本文關(guān)鍵詞：羥基紅花黃色素A對(duì)血管性癡呆動(dòng)物模型保護(hù)作用的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：隨著我國(guó)社會(huì)老齡化程度不斷的加劇,血管性癡呆(Vascular dementia,VD)已逐步發(fā)展成影響國(guó)內(nèi)老年人晚年生活質(zhì)量的重要疾病之一,其致病因素中最常見的即腦缺血(腦缺血再灌注)。羥基紅花黃色素A (Hydroxysafflor yellow A,HSYA)是傳統(tǒng)中藥紅花的主要活性成分之一,中藥紅花具有活血化瘀的功效,本研究初步探明了HSYA對(duì)VD疾病的保護(hù)作用的機(jī)制,為該藥物預(yù)防VD的臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。方法：實(shí)驗(yàn)一：小鼠行以雙側(cè)頸總動(dòng)脈夾閉法造模,術(shù)3d后對(duì)小鼠進(jìn)行避暗和跳臺(tái)試驗(yàn)測(cè)試,觀察小鼠精神狀況、學(xué)習(xí)記憶能力的改變情況；測(cè)試完成后,進(jìn)行斷頭取腦,秒表記錄下小鼠斷頭后張口喘息時(shí)間,用以評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)小鼠抗缺氧能力；利用比色法測(cè)定小鼠腦組織中總蛋白(TP)、總超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、一氧化氮合成酶(NOS)、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)、乳酸脫氫酶(LDH)和乳酸(LD),以評(píng)價(jià)腦缺血再灌注小鼠腦代謝情況；應(yīng)用常規(guī)HE染色法觀察造模后小鼠腦組織病理學(xué)改變情況。實(shí)驗(yàn)二：大鼠行以雙側(cè)頸總動(dòng)脈永久性結(jié)扎法造模,術(shù)后3d以大鼠避暗和跳臺(tái)試驗(yàn)結(jié)果,觀察大鼠學(xué)習(xí)記憶能力改變情況,用以評(píng)價(jià)腦缺血造模效果；應(yīng)用RT-PCR法檢測(cè)各組腦組織細(xì)胞中炎癥因子NF-κB/p65、IL-1β、Caspase-12和CHOP mRNA表達(dá)的影響；利用免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)大鼠腦組織細(xì)胞中上述炎癥因子的蛋白表達(dá)情況。結(jié)果：實(shí)驗(yàn)一發(fā)現(xiàn)HSYA對(duì)腦組織的缺血性損傷有明顯的預(yù)防保護(hù)作用,能有效改善腦缺血再灌注小鼠的精神狀態(tài)和學(xué)習(xí)記憶能力。HSYA能夠在小鼠腦缺血再灌注后顯著性提升腦組織中SOD活力和降低MDA含量,有效減輕了缺血再灌注后腦組織脂質(zhì)過氧化的損傷,增強(qiáng)了自由基清除的能力；減少N0的積聚,降低NOS和iNOS的活性,降低了iNOS催導(dǎo)轉(zhuǎn)化生成的神經(jīng)毒性N0的損傷；極顯著性提高LDH的活性,降低了LD的含量,從而降低了細(xì)胞膜的損傷,減輕細(xì)胞酸中毒的程度。實(shí)驗(yàn)二發(fā)現(xiàn)HSYA對(duì)大鼠腦缺血后具有保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞作用,大鼠腦缺血后HSYA有效的調(diào)控減少了腦組織中NF-κB/p65、IL-1β、Caspase-12和CHOP四個(gè)炎癥因子mRNA基因的表達(dá),免疫組化染色從蛋白質(zhì)水平也證實(shí)了HSYA對(duì)上述四個(gè)炎癥因子的抑制作用,從而顯示其抗炎作用。作用機(jī)制可能是通過下調(diào)腦缺血大鼠炎癥信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑核轉(zhuǎn)錄因子κB調(diào)節(jié)通路相關(guān)因子IL-1β的炎癥作用；降低Caspase-12和CHOP的表達(dá),抑制內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激作用從而減少大鼠腦組織神經(jīng)細(xì)胞的凋亡。結(jié)論：1)HSYA能明顯改善血管性癡呆引起的學(xué)習(xí)記憶能力,對(duì)神經(jīng)元具有較好的保護(hù)作用,其改善與保護(hù)作用呈現(xiàn)明顯的劑量依賴關(guān)系：2)HSYA能夠減少缺血再灌注小鼠腦組織中有害代謝產(chǎn)物的積聚,增強(qiáng)自由基的清除能力,降低脂質(zhì)過氧化損傷、細(xì)胞膜的損傷,減輕細(xì)胞酸中毒的程度；3)HSYA能夠顯著下調(diào)腦組織中NF-κB/p65、IL-1β、Caspase-12和CHOP四個(gè)炎癥因子mRNA基因的轉(zhuǎn)錄水平和蛋白質(zhì)的表達(dá)情況,表明其具備抗炎作用,能抑制內(nèi)質(zhì)網(wǎng)通路,減少神經(jīng)細(xì)胞的凋亡。
【關(guān)鍵詞】：羥基紅花黃色素A 腦缺血再灌注 腦代謝 炎癥因子 神經(jīng)保護(hù)作用
【學(xué)位授予單位】：安徽理工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R285.5;R-332
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-15
• 注釋說明清單15-17
