Foxp3在DC細(xì)胞中的表達(dá)及其對免疫調(diào)節(jié)作用的影響
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【摘要】:目的:不同處理的樹突狀細(xì)胞(Dendritic cells,DC)胞內(nèi)Foxp3的表達(dá)對其免疫調(diào)節(jié)作用的影響。方法:提取BABL/C小鼠骨髓,用含有GM-CSF (10ng/ml)和IL-4 (10ng/ml)的RPMI-1640培養(yǎng)基誘導(dǎo)生成DC,在此基礎(chǔ)上給予不同的刺激,分組包括,未成熟DC組(immature dendritic cells,imDC):5d-imDC組及MSCs組;成熟DC組(mature dendritic cells,mDC):ODN1585組,R848組,LPS組。分別檢測其表型變化及胞內(nèi)Foxp3的表達(dá)。用BABL/C小鼠的DC+C57BL/6小鼠的CD4+T細(xì)胞進行共培養(yǎng)實驗,CCK-8檢測T細(xì)胞的增殖情況;qPCR方法檢測T細(xì)胞T-bet、GATA-3、R ORγt、Foxp3的表達(dá),CBA檢測共培養(yǎng)體系上清液中細(xì)胞因子表達(dá)水平,分析DC對CD4+T細(xì)胞分化的影響。結(jié)果:首先流式細(xì)胞儀檢測DC表面共刺激分子的表達(dá)結(jié)果顯示5d-imDC及MSCs組表面共刺激分子CD80、CD86的表達(dá)較mDC組(ODN1585組,R848組,LPS組)低,表明5d-imDC及MSCs處理的DC保持了其未成熟性。接著本實驗分別從基因及蛋白水平檢測DC中Foxp3表達(dá),結(jié)果顯示imDC胞內(nèi)Foxp3的表達(dá)明顯高于mDC (P0.05),各組mDC中表達(dá)的Foxp3無明顯差異。為了判斷各組DC對T緝胞的影響,本實驗檢測了CD4-T增殖分化情況,增殖結(jié)果顯示:5d-imDC及MSCs-DC能抑制CD4+T細(xì)胞增殖(P0.05);而mDC能促進CD4+T細(xì)胞增殖(P0.05)分化結(jié)果顯示5d-imDC及MSCs-DC中GATA-3、Foxp3的表達(dá)較其他各組高,表達(dá)的T-bet、RORyt較其他組低,表明imDC可以誘導(dǎo)CD4+T細(xì)胞向免疫抑制性的T細(xì)胞亞型分化,而mDC可以誘導(dǎo)CD4+T細(xì)胞向Thl方向分化。最后本實驗檢測了共培養(yǎng)上清液中細(xì)胞因子表達(dá),結(jié)果表明5d-imDC及MSCs-DC中IL-4、IL-10分泌量其他各mDC組高(P0.05),分泌IFN-γ、TNF-a和IL-17A較其他mDC組低(P0.05),證明imDC可以誘導(dǎo)CD4+T細(xì)胞向免疫抑制功能的細(xì)胞分化并且誘導(dǎo)T細(xì)胞分泌更多的免疫抑制性細(xì)胞因子。結(jié)論:高表達(dá)Foxp3的imDC可以抑制CD4-T的增殖,并且促進其向抑炎性的Th2和Treg分化。
【關(guān)鍵詞】:樹突狀細(xì)胞 Foxp3 免疫耐受
【學(xué)位授予單位】:蘇州大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R392
【目錄】:
- 中文摘要4-6
- Abstract6-9
- 前言9-11
- 材料和方法11-21
- 結(jié)果21-36
- 討論36-40
- 結(jié)論40-41
- 參考文獻(xiàn)41-45
- 綜述45-53
- 參考文獻(xiàn)50-53
- 縮略詞表53-55
- 攻讀學(xué)位期間公開發(fā)表的論文55-56
- 致謝56-58
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本文關(guān)鍵詞:Foxp3在DC細(xì)胞中的表達(dá)及其對免疫調(diào)節(jié)作用的影響,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
本文編號:287965
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