現(xiàn)代藥理研究表明,螃蟹甲具有較好的藥理作用,包括鎮(zhèn)痛､抗炎,鎮(zhèn)咳､祛痰､平喘,抗腫瘤,抑菌等｡藏藥螃蟹甲主要來源于唇形科糙蘇屬多年生草本植物螃蟹甲(Phlomis younghusbandii Mukerjee)的干燥塊根,廣泛分布于西藏､青海海拔3 100~4800 m的草甸､河灘草地和干燥山坡,習(xí)稱“露木爾”,為藏醫(yī)常用藥材,至今已有千余年的藥用歷史｡螃蟹甲藥材質(zhì)量標準已收載于1995年部頒《衛(wèi)生部藥品標準(藏藥第一冊)》以及歷屆藏藥質(zhì)量標準,其味苦､性涼,具有清熱疏風､潤喉散寒､斂瘡生肌､化痰止咳的作用,多用于治療風濕感冒､咳嗽痰多､咽喉疫病､培根寒癥､瘡瘍久潰不斂､支氣管炎､肺部疾病等,臨床應(yīng)用非常廣泛,療效顯著,作為野生藏藥材,已被列入藏藥瀕危物種之一｡
因此,目前迫切需要對螃蟹甲的化學(xué)成分､藥理作用和質(zhì)量控制方法等進行深入研究,確定其各種生物活性的化學(xué)物質(zhì),為螃蟹甲藥用價值的進一步開發(fā)和利用提供理論和科學(xué)依據(jù)｡

1化學(xué)成分研究概況

綜合國內(nèi)外相關(guān)文獻報道,目前從藏藥螃蟹甲中分離并鑒定的化合物主要集中在環(huán)烯醚萜苷類､呋喃拉布素型二萜類､黃酮類､苯乙醇苷類､揮發(fā)油類和其他類成分等,現(xiàn)總結(jié)如下｡

1.1環(huán)烯醚萜苷類化合物
Kasai等[4]首次從螃蟹甲干燥塊根中分離鑒定出3種環(huán)烯醚萜苷類化合物,分別被命名為penste-moside,phloyosidesⅠ,phloyosidesⅡ｡高詠莉等對螃蟹甲地上部分化學(xué)成分進行了分析,通過采用乙醇提取,氯仿､正丁醇依次萃取,然后經(jīng)硅膠柱層析分離純化,進一步通過理化常數(shù)和波譜分析確定了5種環(huán)烯醚萜苷類化合物,分別被命名為8-乙酰山梔苷甲酯(8-acetylshanzhiside methyl ester)､山梔苷甲酯(shanzhiside methyl ester)､糙蘇素(phlomiol)､sesamoside､pulchellosideⅠ,上述化合物均為首次從螃蟹甲地上部分中分離得到｡目前,從螃蟹甲中分離鑒定出的8種環(huán)烯醚萜苷類化合物的A環(huán)結(jié)構(gòu)完全一樣,在4位上均有甲酯基取代,B環(huán)在不同取代部位則有較多乙酰基､羥基､甲基,甚至有鹵素的取代｡LI Maoxing等[6]首次從螃蟹甲的干燥根中分離和鑒定出了1種環(huán)烯醚萜苷類成分,被命名為7,8-dehydropenstemoside｡

1.2呋喃拉布素型二萜類化合物
日本學(xué)者Katagiri等從螃蟹甲干燥根中分離鑒定出5種呋喃拉布素型二萜類(furanolabdane-type diterpene)化合物,分別被命名為phlomisosidesⅠ,phlomisosidesⅡ,phlomisosidesⅢ,phlomisosidesⅣ,phlomisosidesⅥ｡趙斌等將螃蟹甲乙酸乙酯提取部位采用不同的色譜方法對其進行分離純化,根據(jù)得到化合物的理化性質(zhì)和光譜數(shù)據(jù)首次鑒定了1種新的呋喃拉布素型二萜類化合物,被命名為糙蘇苷F[15,16-epoxy-8(9),13(16),14-labdatrien-7-ketone-19-oic acid-β-D-gluco pyranosyl ester]｡