• 引言17-20
• 1 中藥紅花抗腦缺血損傷的研究進(jìn)展20-25
• 1.1 中藥紅花及藥效概述20
• 1.2 中藥紅花的化學(xué)成分20-21
• 1.3 中藥紅花復(fù)方制劑21
• 1.4 中藥紅花抗腦缺血損傷作用的機(jī)制研究現(xiàn)狀21-24
• 1.4.1 保護(hù)腦組織損傷22-23
• 1.4.2 抗血小板聚集23
• 1.4.3 保護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞23
• 1.4.4 降低血液粘度23
• 1.4.5 抗動(dòng)脈粥樣硬化作用23-24
• 1.4.6 抗炎作用24
• 1.5 小結(jié)24-25
• 2 腦缺血再灌注損傷機(jī)制的研究進(jìn)展25-30
• 2.1 常見腦缺血再灌注動(dòng)物模型的制備及優(yōu)缺點(diǎn)對(duì)比25-26
• 2.2 腦缺血再灌注機(jī)制的研究進(jìn)展26-29
• 2.2.1 Ca~(2+)超載27
• 2.2.2 興奮性氨基酸毒性作用27-28
• 2.2.3 炎癥反應(yīng)28
• 2.2.4 自由基損傷28-29
• 2.2.5 一氧化氮損傷29
• 2.2.6 血腦屏障損傷29
• 2.3 小結(jié)29-30
• 3 HSYA對(duì)腦缺血再灌注小鼠影響的研究30-57
• 3.1 實(shí)驗(yàn)材料30
• 3.2 實(shí)驗(yàn)用品30-33
• 3.2.1 實(shí)驗(yàn)主要藥品和試劑的購(gòu)置30-31
• 3.2.2 主要溶液的配制方法31-32
• 3.2.3 主要儀器32-33
• 3.3 實(shí)驗(yàn)方法33-36
• 3.3.1 小鼠雙側(cè)頸總動(dòng)脈夾閉法模型制備方法33
• 3.3.2 10%腦組織勻漿液制備方法33
• 3.3.3 4%多聚甲醛固定小鼠腦組織方法33-34
• 3.3.4 小鼠尾靜脈給藥方法34
• 3.3.5 小鼠避暗試驗(yàn)方法34-35
• 3.3.6 小鼠跳臺(tái)試驗(yàn)方法35-36
• 3.4 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容36-46
• 3.4.1 HSYA對(duì)小鼠精神狀態(tài)、學(xué)習(xí)記憶能力影響的測(cè)試36
• 3.4.2 HSYA對(duì)小鼠抗缺氧能力的測(cè)試36
• 3.4.3 HSYA對(duì)小鼠腦代謝情況影響的測(cè)定36-44
• 3.4.4 常規(guī)HE染色觀察小鼠腦組織病理學(xué)的改變44-46
• 3.5 實(shí)驗(yàn)結(jié)果46-53
• 3.5.1 造模后小鼠精神狀態(tài)的改變46
• 3.5.2 HSYA對(duì)腦缺血再灌注小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響46-47
• 3.5.3 HSYA對(duì)腦缺血再灌注小鼠斷頭抗缺氧生存時(shí)間的影響47-48
• 3.5.4 HSYA對(duì)腦缺血再灌注小鼠腦代謝情況影響的影響48-52
• 3.5.5 HSYA對(duì)腦缺血再灌注小鼠皮層病理檢查結(jié)果52-53
• 3.6 實(shí)驗(yàn)討論53-56
• 3.7 本章小結(jié)56-57
• 4 HSYA對(duì)腦缺血再灌注大鼠保護(hù)作用機(jī)制的研究57-79
• 4.1 實(shí)驗(yàn)材料57
• 4.2 實(shí)驗(yàn)用品57-60
• 4.2.1 主要試劑與耗材57-58
• 4.2.2 主要溶液及其配制方法58-59
• 4.2.3 主要儀器59-60
• 4.3 實(shí)驗(yàn)方法60-67
• 4.3.1 雙側(cè)頸總動(dòng)脈永久性結(jié)扎模型制備方法60
• 4.3.2 避暗試驗(yàn)方法60-61
• 4.3.3 跳臺(tái)試驗(yàn)方法61
• 4.3.4 實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法61-66
• 4.3.5 免疫組織化學(xué)染色方法66-67
• 4.4 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容67-68
• 4.4.1 HSYA對(duì)腦缺血大鼠學(xué)習(xí)記憶能力改變的測(cè)試67-68
• 4.4.2 RT-PCR法測(cè)定NF-κB/p65、IL-1β、Caspase-12和CHOP轉(zhuǎn)錄水平68
• 4.4.3 免疫組織化學(xué)法測(cè)定NF-κB/p65、IL-1β、Caspase-12和CHOP蛋白表達(dá)68
• 4.5 實(shí)驗(yàn)結(jié)果68-76
• 4.5.1 HSYA對(duì)腦缺血大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響68-70
• 4.5.2 HSYA對(duì)全腦缺血大鼠腦組織中NF-κB/p65、IL-1β、Caspase-12和CHOP轉(zhuǎn)錄水平的影響70-74
• 4.5.3 HSYA對(duì)全腦缺血大鼠腦組織中NF-κB/p65、IL-1β、Caspase-12和CHOP蛋白表達(dá)情況的影響74-76
• 4.6 實(shí)驗(yàn)討論76-78
• 4.7 本章小結(jié)78-79
• 結(jié)論79-80
• 參考文獻(xiàn)80-85
• 后記或致謝85-86
• 作者簡(jiǎn)介及讀研期間主要科研成果86

