本文關(guān)鍵詞：低氧對(duì)新生隱球菌生物膜影響的初步研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景和目的新生隱球菌(Cryptococcus neoformans)是雌雄異株的單倍體擔(dān)子菌類真菌,它是一種含莢膜的條件性致病真菌,廣泛存在于自然界。由于HIV感染和器官移植患者的增加、廣譜抗生素和免疫抑制劑的大量使用、侵入性醫(yī)療裝置的廣泛應(yīng)用等,由新生隱球菌所引起的機(jī)會(huì)性感染的發(fā)生率不斷升高。吸入的新生隱球菌能夠經(jīng)血液傳播擴(kuò)散到中樞神經(jīng)系統(tǒng),可在患者體內(nèi)引起致命性的腦膜腦炎,致死率高達(dá)90%以上,而且這種感染會(huì)造成慢性化或潛伏感染狀態(tài)。C.neoformans的主要毒力因子包括：莢膜、黑素、尿素酶、磷脂酶及其在宿主體溫環(huán)境生長的能力等。近年來,研究發(fā)現(xiàn)新生隱球菌可在一定條件下形成生物膜,并且研究者認(rèn)為生物膜的形成也是其重要的毒力因子之一,并逐漸受到人們的重視。生物膜是由細(xì)胞菌群及細(xì)胞外多聚基質(zhì)組成的復(fù)雜的有機(jī)體,它的形成與表面相關(guān)。研究顯示大于65%的人類感染與生物膜的形成相關(guān)。此外,每年由生物膜相關(guān)感染導(dǎo)致的死亡人數(shù)達(dá)50多萬。隨著內(nèi)置醫(yī)療裝置的廣泛應(yīng)用,真菌生物膜引起的相關(guān)感染逐漸引起了人們的關(guān)注。研究發(fā)現(xiàn),C.neoformans可在血管分流器、腹膜透析瘺管、假體髖關(guān)節(jié)等多種醫(yī)療裝置上定植并形成生物膜。這些內(nèi)置醫(yī)療裝置,可作為一種基質(zhì)使真菌定植黏附其上并生長形成生物膜結(jié)構(gòu),在一定條件下細(xì)胞能脫離基質(zhì)引起嚴(yán)重的真菌血癥和/或播散性感染。這些植入相關(guān)感染本身就難以解決并可能需要長期抗真菌治療和移除植入物來控制感染,造成真菌慢性或潛伏感染。因此,真菌生物膜導(dǎo)致的相關(guān)感染成為一種日益重要的臨床和經(jīng)濟(jì)問題,而了解C.neoformans生物膜在感染中的作用將有助于臨床抗Cneoformans慢性或潛伏感染治療。Cneoformans是專性需氧致病酵母菌,它在致病過程中必須要面對(duì)宿主體內(nèi)不同氧濃度的變化。目前國內(nèi)外的研究多聚集于新生隱球菌低氧適應(yīng)的機(jī)制,但低氧對(duì)其主要毒力因子的影響及其機(jī)制尚不清楚。我們?cè)谇捌谘芯恐邪l(fā)現(xiàn)Cneoformans在低氧條件下重要致病表型發(fā)生變化,即莢膜和黑素形成減少、尿素酶和磷脂酶活性降低,使Cneoformans在宿主內(nèi)進(jìn)入潛伏或慢性狀態(tài),導(dǎo)致感染遷延不愈。本研究進(jìn)一步探討了低氧對(duì)Cneoformans重要毒力因子生物膜的影響,旨在探討缺氧在C.neoformans潛伏或慢性感染機(jī)制中的作用。方法本研究以三氣培養(yǎng)箱建立低氧濃度(1%)培養(yǎng)條件,以大氣條件為正常氧濃度(21%)培養(yǎng)條件,以新生隱球菌標(biāo)準(zhǔn)株H99株(血清型A,交配型α)為研究對(duì)象,采用DMEM培養(yǎng)基24孔板、96孔板培養(yǎng)的方法建立新生隱球菌生物膜體外模型；分別在第2h、4h、8h、12h、24h、48h、72h取新生隱球菌生物膜用光學(xué)顯微鏡、共聚焦激光掃描顯微鏡、XTT等方法觀察兩組氧濃度下新生隱球菌生物膜形成厚度、形態(tài)、生長動(dòng)力學(xué)指標(biāo)。結(jié)果兩種氧濃度條件下新生隱球菌體外模型均能形成生物膜；兩種條件下新生隱球菌生物膜的形成過程相似,均經(jīng)歷黏附、聚集、微菌落形成及生物膜成熟的過程,最終形成厚度約為16μm的成熟的生物膜；生物膜細(xì)胞的密度及其生長活性隨著培養(yǎng)時(shí)間的增加而增加,當(dāng)其達(dá)到一定成熟度后漸趨穩(wěn)定；與21%氧濃度相比,1%氧濃度下各時(shí)間點(diǎn)生物膜細(xì)胞密度及生長活性相對(duì)較高。結(jié)論新生隱球菌能在21%氧和1%氧條件下形成成生物膜結(jié)構(gòu)；兩種氧濃度條件下新生隱球菌所能形成生物膜的能力各不相同,低氧可能具有促進(jìn)其生物膜形成的作用。
【關(guān)鍵詞】：新生隱球菌 低氧 生物膜
【學(xué)位授予單位】：南京大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R379.5
【目錄】：

• 中文摘要7-9
• Abstract9-13
• 前言13-18
• 參考文獻(xiàn)15-18
• 一 實(shí)驗(yàn)材料18-19
• 1、實(shí)驗(yàn)菌株18
• 2、實(shí)驗(yàn)試劑18-19
• 3、實(shí)驗(yàn)儀器19
• 二 實(shí)驗(yàn)方法19-22
• 1、培養(yǎng)基及試劑的制備19-20
• 2、菌懸液的制備20-21
• 3、光鏡觀察不同氧濃度下新生隱球菌體外生物膜形成21
• 4、共聚焦激光掃描顯微鏡觀察新生隱球菌體外生物膜形成21
• 5、新生隱球菌體外生物膜生長動(dòng)力學(xué)測定實(shí)驗(yàn)方法21
• 6、統(tǒng)計(jì)分析21-22
• 三、結(jié)果22-26
• 1、光鏡下新生隱球菌生物膜的形態(tài)觀察22-23
• 2、共聚焦激光掃描顯微鏡下觀察新生隱球菌體外生物膜形成23-24
• 3、新生隱球菌體外生物膜的生長動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)24-26
• 四、討論26-29
• 參考文獻(xiàn)29-33
• 全文總結(jié)33-34
• 綜述：真菌生物膜的研究進(jìn)展34-46
• 參考文獻(xiàn)42-46
• 附錄A 縮略詞表46-47
• 附錄B 在讀期間發(fā)表的論文47-49
• 致謝49-50

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 孔慶濤;桑紅;王樂;曾梅華;王高峰;張敏;呂桂霞;沈永年;劉維達(dá);;不同氧濃度對(duì)新生隱球菌尿素酶和磷脂酶的影響[J];醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào);2012年11期

2 孔慶濤;桑紅;;新生隱球菌氧傳感途徑的研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào);2013年10期

3 徐元玲;王建東;蔣琪霞;;慢性傷口細(xì)菌生物膜的臨床識(shí)別和影響因素的研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào);2014年12期

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  本文關(guān)鍵詞：低氧對(duì)新生隱球菌生物膜影響的初步研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：265240