本研究以羧甲基纖維素鈉為唯一碳源作初篩培養(yǎng)基,利用剛果紅變色圈法從張弓老酒酒業(yè)有限公司大曲中分離得到一株高產(chǎn)的纖維素酶細菌D39。經(jīng)細菌形態(tài)學(xué)觀察,生理生化實驗,并結(jié)合16S rDNA序列分析,初步鑒定其為枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis）。并通過單因素試驗和響應(yīng)面試驗優(yōu)化確定最佳產(chǎn)酶條件為:接種量4%,培養(yǎng)時間3 d,pH值4。優(yōu)化后其酶活為1 014 U/mL,與優(yōu)化前相比產(chǎn)酶能力提高1.3倍。本研究結(jié)果可為后續(xù)提高釀酒原料利用率,縮短發(fā)酵時間,以及控制大曲發(fā)酵培養(yǎng)工藝提供參考依據(jù)。 

【文章來源】：基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué). 2020,39(09)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：10 頁

【部分圖文】：

菌株纖維素水解

分子生物學(xué)鑒定：由D39菌株P(guān)CR產(chǎn)物瓊脂糖電泳圖可知(圖4)，細菌菌株D39的DNA經(jīng)PCR產(chǎn)物擴增，電泳在約1 400 bp處出現(xiàn)特異性擴增條帶，與預(yù)期結(jié)果相符。在NCBI數(shù)據(jù)庫中下載相似度高的菌株序列。將測序得到的基因序列在基因數(shù)據(jù)庫(Gen Bank)中Blast進行同源性比對，并利用MEGA6.0軟件的Neighbor-Joining構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(圖5)，結(jié)果表明菌株D39與枯草芽孢桿菌的16S r DNA序列的相似程度最高且同源性最近，因此可初步鑒定為枯草芽孢桿菌(圖5)。圖3 D39細胞形態(tài)(10×100)

D39細胞形態(tài)(10×100)

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3381756