1.3黃酮類化合物
范開等采用柱色譜法分離其成分,利用光譜數(shù)據(jù)確定其化學(xué)結(jié)構(gòu),從螃蟹甲的干燥塊根中分離鑒定了1種黃酮苷類化合物,被命名為木犀草素-7-O-葡萄糖苷(luteolin-7-O-β-D-glucopyranoside)｡趙斌從螃蟹甲塊根中分離和鑒定了2種黃酮苷類化合物,分別被命名為木犀草素(luteolin)､山柰酚(kaempferol)｡

1.4苯乙醇苷類化合物
LI Maoxing等采用質(zhì)譜和核磁共振等儀器首次從螃蟹甲的干燥塊根中分離和鑒定出了3種苯乙醇苷類成分,分別被命名為acteoside,alyssonoside,isoac-teoside｡

1.5揮發(fā)油
邊巴次仁等采用氣相色譜-質(zhì)譜(GC-MS)聯(lián)用儀對西藏產(chǎn)螃蟹甲塊根的揮發(fā)油化學(xué)成分進行了分析研究,結(jié)果從分離出的30多個峰中鑒定出21種化學(xué)成分,主要為各種萜類和脂肪酸類,其中丁香酚､十六烷酸､9,12-(反,反)-十八二烯酸甲酯和愈創(chuàng)醇是螃蟹甲揮發(fā)油的主要成分｡

1.6其他類成分
此外,國內(nèi)學(xué)者還從螃蟹甲中分離和鑒定出了蒽醌類化合物如大黃酸(rhein)和大黃素(emo-din),生物堿如小檗堿,三萜及甾體類化合物如熊果酸,β-谷甾醇和胡蘿卜苷,脂肪酸類如三十烷酸和三十烷酸對羥基苯乙酯,糖類如蔗糖和果糖丁苷｡

2藥理活性研究概況

2.1鎮(zhèn)痛和抗炎作用
WANG Qiushi等報道了螃蟹甲地上部分甲醇提取物的鎮(zhèn)痛､抗炎活性并闡述了其潛在機制｡鎮(zhèn)痛活性評價采用醋酸扭體法和熱板法,抗炎活性的評價采用耳腫脹法和毛細血管通透性實驗｡結(jié)果表明螃蟹甲地上部分甲醇提取物顯示出明顯的抗炎和鎮(zhèn)痛活性,其機制可能與下調(diào)腫瘤壞死因子-α(TNF-α),白細胞介素(IL)-6､誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)和環(huán)氧合酶-2(COX-2)的表達有關(guān)｡趙斌研究了螃蟹甲石油醚部位､乙酸乙酯部位､正丁醇部位及水部位,發(fā)現(xiàn)螃蟹甲乙酸乙酯和正丁醇提取部位(劑量3,6,12 g/kg)均有較好的抗炎作用｡
張超等以螃蟹甲水提取物(劑量25,50,100 mg/kg)為研究對象,采用小鼠醋酸扭體法､耳腫脹法､足腫脹法､熱板法及毛細血管通透性實驗等方法來觀察其鎮(zhèn)痛､抗炎作用,結(jié)果表明螃蟹甲水提取物能顯著減少小鼠扭體反應(yīng)的次數(shù),且100 mg/kg組能明顯延長熱板所致的小鼠舔后足的時間,對小鼠耳腫脹及足腫脹均有顯著的抑制作用,且能降低毛細血管的通透性,抑制醋酸所致的小鼠腹腔炎癥滲出,具有較好的鎮(zhèn)痛､抗炎活性｡
趙智等研究了螃蟹甲水提取物對潰瘍性結(jié)腸炎模型小鼠的抗炎作用,結(jié)果表明螃蟹甲水提取物對硫酸葡聚糖(DSS)誘導(dǎo)的潰瘍性結(jié)腸炎小鼠具有較好的保護作用,其作用可能是通過上調(diào)結(jié)腸組織中IL-10的含量來實現(xiàn)的｡以上研究表明,螃蟹甲水提取物､乙酸乙酯部位和正丁醇部位可能具有良好的鎮(zhèn)痛､抗炎作用,其具體作用機制還有待深入研究｡

