本文關(guān)鍵詞：不同基因型的丙肝病毒NS5A蛋白與PI4KB競爭結(jié)合ACBD3的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：磷脂酰肌醇-4-磷酸(phosphatidylinositol 4-phosphate, PI4P)有利于丙型肝炎病毒(Hepatitis C Virus, HCV)的復(fù)制。在HCV侵染細(xì)胞中,復(fù)制區(qū)域的PI4P濃度較高。已知PI4KB (PI 4-kinases B)是促進(jìn)PI4P產(chǎn)生的一種重要的激酶,還是促進(jìn)包括脊髓灰質(zhì)炎病毒和愛知病毒(Aichi virus, Aiv)在內(nèi)的一些小核糖核酸病毒復(fù)制的重要蛋白。但PI4KB在HCV復(fù)制中的作用還存在一些爭議。一些研究發(fā)現(xiàn)PI4KB是HCV復(fù)制所必須的,但是另一些研究的結(jié)果則是相反的。這種不一致的結(jié)果可能由于他們的研究對象是不同基因型的HCV導(dǎo)致的。一些研究中發(fā)現(xiàn)敲降PI4KB后,不同基因型HCV復(fù)制展現(xiàn)出不同的被抑制程度。但是導(dǎo)致這種抑制程度不同的機(jī)制尚不清楚。為了檢驗(yàn)含乙酰輔酶A結(jié)合域蛋白3(Acyl-CoA-binding domain-containing protein 3, ACBD3)在HCV復(fù)制中的作用,我們在HCV復(fù)制系統(tǒng)OR6中敲降A(chǔ)CBD3,發(fā)現(xiàn)病毒蛋白的表達(dá)水平明顯上升,這表明了ACBD3是HCV負(fù)調(diào)控因子。通過內(nèi)源免疫共沉淀實(shí)驗(yàn),我們確定NS5A與ACBD3相互作用。接下來GST-Pull Down實(shí)驗(yàn)證明了NS5A與ACBD3(116-327aa)結(jié)合,并且發(fā)現(xiàn)1b型NS5A結(jié)合ACBD3能力更強(qiáng)。文獻(xiàn)已知PI4KB也與ACBD3的116-327aa結(jié)合,我們的實(shí)驗(yàn)也驗(yàn)證了NS5A和PI4KB可以競爭性結(jié)合ACBD3。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),ACBD3與1b型的NS5A結(jié)合能力明顯高于其與2a型NS5A的結(jié)合能力,表明NS5A能挾持PI4KB/ACBD3復(fù)合物的ACBD3形成NS5A/ACBD3復(fù)合物,釋放出PI4KB,并且1b型HCV侵染的細(xì)胞中ACBD3結(jié)合較少的PI4KB,更多的自由PI4KB能夠產(chǎn)生PI4P。該研究解釋了在不同基因型HCV侵染過程中病毒對PI4KB依賴性的差異機(jī)制,鑒定了新的抑制HCV侵染的蛋白ACBD3。
【關(guān)鍵詞】：丙型肝炎病毒 包含乙酰輔酶A結(jié)合域蛋白3 磷脂酰肌醇-4-激酶B 磷脂酰肌醇-4-磷酸
【學(xué)位授予單位】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R373.21
【目錄】：

• 摘要5-6
• Abstract6-7
• 第一章 前言7-17
• 第一節(jié) 丙肝流行情況及其感染、診斷和治療情況介紹7-10
• 第二節(jié) HCV的研究進(jìn)展10-13
• 第三節(jié) PI4P、PI4KA和PI4KB的研究進(jìn)展13-14
• 第四節(jié) ACBD3的研究進(jìn)展14-15
• 第五節(jié) 本論文簡介15-17
• 第二章 材料與方法17-42
• 第一節(jié) 實(shí)驗(yàn)材料與儀器17-25
• 第二節(jié) 實(shí)驗(yàn)方法25-42
• 第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果42-59
• 第一節(jié) ACBD3對HCV增殖的影響的研究42-44
• 第二節(jié) ACBD3與NS5A相互作用44-45
• 第三節(jié) PI4KB與NS5A競爭性結(jié)合ACBD3同一區(qū)段45-48
• 第四節(jié) ACBD3對1b型NS5A與2a型NS5A親和性不同48-52
• 第五節(jié) 進(jìn)一步分析與ACBD3-116-327aa結(jié)合的NS5A具體區(qū)域52-59
• 第四章 討論59-62
• 參考文獻(xiàn)62-68
• 綜述68-81
• 摘要68
• 1 脂滴68
• 2 脂滴是丙肝病毒組裝的細(xì)胞器68-72
• 3 脂滴生成相關(guān)蛋白在丙肝病毒中的作用72-74
• 4 展望74
• 參考文獻(xiàn)74-80
• Abstract80-81
• 附錄1 本論文所用JFH1和Con1序列81-83
• 附錄2 縮略語83-85
• 個(gè)人簡歷85-86
• 致謝86-87

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前7條

1 魏來;;宿主基因和直接抗病毒藥物:丙型肝炎個(gè)體化治療的新時(shí)代[J];傳染病信息;2012年02期

2 丁華;何維娜;陳望;何s

本文編號：257085