng),陸倫根,謝秀蘭,李超群,彭延申,邱德凱;脂肪肝與肝纖維化關(guān)系的實(shí)驗(yàn)觀察[J];中華醫(yī)學(xué)雜志;1998年10期

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

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  本文關(guān)鍵詞：酒精聯(lián)合高脂飲食誘導(dǎo)小鼠脂肪肝模型的建立及發(fā)病機(jī)制探討，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號(hào)：320493