2.2鎮(zhèn)咳､祛痰､平喘作用
黃小平等比較了螃蟹甲不同提取純化工藝產(chǎn)物的鎮(zhèn)咳､祛痰､平喘作用,采用小鼠氨水引咳法､小鼠酚紅呼吸道排泌法實驗評價其鎮(zhèn)咳､祛痰､平喘作用,結(jié)果發(fā)現(xiàn)螃蟹甲不同提取工藝鎮(zhèn)咳､祛痰､平喘作用效果不同,其中工藝一(螃蟹甲飲片1 kg,加8倍量水,冷浸30 min,煎煮1.5 h,過濾,濾渣重復(fù)2次,合并濾液,冷卻至室溫,轉(zhuǎn)移至處理好的D101大孔吸附樹脂柱,先用水洗脫,至洗脫液近無色,棄水洗脫液,改用80%乙醇洗脫,收集乙醇洗脫液,減壓回收乙醇,濃縮至稠膏,真空干燥,得工藝產(chǎn)物)產(chǎn)物具有良好的鎮(zhèn)咳､祛痰､平喘作用,且提取物易干燥,吸濕性小｡
隨后黃小平等又研究了螃蟹甲不同提取物的鎮(zhèn)咳､祛痰作用,發(fā)現(xiàn)螃蟹甲正丁醇部位能顯著減少小鼠咳嗽次數(shù),減少呼吸道分泌物,是其鎮(zhèn)咳､祛痰的有效部位｡同時,趙斌對螃蟹甲的鎮(zhèn)咳､祛痰､平喘作用部位進行篩選發(fā)現(xiàn),螃蟹甲的乙酸乙酯部位和正丁醇部位都有較好的鎮(zhèn)咳､祛痰､平喘作用,其中鎮(zhèn)咳､祛痰作用以正丁醇部位為佳,平喘作用以乙酸乙酯部位明顯,再次驗證了前人的研究工作｡劉敬等對藏藥螃蟹甲的鎮(zhèn)咳､祛痰､平喘作用的有效部位進行篩選研究,發(fā)現(xiàn)螃蟹甲的乙酸乙酯部位和正丁醇部位為其鎮(zhèn)咳､祛痰､平喘的主要有效部位｡劉明蓉等發(fā)現(xiàn)螃蟹甲的總皂苷類成分是其鎮(zhèn)咳､祛痰､平喘的主要有效成分｡