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 張旭生;劉黎青;王媛;;腦缺血?jiǎng)游锬Ｐ椭苽涞难芯窟M(jìn)展[J];中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào);2015年33期

2 陶宸;李夢(mèng)陽(yáng);曲鵬;;腦缺血-再灌注損傷時(shí)興奮性遞質(zhì)谷氨酸的釋放機(jī)制[J];科技資訊;2015年24期

3 趙京山;方明星;郭淺妤;李云峰;徐丙元;賴少鴻;馮夢(mèng)晗;劉玉;李愛英;;羥基紅花黃色素A抑制PDGF促大鼠血管平滑肌細(xì)胞增殖的作用[J];中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報(bào);2015年06期

4 王萍;張密霞;莊朋偉;盧志強(qiáng);韓娟;張艷軍;;腦缺血再灌注損傷的炎癥反應(yīng)機(jī)制研究進(jìn)展[J];天津中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào);2014年05期

5 趙劍鋒;劉靜;郭穎;劉倩;戴忠;馬雙成;林瑞超;;紅花注射液化學(xué)成分及其活性研究[J];中國(guó)中藥雜志;2014年16期

6 王紅梅;賀永貴;伊紅麗;李海波;;腦缺血再灌注損傷發(fā)生機(jī)制及治療進(jìn)展[J];河北聯(lián)合大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2014年02期

7 胡慧秀;王志穩(wěn);;癡呆老人照顧模式及照料資源的現(xiàn)狀[J];中華護(hù)理雜志;2013年12期

8 金錫姣;歐陽(yáng)潔;郭瑩;戴波娜;;葛根黃酮對(duì)腦缺血再灌注損傷大鼠腦組織NO及NOS的影響[J];中國(guó)中醫(yī)急癥;2013年08期

9 張少校;李卓;郭子江;周艷華;;紅花黃色素聯(lián)合奧扎格雷鈉治療急性腦梗死的療效觀察[J];中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥;2013年06期

10 牛凱;張宇;鄭為超;;羥基紅花黃色素A與心血管作用研究進(jìn)展[J];遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào);2012年12期

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 高宗桂;川芎嗪干預(yù)大鼠缺血性中風(fēng)作用及其機(jī)制的研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2014年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 邱莉;紅花黃色素對(duì)新生大鼠缺氧缺血性腦病的保護(hù)作用[D];福建醫(yī)科大學(xué);2009年

  本文關(guān)鍵詞：羥基紅花黃色素A對(duì)血管性癡呆動(dòng)物模型保護(hù)作用的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：302879