2.3抗菌作用
張大為等從螃蟹甲的葉和莖中分離得到52株內(nèi)生真菌,經(jīng)過分子鑒定,分別屬于Phoma,Chaet-osphaeronema,Fusarium,Leptosphaeria等12屬,其中擬莖點霉屬Phoma為其優(yōu)勢菌群｡又以原核表達的可溶型1型人類免疫缺陷病毒(human immunode-ficiency virus type 1,HIV-1)的整合酶(integrase,IN)對52株內(nèi)生真菌的發(fā)酵產(chǎn)物進行體外抗HIV-1整合酶鏈轉(zhuǎn)移反應(yīng)活性試驗｡結(jié)果發(fā)現(xiàn),來自Chaetosphaeronema屬真菌的7個樣品對整合酶鏈轉(zhuǎn)移反應(yīng)表現(xiàn)出強烈的抑制作用,其對應(yīng)的IC 50值分別為6.60,5.20,2.86,7.86,4.47,4.56和3.23μg/mL｡該研究表明,螃蟹甲內(nèi)生真菌在抗HIV-1整合酶活性物質(zhì)方面有進一步的開發(fā)價值｡
杜寶中等研究了螃蟹甲干燥塊根水､乙醇､乙醚提取物體外抗耐亞胺培南銅綠假單胞菌的抗菌活性,結(jié)果發(fā)現(xiàn)其對標準菌株ATCC27853,25922,25923的最低抑菌濃度(MIC)分別為26.04,52.08,13.02,62.50,125.00,62.50 mg/mL,而且發(fā)現(xiàn)各質(zhì)量濃度乙醚提取物平板上均有菌生｡
水､乙醇提取物對33株耐亞胺培南銅綠假單胞菌的抑制50%細菌生長的最低藥物濃度(MIC 50)及抑制90%細菌生長的最低藥物濃度(MIC 90)分別為52.08,6 2.50 mg/mL和104.17,125.00 mg/mL｡證實了藏藥螃蟹甲干燥塊根水､乙醇提取物對耐亞胺培南銅綠假單胞菌具有明顯的抗菌作用,而乙醚提取物無明顯的抗菌作用｡
同時,該課題組還進一步研究了同產(chǎn)地螃蟹甲干燥塊根水､乙醇提取物體外葡萄球菌抗菌活性,以微量稀釋法測定拉薩地區(qū)及林芝地區(qū)產(chǎn)螃蟹甲干燥塊根水､乙醇提取物對45株葡萄球菌臨床分離株及標準菌株ATCC27853的MIC,MIC 50,MIC 90及滅菌最低濃度(MBC),結(jié)果發(fā)現(xiàn)拉薩產(chǎn)和林芝產(chǎn)螃蟹甲水､乙醇提取物在體外對金黃色葡萄球菌標準菌株ATCC25923以及45株葡萄球菌臨床分離株均有明顯的抗菌作用｡但不同產(chǎn)地提取物抗菌作用存在一定差異,拉薩產(chǎn)螃蟹甲提取物體外抗菌作用優(yōu)于林芝產(chǎn)螃蟹甲,且同一產(chǎn)地藥材乙醇提取物抗菌作用優(yōu)于水提取物,其原因可能為螃蟹甲抗菌活性成分主要存在于醇提取物之中,證實了藏藥螃蟹甲干燥塊根水､乙醇提取物對葡萄球菌具有明顯抗菌作用｡

2.4抗腫瘤作用
謝文利等采用體內(nèi)､體外2種方法研究了藏藥螃蟹甲中環(huán)烯醚萜苷類成分糙蘇素(劑量2.5,5.0,10.0 mg/kg)的抗腫瘤作用及其機制,采用MTT比色法檢測糙蘇素對S180荷瘤小鼠自然殺傷細胞(NK)殺傷活性的影響和對S180荷瘤小鼠T淋巴細胞增殖反應(yīng)的影響｡結(jié)果發(fā)現(xiàn)糙蘇素對體外培養(yǎng)的人腫瘤細胞和接種的小鼠腫瘤具有明顯抑制作用,同時能夠增強淋巴細胞增殖功能和NK細胞的殺傷能力,抗腫瘤作用可能是通過抑制腫瘤細胞的端粒酶活性而實現(xiàn)的｡

3螃蟹甲的質(zhì)量控制研究概況

3.1螃蟹甲的含量測定
李茂星等建立了反相高效液相色譜(RP-HPLC)同時測定藏藥螃蟹甲中5種環(huán)烯醚萜苷的含量測定方法,結(jié)果表明該方法簡便､準確､重復(fù)性好､結(jié)果穩(wěn)定,可作為螃蟹甲藥材的質(zhì)量控制方法｡同時,張軍莉等建立了螃蟹甲中8-乙酰氧基山梔苷甲酯的高效液相色譜(HPLC)測定方法,結(jié)果表明該方法簡便､準確､專屬性強,可用于螃蟹甲藥材中8-乙酰氧基山梔苷甲酯的含量測定｡
趙斌等采用RP-HPLC法測定螃蟹甲藥材中山梔苷甲酯的含量,結(jié)果表明該方法簡便､準確､重復(fù)性好,可作為螃蟹甲藥材的質(zhì)量控制方法｡李茂星等建立RP-HPLC法同時測定藏藥螃蟹甲和其他3種唇形科植物中3個苯乙醇苷的含量,結(jié)果表明該方法專屬性強､靈敏度高､精確度與重現(xiàn)性好,可作為螃蟹甲藥材的質(zhì)量控制方法｡同時,李茂星等[30]建立測定獨一味､螃蟹甲､糙蘇和蘿卜秦艽中5種環(huán)烯醚萜苷含量的HPLC方法,結(jié)果表明該方法簡便､準確､重復(fù)性好,可用于分析獨一味､螃蟹甲､糙蘇和蘿卜秦艽中5種環(huán)烯醚萜苷的含量｡

3.2螃蟹甲的HPLC指紋圖譜
高詠莉等建立螃蟹甲藥材的HPLC指紋圖譜,用于螃蟹甲的品質(zhì)控制及產(chǎn)地鑒別,實驗采用HPLC法對拉薩､昌都､林芝､那曲､山南､乃東､錯那等產(chǎn)地的10批螃蟹甲藥材進行HPLC圖譜的比較,以14個共有峰為評價指標,并對其中的4個色譜峰進行了指認｡結(jié)果表明不同產(chǎn)地的螃蟹甲藥材,化合物shanzhiside methyl ester和sesamoside的峰面積相對比較穩(wěn)定且峰面積較高,而化合物8-acetyls-hanzhisidemethyl ester和pulchelloside-I的峰面積相對較小且差異較大｡所以在對不同產(chǎn)地的螃蟹甲藥材進行質(zhì)量評價時,應(yīng)將8-acetylshanzhiside methylester或pulchelloside-I作為定性､定量指標,從而對不同產(chǎn)地螃蟹甲藥材進行更好､更科學(xué)的質(zhì)量評價｡

3.3螃蟹甲成方制劑的質(zhì)量標準
董海彥建立了藏藥七味螃蟹甲丸(螃蟹甲､訶子､石灰華､甘草､叢菔､檀香和丁香)的質(zhì)量控制方法,實驗采用薄層色譜法對處方中丁香､檀香進行定性鑒別,采用HPLC法測定訶子中沒食子酸和甘草中甘草酸的含量,結(jié)果表明該方法專屬性強､簡便可行､重復(fù)性好,可以有效控制七味螃蟹甲丸的內(nèi)在質(zhì)量｡

4結(jié)語

近年來,隨著人們對藏醫(yī)藥的不斷關(guān)注,有關(guān)藏藥螃蟹甲的研究引起了一些研究者的興趣｡目前,有關(guān)螃蟹甲的研究資料非常有限,化學(xué)成分的研究非常少,對其化學(xué)成分的研究沒有系統(tǒng)性､完整性;藥理活性的研究也較少,集中在鎮(zhèn)痛､抗炎,鎮(zhèn)咳､祛痰､平喘,抗菌和抗腫瘤方面等,而且發(fā)揮作用的活性物質(zhì)還不明確,相關(guān)藥理作用機制研究也報道甚少;有關(guān)質(zhì)量標準的研究也沒有建立一個系統(tǒng)､廣泛､適用的方法;而且其制劑也很簡單,劑型也少｡
由于螃蟹甲是青藏高原地區(qū)野生植物藥材,主要分布在高海拔､低壓缺氧､強紫外線和長時間光照的特殊生態(tài)環(huán)境,筆者推測其可能具有良好的抗疲勞和耐缺氧活性｡截至目前,通過文獻檢索分析,有關(guān)螃蟹甲野生藥材抗疲勞和耐缺氧活性的研究也未見報道,筆者認為該方面的內(nèi)容應(yīng)該是研究螃蟹甲的一個重要方向｡隨著對該藥的不斷深入研究,有可能開發(fā)出一種新型的抗缺氧藥物,為進入高原和長期居住在高原的人群的身體健康提供物質(zhì)保障｡因此,有必要對藏藥習(xí)用藥材螃蟹甲的各個方面展開深入研究｡

參考文獻:（略）